元寶楓（Acer truncatum Bunge）是槭樹科槭樹屬原產(chǎn)中國的落葉喬木,屬于重要的彩葉觀葉樹種,也是近些年來具有重要開發(fā)價(jià)值的經(jīng)濟(jì)樹種,同時(shí),隨著元寶楓育種越來越受到重視,相關(guān)科研人員不斷選育出更多的新無性系品種/品系,因此,研究元寶楓無性系品種/品系DNA指紋圖譜的構(gòu)建技術(shù)十分必要。本研究以課題組選育和收集的23個(gè)元寶楓無性系為研究對(duì)象,采集各無性系的葉片為試驗(yàn)材料,探究元寶楓葉片基因組DNA的最佳提取方法,建立了SRAP-PCR擴(kuò)增的最佳反應(yīng)體系,對(duì)其遺傳多樣性及親緣關(guān)系進(jìn)行了分析,構(gòu)建了23個(gè)無性系優(yōu)良品種的指紋圖譜,為其以后的親本選擇,品種鑒定及新品種的保護(hù)及分類奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.確定了合適的DNA提取方法。通過采用傳統(tǒng)的CTAB法、改良CTAB法與試劑盒法對(duì)元寶楓無性系葉片DNA進(jìn)行提取,確定了適合元寶楓的葉片DNA提取的方法,即:改良CTAB法和試劑盒法�？紤]到試驗(yàn)樣品量不是很大,從節(jié)儉經(jīng)費(fèi)考慮最終確定采用改良CTAB進(jìn)行本次試驗(yàn)。2.建立了元寶楓SRAP-PCR的最佳反應(yīng)體系。通過正交實(shí)驗(yàn),得出了適合元寶楓無性系SRAP-PCR的最佳反應(yīng)體系,... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

部分元寶楓無性系葉片

元寶楓無性系 DNA 指紋圖譜的構(gòu)建 結(jié)果與分析.1 元寶楓無性系基因組 DNA 的提取DNA 提取常見的方法有 SDS 法，常規(guī) CTAB 法，改良 CTAB 法及試劑盒法，驗(yàn)采用傳統(tǒng) CTAB 法、改良 CTAB 法及試劑盒法三種種進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果表明，傳TAB 法(圖 3-1)，拖帶嚴(yán)重，樣孔亮，彌散現(xiàn)象也較較嚴(yán)重，并不適合元寶楓葉片，而試劑盒法（圖 3-2）與改良的 CTAB 法（圖 3-3）其 DNA 的質(zhì)量及濃度均符要求，改良 CTAB 法耗時(shí)較長，但是濃度大；試劑盒法，省時(shí)，操作簡單，但花費(fèi)度低，考慮到試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)及樣品數(shù)量不是很多，所以采用改良的 CTAB 法進(jìn)行對(duì)元性系基因組 DNA 的提取。

元寶楓無性系 DNA 指紋圖譜的構(gòu)建 結(jié)果與分析.1 元寶楓無性系基因組 DNA 的提取DNA 提取常見的方法有 SDS 法，常規(guī) CTAB 法，改良 CTAB 法及試劑盒法，驗(yàn)采用傳統(tǒng) CTAB 法、改良 CTAB 法及試劑盒法三種種進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果表明，傳TAB 法(圖 3-1)，拖帶嚴(yán)重，樣孔亮，彌散現(xiàn)象也較較嚴(yán)重，并不適合元寶楓葉片，而試劑盒法（圖 3-2）與改良的 CTAB 法（圖 3-3）其 DNA 的質(zhì)量及濃度均符要求，改良 CTAB 法耗時(shí)較長，但是濃度大；試劑盒法，省時(shí)，操作簡單，但花費(fèi)度低，考慮到試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)及樣品數(shù)量不是很多，所以采用改良的 CTAB 法進(jìn)行對(duì)元性系基因組 DNA 的提取。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[3]桂花種質(zhì)資源遺傳多樣性研究及品種鑒定[D]. 李梅.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
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碩士論文
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[3]部分國蘭品種（系）的SRAP遺傳多樣性研究[D]. 龔理.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[4]觀賞芍藥部分新種質(zhì)SSR遺傳多樣性分析及DNA指紋圖譜構(gòu)建[D]. 季麗靜.北京林業(yè)大學(xué) 2013
[5]紫薇微衛(wèi)星標(biāo)記開發(fā)及矮化性狀的分子標(biāo)記[D]. 劉陽.北京林業(yè)大學(xué) 2013
[6]楊樹新品種（無性系）SSR和ISSR指紋圖譜的構(gòu)建[D]. 劉春英.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[7]玫瑰遺傳多樣性的SRAP分析與品種指紋圖譜構(gòu)建[D]. 徐宗大.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[8]白楊雜種三倍體無性系形態(tài)鑒定及指紋圖譜構(gòu)建[D]. 尹敏娟.北京林業(yè)大學(xué) 2011
[9]中國芍藥品種遺傳多樣性SRAP分析和核心種質(zhì)的初步構(gòu)建[D]. 王曉菡.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[10]雜交鵝掌楸優(yōu)良遺傳型選擇及無性系指紋圖譜構(gòu)建[D]. 王龍強(qiáng).南京林業(yè)大學(xué) 2010



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