香蕉在枯萎病誘導(dǎo)下microRNA的差異表達(dá)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 03:09
miRNA(microRNA)是一類非編碼的單鏈小分子RNA,約18-25nt長度,主要對靶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。miRNA的表達(dá)比編碼基因更加迅速,翻譯過程不受影響,對目標(biāo)基因的調(diào)控效率較高,在植物的生長發(fā)育、逆境脅迫、表觀遺傳等方面起著非常重要的作用。本實(shí)驗(yàn)聯(lián)合采用高通量小RNA測序和降解組測序技術(shù),以香蕉品種“巴西蕉”及尖孢鐮刀菌古巴專化型4號小種為遺傳材料,構(gòu)建病原菌侵染四個(gè)階段的小RNA庫和降解組庫,結(jié)合生物信息學(xué)分析,建立香蕉在病原菌誘導(dǎo)下不同時(shí)段的miRNA差異表達(dá)譜,獲得香蕉病理反應(yīng)相關(guān)的已知miRNA和新miRNA,并確定各miRNA所對應(yīng)的靶基因,通過qRT-PCR進(jìn)行驗(yàn)證,解析香蕉在枯萎病菌誘導(dǎo)下的miRNA及其靶基因的表達(dá)模式和調(diào)控機(jī)理,為香蕉枯萎病的分子病理機(jī)制提供新的遺傳信息和理論揭示:1、通過小RNA高通量技術(shù)進(jìn)行測序,建立了四個(gè)小RNA庫:Banana CK、 Banana 4h、Banana 24h、Banana 6d。分別得到16013204、16551770、17733937和18429778條序列。將高質(zhì)量reads去接頭、去污染、去polyA后,...
【文章來源】:海南大學(xué)海南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:128 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1植物miRNA的生物合成??Fig^l.?The?process?of?miRNA?biogenesis?in?plant??3??
植物小RNA側(cè)序流程圖
?降解組文庫測序采用Illumina?Genome?analyzer系統(tǒng),樣品送往華大基因深圳公司完??成。圖2-2是降解組測序流程。??RNA^^??Size?fractionation?(18-BOnt》????5-??5*?adaptor?ligation?j???5.——3’??3*?adaptor?ligation?I????5*?3*??RT ̄PC?只?I??曼―—藝?????Sequencing..,爹?5*??圖2-1植物。遥危翜y序流程圖??Figure2-1.?small?RNA?sequencing?experiment?process?for?plant??mRNA?-?target?of?nvRNA?mRNA??AAAAAA?(A)^?^?—?-????f?]"??miRNA-directe<3?Cleavage???mRNA?decay?今??,?3*-End?of?cleaved?mRNA?3*-End?of?degraded?mRNA??AAAAAA?(A)!?5-Pi—A—畫?AAAAAA'A)口??^?PolylA)?RNA?ex帖饑on????5’-P?AAAAAA?W。????5.-RNA?adap巧r?li妒tion??5*?AAAAAA?(A)???命和??Reverse?t?巧?nsc"pt?記o??命?Second?strand?syntttesis?(make?cONA)??y?"g?5.??^?'^y^X?Cleave?化?captu?巧??▼?20-bp?
本文編號:3413078
【文章來源】:海南大學(xué)海南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:128 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1植物miRNA的生物合成??Fig^l.?The?process?of?miRNA?biogenesis?in?plant??3??
植物小RNA側(cè)序流程圖
?降解組文庫測序采用Illumina?Genome?analyzer系統(tǒng),樣品送往華大基因深圳公司完??成。圖2-2是降解組測序流程。??RNA^^??Size?fractionation?(18-BOnt》????5-??5*?adaptor?ligation?j???5.——3’??3*?adaptor?ligation?I????5*?3*??RT ̄PC?只?I??曼―—藝?????Sequencing..,爹?5*??圖2-1植物。遥危翜y序流程圖??Figure2-1.?small?RNA?sequencing?experiment?process?for?plant??mRNA?-?target?of?nvRNA?mRNA??AAAAAA?(A)^?^?—?-????f?]"??miRNA-directe<3?Cleavage???mRNA?decay?今??,?3*-End?of?cleaved?mRNA?3*-End?of?degraded?mRNA??AAAAAA?(A)!?5-Pi—A—畫?AAAAAA'A)口??^?PolylA)?RNA?ex帖饑on????5’-P?AAAAAA?W。????5.-RNA?adap巧r?li妒tion??5*?AAAAAA?(A)???命和??Reverse?t?巧?nsc"pt?記o??命?Second?strand?syntttesis?(make?cONA)??y?"g?5.??^?'^y^X?Cleave?化?captu?巧??▼?20-bp?
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