發(fā)布時間：2021-11-24 17:08

　　近年來,中國長江流域以南沿海沙梨產(chǎn)區(qū)新發(fā)生一種被稱之為“梨黑色斑點病”的葉部病害。該病造成梨樹葉片大量異常脫落,不僅削弱樹勢,影響當(dāng)年梨產(chǎn)量和品質(zhì),造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。然而引起該病害的病原及癥狀產(chǎn)生的機(jī)理不明,生產(chǎn)上對該病害尚缺乏有效防治辦法。本研究通過形態(tài)學(xué)觀察、多基因測序分析及致病性測定,旨在明確引起我國梨黑色斑點病的病原。在此基礎(chǔ)上,為了探討黑點癥狀產(chǎn)生的機(jī)理,利用ATMT方法對梨黑色斑點病菌進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,篩選出遺傳穩(wěn)定、形態(tài)學(xué)特征和致病力相對野生型菌株沒有發(fā)生顯著變化的轉(zhuǎn)化子,在梨葉上接種標(biāo)記病菌并熒光顯微觀察其侵染。取得的主要研究結(jié)果如下:1.梨黑色斑點病的病原鑒定。2013年至2015年先后從我國福建、江西、廣西、湖北等發(fā)生了黑色斑點病的梨樹上采集病葉,分離獲得菌株447個,觀察這些分離物的菌落形態(tài)及無性態(tài)特征,并對福建省全部分離物及江西、廣西、湖北等部分分離物的ITS序列進(jìn)行測定分析,397個菌株鑒定為炭疽菌。對福建省的25個分離物進(jìn)行多基因（GAPDH、CAL、ACT、CHS-1、TUB2及GS）及Apn2/MAT（ApMat）位點序列分析,結(jié)果顯示397個炭疽菌為果生... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 梨黑色斑點病的發(fā)生與危害
    1.2 關(guān)于果樹落葉的主要誘發(fā)因素
    1.3 由炭疽菌引起的果樹葉部斑點病
    1.4 炭疽菌的鑒定方法
        1.4.1 形態(tài)學(xué)鑒定
        1.4.2 分子生物學(xué)鑒定
    1.5 植物炭疽菌侵染過程的研究
    1.6 分子標(biāo)記技術(shù)在植物病原真菌侵染研究中的應(yīng)用
        1.6.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化
        1.6.2 綠色熒光蛋白標(biāo)記
    1.7 研究的目的和意義
第二章 梨黑色斑點病的病原鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 病害的田間癥狀表現(xiàn)
        2.2.2 病原菌的分離純化及形態(tài)學(xué)特征
        2.2.3 梨黑色斑點病菌致病性測定結(jié)果
        2.2.4 病原菌寄主范圍的測定結(jié)果
        2.2.5 我國梨樹黑色斑點病菌核苷酸序列分析結(jié)果
    2.3 結(jié)論與討論
第三章 果生炭疽菌GFP標(biāo)記及轉(zhuǎn)化子菌株的篩選
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試菌株
        3.1.2 供試培養(yǎng)基
        3.1.3 主要試劑
    3.2 方法
        3.2.1 潮霉素B對果生炭疽菌生長的影響
        3.2.2 農(nóng)桿菌菌液的制備
        3.2.3 轉(zhuǎn)化子的獲得
        3.2.4 轉(zhuǎn)化子菌株的鑒定
        3.2.5 轉(zhuǎn)化子菌株的篩選
    3.3 試驗結(jié)果
        3.3.1 潮霉素對果生炭疽菌生長的影響
        3.3.2 轉(zhuǎn)化子菌株的獲得及驗證
        3.3.3 轉(zhuǎn)化子的篩選
    3.4 結(jié)論與討論
第四章 果生炭疽菌對梨葉侵染的顯微觀察
    4.1 材料
        4.1.1 供試菌株
        4.1.2 試驗材料
        4.1.3 主要儀器及試劑
    4.2 實驗方法
        4.2.1 接種體的制備
        4.2.2 ‘翠冠’梨葉片的接種試驗
    4.3 試驗結(jié)果
    4.4 結(jié)論與討論
第五章 全文結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
附錄1 主要試劑及溶液的配制
附錄2 碩士期間發(fā)表論文
附圖
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]炭疽菌屬真菌分類研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 韓長志.  中國植保導(dǎo)刊. 2015(06)
[2]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的蘋果炭疽葉枯病菌遺傳轉(zhuǎn)化及插入突變體的篩選[J]. 張俊祥,吳建圓,冀志蕊,遲福梅,蔣曉玲,董慶龍,周宗山.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2014(06)
[3]蘋果炭疽葉枯病病原Glomerella cingulata及其侵染過程[J]. 任斌,高小寧,韓青梅,黃麗麗.  植物保護(hù)學(xué)報. 2014(05)
[4]梨膠胞炭疽病菌的分離、鑒定及其生物學(xué)特性(英文)[J]. 劉郵洲,陳志誼,錢國良,聶亞峰,喬俊卿,劉鳳權(quán).  Agricultural Science & Technology. 2014(02)
[5]茶樹炭疽菌Colletotrichum fructicola的鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 劉威,葉乃興,陳玉森,連玲麗,劉偉,金珊,賴建東,謝運(yùn)海.  茶葉科學(xué). 2014(01)
[6]農(nóng)桿菌介導(dǎo)蘋果炭疽病菌的遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化子鑒定[J]. 王海艷,李保華,張清明,李桂舫,董向麗,王彩霞.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(09)
[7]福建省梨異常早期落葉初步調(diào)查與分析[J]. 陳義挺,劉鑫銘,陳小明,陳婷,王衛(wèi),張長和,包建平,黃新忠.  龍巖學(xué)院學(xué)報. 2011(05)
[8]綠色熒光蛋白在植物上應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 黃淑賢.  北京農(nóng)業(yè). 2010(21)
[9]福建梨早期大量落葉誘因與防控策略[J]. 黃新忠,陳義挺,雷龑,蔡盛華,陳小明.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2010(02)
[10]綠色熒光蛋白及其在農(nóng)作物研究中的應(yīng)用[J]. 余林輝,姚偉,段真珍,何正權(quán),來佑勤.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(36)



本文編號：3516413