今年來(lái),蔬菜作物病害的發(fā)生面積逐漸增加、危害程度不斷加劇,大大削弱了蔬菜生產(chǎn)帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,威脅國(guó)家的農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)安全。其中細(xì)菌性葉斑病是番茄上的一種重要細(xì)菌性病害,一般會(huì)導(dǎo)致番茄在內(nèi)的蔬菜作物減產(chǎn)10%～30%,嚴(yán)重時(shí)達(dá)50%以上。因此,解析蔬菜對(duì)細(xì)菌性葉斑病的響應(yīng)及防御機(jī)制對(duì)于探尋環(huán)境友好型抗病調(diào)控途徑具有重要的意義。近年來(lái)有研究認(rèn)為線粒體呼吸在植物抗病過(guò)程中起到了一定的參與作用,但其內(nèi)在機(jī)理還遠(yuǎn)不清楚。本文以番茄（Solanum lycopersicum）為材料,研究了番茄線粒體三羧酸循環(huán)（TCA）中α-酮戊二酸脫氫酶的E2亞基（Slα-kGDH E2）對(duì)細(xì)菌性葉斑�。≒seudomonas syringae pv.tomatoDC3000,Pst DC3000）侵染的響應(yīng),并通過(guò)基因沉默、基因過(guò)表達(dá)等方法研究了其在防御葉斑病侵染中的作用及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:1.研究了番茄線粒體呼吸及其相關(guān)基因在防御葉斑病中的響應(yīng)。以番茄為實(shí)驗(yàn)材料,研究了Pst DC3000接種后番茄TCA循環(huán)、線粒體電子傳遞等基因在葉片中的轉(zhuǎn)錄水平變化情況,并對(duì)番茄葉片水楊酸（SA）含量以及Slα-... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２?ＳＡ、ＲＯＳ、ＧＳＨ在抵抗生物及非生物脅迫過(guò)程中的相互作用??（Ｈｅｒｒｅｒａ－Ｖａｓｑｕｅｚ?ｅｔ?ａｌ．?２０１５）??

浙ｆｌ：大學(xué)碩士學(xué)位論文?人體內(nèi)被脂化的ＰＤＨ－Ｅ２亞基以及ａ－ＫＧＤＨ－Ｅ２亞基嚴(yán)重降低。然而甘氨酸含化不大，而且甘氨酸剪切酶系統(tǒng)以及Ｈ蛋白的脂化作用也都正常。表明了硫的缺失只是硫辛酸轉(zhuǎn)移到特定蛋白的缺失而不是硫辛酸生物合成的一般損傷。同樣的方法對(duì)酵母的代謝進(jìn)行類(lèi)推，假設(shè)Ｚ／Ｐ７基因作為導(dǎo)致疾病發(fā)生的主要因。通過(guò)對(duì)人體Ｚ／Ｐ７７基因的序列分析鑒定出了兩個(gè)雜合措意突變。通過(guò)對(duì)患的成纖維細(xì)胞中進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)這些突變是致病性的，并且ＬＩＰＴ１蛋白人體ａ－ＫＧＤＨ－Ｅ２亞基的脂化所需要的（Ｔｏｒｔ?ｅｋ／．?２０］４）。??：

ＡＯＸ介導(dǎo)的特異抗病毒信號(hào)途徑和與ＰＲ蛋白有關(guān)的抗真菌和細(xì)菌的信號(hào)途徑??（Ｍｕｒｐｈｙ?ｅ／ａ／．?１９９９）。本實(shí)驗(yàn)對(duì)番滿接種后ＳＡ含量進(jìn)行了研究，測(cè)定接種前（０??天）、接種后３６ｈ取侵染過(guò)的葉片并測(cè)定ＳＡ含量的變化情況，從圖２．２中可以??發(fā)現(xiàn)，在ｆｔ／?ＤＣ３０００接種番茄葉片３６?ｈ后內(nèi)源ＳＡ含量迅速升高為對(duì)照葉片ＳＡ??含量的４．５倍。該結(jié)果表明Ａ／ＤＣ３０００接種引起番茄內(nèi)源ＳＡ含量的提高，并且??可能激發(fā)了?ＳＡ誘導(dǎo)的下游防御反應(yīng)信號(hào)途徑。??７［?１???一６＿?＾＾??Ｓ?５?－??＞４：??〇）?＾??匚??ｒ?３?－??Ｉ?？??§２：?ｂ??。１?—??＜?１＂??（／）??０?ＭＯＣＫ?Ｐｓｔ?ＤＣ３０００??圖２．２￣ＤＣ３０００接種對(duì)番茄葉片ＳＡ含量的影響??Ｆｉｇ?２．２?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｌ＇Ｐｓｌ?ＤＣ３０００?ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ?ｏｎ?ＳＡ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｉｎ?ｔｏｍａｔｏ?ｌｅａｖｅｓ??２．２Ｊ／ＶＤＣ３０００接種對(duì)番茄葉片呼吸速率的影響??ａ－酮戊二酸脫氫酶被認(rèn)為是線粒體的活性氧感受器，研究ＤＣ３０００對(duì)番??茄呼吸作用的影響，有助于研究Ｓｌａ－ｋＧＤＨＥ２在番茄抵御ＰＷＤＣ３０００抗性路徑??中的作用與機(jī)制。我們測(cè)定了?ＤＣ３０００接種后第Ｏｈ、８ｈ，?１２ｈ植物線粒體呼??吸相關(guān)參數(shù)的變化，結(jié)果如圖２．３。／＾ＤＣ３０００接種后８ｈ，總呼吸降低１２．５８％，??細(xì)胞色素呼吸降低了?１６．１４％，交替呼吸增強(qiáng)１．９倍。／＾／ＤＣ３０００接種后１２ｈ，總??呼吸降低了?１７．４４％


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