番茄谷氧還蛋白基因GRXS16在油菜素內(nèi)酯誘導(dǎo)的百菌清降解中的功能
發(fā)布時(shí)間:2021-09-28 15:37
農(nóng)藥的使用幫助農(nóng)作物抵御蟲害、雜草等生物脅迫,保障了作物的產(chǎn)量,但農(nóng)藥的過量及不合理使用導(dǎo)致土壤環(huán)境、大氣環(huán)境及農(nóng)作物中殘留大量農(nóng)藥,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及環(huán)境安全、糧食安全等帶來了一系列危害。因此,鑒定植物中參與農(nóng)藥降解機(jī)制的基因?qū)τ行Т龠M(jìn)農(nóng)藥降解、降低農(nóng)藥殘留量有重要的意義。本文以番茄(Solanum lycopersicum L.cv.浙雜 809)以及野生型 Condine Red 為材料,以設(shè)施生產(chǎn)中普遍使用的百菌清CHT為目標(biāo)化合物,研究了 CGFS型谷氧還蛋白基因GRX在油菜素內(nèi)酯BRs誘導(dǎo)的百菌清降解中的作用。并結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù),獲得了番茄GRXS16基因過表達(dá)材料,研究了GRXS1 過量表達(dá)對百菌清降解的影響,進(jìn)一步證明了GR S16在百菌清降解中的重要作用。所得主要結(jié)果如下:1、運(yùn)用病毒誘導(dǎo)的基因沉默技術(shù)研究了番茄植株中NADPH氧化酶基因(RBOH1)沉默對BRs介導(dǎo)的CHT降解代謝過程的影響。結(jié)果表明,RBOH1沉默之后,CHT或BRs無法誘導(dǎo)解毒相關(guān)基因表達(dá),同時(shí)谷胱甘肽含量和比率及谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的活力均受到抑制,CHT殘留量增加。CHT和BRs可誘導(dǎo)CGFS型GRX...
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.2番茄和擬南芥GRX蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文?2BRs調(diào)控H,0,信號參與百菌清的降解??細(xì)胞中H2〇2的產(chǎn)生,沉默A30///基因之后,H202無法產(chǎn)生。前人研究表明,??BRs可通過調(diào)控NADPH氧化酶直接誘導(dǎo)H202的產(chǎn)生。本實(shí)驗(yàn)中沉默??之后,H2O2積累減少,實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。??Water?EBR?CHT?CHT+EBR??
麵幌??pTRV-TRV?pinV-RBOH/?pIRV-lRV?plRV-RBOHI??圖2.3?CHT和EBR處理對pTRV植株和pTRV-7?50///植株中的谷胱甘肽總量??(A)、GSH?含量(B)、GSSG?含量(C)、GSH/GSSG?值(D)的影響??Figure2.3?The?effect?of?CHT?and?EBR?treatment?on?the?total?glutathione?content??(A)、GSH?content?(B)、GSSG?content?(C)?and?ratio?of?GSH?/?GSSG?(D)?in?pTRV??plants?and?RBOH1?gene?silenced?plants??2.2.4/ffiO///沉默植株中解毒相關(guān)基因?qū)Γ茫龋院停牛拢姨幚淼捻憫?yīng)??為了研究三相解毒代謝相關(guān)基因在基因沉默植株中的基因表迖情??況,我們提取EBR處理3h的葉片組織RNA,逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,進(jìn)行熒光定??量PCR分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,單獨(dú)CHT處理、單獨(dú)EBR處理及CHT和EBR??共同處理均可顯著誘導(dǎo)pTRV植株中GS77、GS77和基因的上調(diào),表達(dá)量??增加了?75%、140%、170%;?68%、70%、120%;?33%、77%、164°/。,呈現(xiàn)階梯??狀趨勢。7?50///沉默植株中,GS77和GS77基因表達(dá)的本底水平有32%和40%??的上升。但單獨(dú)CHT處理、單獨(dú)EBR處理及CHT和EBR共同處理下GS71基??因表達(dá)并未比對照水平上升或下降到pTRV水平。表明;?及9///基因的沉默
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]職業(yè)衛(wèi)生工作存在的問題及對策探討[J]. 劉金玲,何順升,趙艷敏. 中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志. 2006(02)
[2]農(nóng)藥對土壤的污染及污染土壤的生物修復(fù)[J]. 劉長江,門萬杰,劉彥軍,張浩. 農(nóng)業(yè)系統(tǒng)科學(xué)與綜合研究. 2002(04)
[3]農(nóng)業(yè)有害生物治理[J]. 陳福良,鄭斐能. 農(nóng)藥科學(xué)與管理. 2001(02)
博士論文
[1]油菜素內(nèi)酯促進(jìn)番茄體內(nèi)百菌清降解中谷胱甘肽相關(guān)解毒途徑的機(jī)理研究[D]. 于高波.浙江大學(xué) 2012
[2]油菜素內(nèi)酯調(diào)控番茄農(nóng)藥降解的生理與分子機(jī)制[D]. 汪季濤.浙江大學(xué) 2010
[3]油菜素內(nèi)酯調(diào)控黃瓜光合作用、抗逆性及農(nóng)藥代謝的生理與分子機(jī)理研究[D]. 夏曉劍.浙江大學(xué) 2009
本文編號:3412187
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.2番茄和擬南芥GRX蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文?2BRs調(diào)控H,0,信號參與百菌清的降解??細(xì)胞中H2〇2的產(chǎn)生,沉默A30///基因之后,H202無法產(chǎn)生。前人研究表明,??BRs可通過調(diào)控NADPH氧化酶直接誘導(dǎo)H202的產(chǎn)生。本實(shí)驗(yàn)中沉默??之后,H2O2積累減少,實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。??Water?EBR?CHT?CHT+EBR??
麵幌??pTRV-TRV?pinV-RBOH/?pIRV-lRV?plRV-RBOHI??圖2.3?CHT和EBR處理對pTRV植株和pTRV-7?50///植株中的谷胱甘肽總量??(A)、GSH?含量(B)、GSSG?含量(C)、GSH/GSSG?值(D)的影響??Figure2.3?The?effect?of?CHT?and?EBR?treatment?on?the?total?glutathione?content??(A)、GSH?content?(B)、GSSG?content?(C)?and?ratio?of?GSH?/?GSSG?(D)?in?pTRV??plants?and?RBOH1?gene?silenced?plants??2.2.4/ffiO///沉默植株中解毒相關(guān)基因?qū)Γ茫龋院停牛拢姨幚淼捻憫?yīng)??為了研究三相解毒代謝相關(guān)基因在基因沉默植株中的基因表迖情??況,我們提取EBR處理3h的葉片組織RNA,逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,進(jìn)行熒光定??量PCR分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,單獨(dú)CHT處理、單獨(dú)EBR處理及CHT和EBR??共同處理均可顯著誘導(dǎo)pTRV植株中GS77、GS77和基因的上調(diào),表達(dá)量??增加了?75%、140%、170%;?68%、70%、120%;?33%、77%、164°/。,呈現(xiàn)階梯??狀趨勢。7?50///沉默植株中,GS77和GS77基因表達(dá)的本底水平有32%和40%??的上升。但單獨(dú)CHT處理、單獨(dú)EBR處理及CHT和EBR共同處理下GS71基??因表達(dá)并未比對照水平上升或下降到pTRV水平。表明;?及9///基因的沉默
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]職業(yè)衛(wèi)生工作存在的問題及對策探討[J]. 劉金玲,何順升,趙艷敏. 中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志. 2006(02)
[2]農(nóng)藥對土壤的污染及污染土壤的生物修復(fù)[J]. 劉長江,門萬杰,劉彥軍,張浩. 農(nóng)業(yè)系統(tǒng)科學(xué)與綜合研究. 2002(04)
[3]農(nóng)業(yè)有害生物治理[J]. 陳福良,鄭斐能. 農(nóng)藥科學(xué)與管理. 2001(02)
博士論文
[1]油菜素內(nèi)酯促進(jìn)番茄體內(nèi)百菌清降解中谷胱甘肽相關(guān)解毒途徑的機(jī)理研究[D]. 于高波.浙江大學(xué) 2012
[2]油菜素內(nèi)酯調(diào)控番茄農(nóng)藥降解的生理與分子機(jī)制[D]. 汪季濤.浙江大學(xué) 2010
[3]油菜素內(nèi)酯調(diào)控黃瓜光合作用、抗逆性及農(nóng)藥代謝的生理與分子機(jī)理研究[D]. 夏曉劍.浙江大學(xué) 2009
本文編號:3412187
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