發(fā)布時間：2021-10-30 13:18

　　蘿卜（Raphanus sativus L.,2n=2x=18）,是十字花科蘿卜屬一、二年生草本植物,以膨大的肉質(zhì)根為食用器官,營養(yǎng)豐富。蘿卜離體再生培養(yǎng)技術(shù)是種質(zhì)創(chuàng)新和遺傳轉(zhuǎn)化的一種重要手段,可以在短時間內(nèi)培養(yǎng)大量與供體相同的植株,獲得符合預(yù)期性狀的個體。研究表明,蘿卜是一種再生執(zhí)拗型植物,但在十字花科的其他植物中,也有部分能建立高效的離體再生體系。但目前蘿卜的離體再生體系尚不完善,實際應(yīng)用中還存在較多的問題,如基因型影響、激素濃度選擇和配比、外源添加劑應(yīng)用等。本研究以合適的種子消毒方法為前提,從基因型、激素濃度配比、外植體類型和外源添加物篩選四個方面,研究了蘿卜不定芽再生影響因素;探索了培養(yǎng)基中NAA濃度對再生芽生根的影響;測定了 ’XBC’下胚軸離體脫分化形成愈傷過程中抗氧化酶活性和可溶性蛋白含量的變化,旨在為構(gòu)建蘿卜離體再生體系和遺傳轉(zhuǎn)化奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:1.通過研究蘿卜3種基因型離體再生的影響因素實驗,發(fā)現(xiàn)基因型會影響愈傷組織形成率、褐變率和不定芽再生率。三種外植體類型切段（下胚軸、帶柄子葉和葉柄）脫分化形成愈傷組織較容易,三者的愈傷誘導(dǎo)率均高于80%,但形成不定芽較困... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１消毒試驗的污染率統(tǒng)計

處理號??Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??圖２－２不同基因型下胚軸的再生系數(shù)??Ｆｉｇ．?２－２?Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ?ｗｉｔｈ?ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ??注：用Ｄｕｎｃａｎ多重比較在＇＂ａ＝０．０５水平上做顯著性測驗，字母相同者表示差異不顯著。下表同。??Ｎｏｔｅ：?Ｄｕｎｃａｎ＇ｓ?ｍｕｌｔｉｐｌｅ?ｒａｎｇｅ?ｔｅｓｔ，?ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ｌｅｔｔｅｒ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｎｏ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ?ａｔ??５％?ｌｅｖｅｌ．?Ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ａｓ?ｆｏｌｌｏｗｓ．??ｍｍｍ??圖２－３愈傷組織、再生芽和叢生芽的形態(tài)??Ａ：?ＹＢ下胚軸愈傷組織；Ｂ：?ＹＢ下胚軸再生芽；Ｃ：?ＹＢ叢生芽；Ｄ：?ＹＢ帶柄子葉再生芽；Ｅ：??ＭＳＨ帶柄子葉愈傷組織；Ｆ：?ＸＢＣ下胚軸雙芽點再生芽??Ｆｉｇ．?２－３?Ｔｈｅ?ｆｏｒｍｓ?ｏｆ?ｃａｌｌｕｓ，?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ?ｂｕｄ?ａｎｄ?ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ?ｂｕｄ??Ａ：?ＹＢ?ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ?ｃａｌｌｕｓ；?Ｂ：?ＹＢ?ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?ｂｕｄｓ；?Ｃ：?Ｔｈｅ?ｍｕｌｔｉｐｌｅ?ｓｈｏｏｔｓ?ｏｆ?ＹＢ；?Ｄ：?ＹＢ??ｐｅｔｉｏｌｅ?ｗｉｔｈ?ｃｏｔｙｌｅｄｏｎ?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?ｂｕｄ；?Ｅ：?ＭＳＨ?ｃｏｔｙｌｅｄｏｎｓ?ｗｉｔｈ?ｐｅｔｉｏｌｅ?ｃａｌｌｕｓ；?Ｆ：?ＸＢＣ?ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ??ｒ

甚至有的實驗組沒有出現(xiàn)再生芽，可能是因為基因型差異。??三種外植體都會在切口處形成愈傷組織，接種１０天左右，三種外植體都出現(xiàn)一??定程度的體積增大，但帶柄子葉和葉柄的膨大倍數(shù)更高（圖２－５，Ｂ）�？赡苁且驗閹П�??子葉和葉柄內(nèi)都含有一定量的葉綠素，在培養(yǎng)室的光照下可以通過吸收培養(yǎng)基中的營??養(yǎng)元素進行一定的光合作用，特別是帶柄子葉，其在體積上可以達到原來的２－３倍。??葉柄的一端形成愈傷組織后，會從愈傷組織中產(chǎn)生不定芽（圖２－５，０。??２．５硝酸銀對不定芽再生的影響??以‘Ｎａｕ－ＸＢＣ’蘿卜為基因型，４天苗齡的無菌苗為外植體材料，除去生長點之后，??切取長度為０．５？１?ｃｍ的下胚軸，平鋪在培養(yǎng)基上，每個培養(yǎng)皿接種１０個。以ＭＳ＋３??ｍｇ．Ｕ１?６－ＢＡ＋０．２?ｍｇ．Ｕ１?ＮＡＡ＋３％蔗糖＋０．８％瓊脂為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的硝酸??銀，接種２０天后統(tǒng)計其愈傷組織形成數(shù)、褐變數(shù)和再生不定芽數(shù)等數(shù)據(jù)。??１６??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]不結(jié)球白菜離體培養(yǎng)再生體系的優(yōu)化及抗病轉(zhuǎn)基因研究[D]. 陳敏敏.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
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本文編號：3466799