草莓鑲脈病毒運(yùn)動(dòng)蛋白的鑒定及功能分析
發(fā)布時(shí)間:2021-09-22 15:35
植物病毒編碼的運(yùn)動(dòng)蛋白(MP)在病毒的胞間轉(zhuǎn)移過(guò)程中擔(dān)負(fù)著重要作用。目前,草莓鑲脈病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)編碼的MP蛋白尚不明確,SVBV侵染寄主植物后,病毒粒子如何實(shí)現(xiàn)胞間轉(zhuǎn)移的機(jī)制也不清楚。因此,本研究利用亞細(xì)胞定位、質(zhì)壁分離、細(xì)胞共定位以及運(yùn)動(dòng)缺陷型病毒載體互補(bǔ)試驗(yàn)等方法,確定了SVBV編碼的P1蛋白是MP蛋白,再利用雙分子熒光互補(bǔ)(Bi FC)、酵母雙雜交和凝膠阻滯等試驗(yàn)方法,初步探究了SVBV MP蛋白的胞間運(yùn)動(dòng)模式。另外,本研究制備了SVBV MP蛋白的多抗血清,為更加深入地研究SVBV MP蛋白的功能奠定了基礎(chǔ)。1 SVBV MP蛋白的鑒定克隆SVBV P1基因,插入p1300-YFP,得到重組表達(dá)質(zhì)粒p1300-P1-YFP。插入p Bin438,得到重組表達(dá)質(zhì)粒p Bin-P1。(1)P1的亞細(xì)胞定位含p1300-MPTMV-YFP,p1300-P1-YFP和空載體p1300-YFP的農(nóng)桿菌分別浸潤(rùn)本氏煙(Nicotiana benthamiana)葉片,浸潤(rùn)p1300-MPTMV-YFP和p1300-P1-YFP后...
【文章來(lái)源】:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
草莓鑲脈病毒侵染草莓癥狀圖
圖 2 SVBV 沈陽(yáng)分離物全基因組結(jié)構(gòu) 2 Organization of complete genomes of SVBV SY isol隋春等運(yùn)用 PCR 方法對(duì) SVBV 的特異性莓病毒的防治,主要通過(guò)抗性品種的選育
圖 4 農(nóng)桿菌浸潤(rùn)后 YFP 融合蛋白的亞細(xì)胞定位 After infiltrating by Agrobacterium tumefaciens subcellular localizations of YFP fus重組載體p1300-MPTMV-YFP、p1300-P1-YFP和空載體p1300-.0)分別浸潤(rùn)本氏煙葉片,72 h后,用10 % NaCl溶液處理葉片
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蕪菁花葉病毒長(zhǎng)春分離物p3基因的克隆、序列分析及P3蛋白抗血清的制備[J]. 張雅琦,祝富祥,王鳳婷,潘洪玉,李向東,劉金亮. 植物病理學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]質(zhì)壁分離及質(zhì)壁分離復(fù)原實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)[J]. 汪曉琳. 實(shí)驗(yàn)教學(xué)與儀器. 2015(Z1)
[3]雙分子熒光互補(bǔ)技術(shù)[J]. 樊晉宇,崔宗強(qiáng),張先恩. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2008(08)
[4]改造地高辛標(biāo)記DNA和檢測(cè)試劑盒用于凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)的新方法[J]. 祁小廷,柴小清,劉靖,柴團(tuán)耀. 遺傳. 2006(06)
[5]中國(guó)草莓屬(Fragaria)植物的分類研究[J]. 雷家軍,代漢萍,譚昌華,鄧明琴,趙密珍,錢亞明. 園藝學(xué)報(bào). 2006(01)
[6]酵母雙雜交技術(shù)在病毒學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 王玉娥,楊漢春. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2004(03)
[7]草莓病毒病研究進(jìn)展[J]. 周厚成,何水濤. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2003(05)
[8]胞間連絲研究的進(jìn)展[J]. 簡(jiǎn)令成,王紅,孫德蘭. 植物學(xué)通報(bào). 2003(04)
[9]草莓病毒病及脫病毒技術(shù)研究[J]. 廖俊杰. 廣東輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào). 2003(02)
[10]草莓屬二倍體種東北草莓(Fragariamandschurica Staudt)研究[J]. 雷家軍,望月龍也,鄧明琴. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2001(06)
本文編號(hào):3403994
【文章來(lái)源】:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
草莓鑲脈病毒侵染草莓癥狀圖
圖 2 SVBV 沈陽(yáng)分離物全基因組結(jié)構(gòu) 2 Organization of complete genomes of SVBV SY isol隋春等運(yùn)用 PCR 方法對(duì) SVBV 的特異性莓病毒的防治,主要通過(guò)抗性品種的選育
圖 4 農(nóng)桿菌浸潤(rùn)后 YFP 融合蛋白的亞細(xì)胞定位 After infiltrating by Agrobacterium tumefaciens subcellular localizations of YFP fus重組載體p1300-MPTMV-YFP、p1300-P1-YFP和空載體p1300-.0)分別浸潤(rùn)本氏煙葉片,72 h后,用10 % NaCl溶液處理葉片
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蕪菁花葉病毒長(zhǎng)春分離物p3基因的克隆、序列分析及P3蛋白抗血清的制備[J]. 張雅琦,祝富祥,王鳳婷,潘洪玉,李向東,劉金亮. 植物病理學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]質(zhì)壁分離及質(zhì)壁分離復(fù)原實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)[J]. 汪曉琳. 實(shí)驗(yàn)教學(xué)與儀器. 2015(Z1)
[3]雙分子熒光互補(bǔ)技術(shù)[J]. 樊晉宇,崔宗強(qiáng),張先恩. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2008(08)
[4]改造地高辛標(biāo)記DNA和檢測(cè)試劑盒用于凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)的新方法[J]. 祁小廷,柴小清,劉靖,柴團(tuán)耀. 遺傳. 2006(06)
[5]中國(guó)草莓屬(Fragaria)植物的分類研究[J]. 雷家軍,代漢萍,譚昌華,鄧明琴,趙密珍,錢亞明. 園藝學(xué)報(bào). 2006(01)
[6]酵母雙雜交技術(shù)在病毒學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 王玉娥,楊漢春. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2004(03)
[7]草莓病毒病研究進(jìn)展[J]. 周厚成,何水濤. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2003(05)
[8]胞間連絲研究的進(jìn)展[J]. 簡(jiǎn)令成,王紅,孫德蘭. 植物學(xué)通報(bào). 2003(04)
[9]草莓病毒病及脫病毒技術(shù)研究[J]. 廖俊杰. 廣東輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào). 2003(02)
[10]草莓屬二倍體種東北草莓(Fragariamandschurica Staudt)研究[J]. 雷家軍,望月龍也,鄧明琴. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2001(06)
本文編號(hào):3403994
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