西瓜[Citrullus lanatus（Thunb.）Mansum.&Nakai]是我國重要的園藝作物之一。在早春西瓜幼苗栽培過程中,低溫弱光雙重脅迫嚴(yán)重影響了西瓜幼苗的生長。然而,國內(nèi)外的研究主要集中于低溫脅迫,對低溫弱光雙重脅迫的研究報道相對較少。本文利用西瓜全基因測序材料97103為實驗材料,通過低溫、弱光、低溫弱光三種脅迫方式,分別處理三葉一心期的西瓜幼苗。測定西瓜幼苗的光合作用相關(guān)參數(shù),明確不同脅迫條件下葉片光系統(tǒng)受損傷的程度;測定各個時間點葉片中ROS積累等生理指標(biāo),明確葉片細(xì)胞內(nèi)的氧化還原狀態(tài)以及細(xì)胞受損傷程度;提取三種脅迫處理6 h后的西瓜幼苗真葉的RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序;對轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行GO富集分析,pathway分析。主要實驗結(jié)果如下:1.低溫、低溫弱光脅迫處理后西瓜幼苗葉片葉綠素?zé)晒饧肮夂献饔孟嚓P(guān)參數(shù)均有所下降。低溫處理組葉片PSⅡ受損嚴(yán)重,弱光在一定程度上緩解了低溫傷害。脅迫處理后,低溫組的凈光合速率,光呼吸均下降;弱光和低溫弱光處理組,凈光合速率及光呼吸均維持在較低水平。葉綠素?zé)晒鈪?shù)表明,低溫組葉片F(xiàn)v/Fm、NPQ、ΦPSII和q P下降幅度較... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
1 前言
    1.1 課題的提出
    1.2 植物低溫響應(yīng)機(jī)制
        1.2.1 低溫脅迫誘導(dǎo)植物生理響應(yīng)
        1.2.2 低溫脅迫誘導(dǎo)植物分子響應(yīng)
    1.3 植物弱光響應(yīng)機(jī)制
    1.4 雙重脅迫研究進(jìn)展
    1.5 研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
    2.3 西瓜幼苗脅迫處理生理指標(biāo)測定
        2.3.1 西瓜幼苗冷傷害指標(biāo)的統(tǒng)計與測定
        2.3.2 西瓜葉片丙二醛（MDA）含量的測定
        2.3.3 葉綠素?zé)晒庀嚓P(guān)參數(shù)的測定
        2.3.4 光合作用相關(guān)參數(shù)的測定
        2.3.5 相對葉綠素含量的測定
        2.3.6 H_2O_2組織化學(xué)染色
        2.3.7 H_2O_2含量的測定
        2.3.8 O_2~-產(chǎn)生速率的測定
        2.3.9 抗壞血酸（AsA、DHA）含量的測定
        2.3.10 谷胱甘肽（GSH、GSSG）含量的測定
        2.3.11 可溶性蛋白含量的測定
        2.3.12 關(guān)鍵抗氧化酶活性的測定
        2.3.13 生理數(shù)據(jù)分析
    2.4 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
        2.4.1 葉片總RNA提取及c DNA合成
        2.4.2 RNA質(zhì)量檢測
        2.4.3 轉(zhuǎn)錄組測序
        2.4.4 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)質(zhì)量評估及數(shù)據(jù)處理
        2.4.5 差異基因分析
        2.4.6 差異表達(dá)基因的GO富集分析
        2.4.7 差異表達(dá)基因的Pathway分析
        2.4.8 qRT-PCR驗證
3 結(jié)果與分析
    3.1 生理數(shù)據(jù)分析
        3.1.1 西瓜幼苗冷傷害指數(shù)
        3.1.2 西瓜葉片丙二醛（MDA）含量
        3.1.3 葉綠素?zé)晒鈪?shù)
        3.1.4 光合作用參數(shù)
        3.1.5 葉綠素含量
        3.1.6 H_2O_2化學(xué)組織染色
        3.1.7 H_2O_2含量
        3.1.8 O_2~-產(chǎn)生速率
        3.1.9 AsA、DHA含量及AsA/DHA
        3.1.10 GSH、GSSG含量及GSH/GSSG
        3.1.11 關(guān)鍵抗氧化酶活性
    3.2 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
        3.2.1 RNA濃度及質(zhì)量檢測
        3.2.2 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)產(chǎn)出質(zhì)量
        3.2.3 HISAT2比對結(jié)果
        3.2.4 各轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)結(jié)果主成分分析及聚類分析
        3.2.5 差異基因分析
        3.2.6 差異表達(dá)基因GO富集分析
    3.3 低溫、弱光脅迫相互作用的分析
        3.3.1 低溫轉(zhuǎn)錄組特異性表達(dá)基因GO富集及pathway分析
        3.3.2 弱光轉(zhuǎn)錄組特異性表達(dá)基因GO富集及pathway分析
        3.3.3 低溫弱光轉(zhuǎn)錄組特異性表達(dá)基因GO富集及pathway分析
        3.3.4 三種脅迫轉(zhuǎn)錄組共表達(dá)基因GO富集及pathway分析
        3.3.5 低溫弱光vs低溫差異表達(dá)基因GO富集及pathway分析
        3.3.6 qRT-PCR驗證
4 討論
    4.1 低溫、弱光及其雙重脅迫對西瓜幼苗光合作用的影響
    4.2 低溫、弱光及其雙重脅迫對ROS積累的影響
    4.3 低溫、弱光及其雙重脅迫對關(guān)鍵抗氧化酶活性的影響
    4.4 低溫、弱光及其雙重脅迫在轉(zhuǎn)錄組水平上的相互作用
5 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[4]低溫脅迫對彩葉草的生理效應(yīng)及抗寒性研究[D]. 王兆.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
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[6]CAT調(diào)控水稻葉片光呼吸過程中抗氧化系統(tǒng)的機(jī)理研究[D]. 吳倩.揚州大學(xué) 2013
[7]低溫弱光對甜瓜幼苗生理特性的影響[D]. 李琦.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[8]蘿卜低溫弱光脅迫響應(yīng)的蛋白組學(xué)與基因差異表達(dá)研究[D]. 相菲.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
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[10]丹參普遍脅迫蛋白基因（SmUSP1）克隆及其功能的初步研究[D]. 趙燕燕.陜西師范大學(xué) 2009



本文編號：3520357