中國(guó)水仙（Narcissus tazetta var.chinensis）是石蒜科水仙屬多年生草本植物,是觀賞價(jià)值極高的我國(guó)傳統(tǒng)花卉。由于中國(guó)水仙是三倍體植物,高度不育,一般只能通過小鱗莖進(jìn)行無性繁殖,以傳統(tǒng)的雜交育種方式很難培養(yǎng)出新的品種。中國(guó)水仙品種比較稀少,花色單一,產(chǎn)業(yè)發(fā)展受到了影響。通過對(duì)中國(guó)水仙的花色進(jìn)行分子機(jī)制方面的研究,對(duì)中國(guó)水仙花色進(jìn)行創(chuàng)新。本實(shí)驗(yàn)以中國(guó)水仙‘金盞銀臺(tái)’為材料,從中國(guó)水仙花瓣和副冠轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選出一條與類黃酮合成相關(guān)的b HLH轉(zhuǎn)錄因子,命名為Ntb HLH1,利用3′RACE技術(shù)克隆出這條基因的全長(zhǎng)序列,同時(shí)對(duì)其進(jìn)行序列分析;通過q-PCR檢測(cè)Ntb HLH1基因在中國(guó)水仙鱗莖盤以及花瓣和副冠在花苞期、始花期和盛花期的相對(duì)表達(dá)水平;構(gòu)建植物表達(dá)載體,進(jìn)行煙草穩(wěn)定轉(zhuǎn)化研究基因功能,并分析轉(zhuǎn)基因植株中類黃酮代謝途徑相關(guān)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)以及轉(zhuǎn)基因植株中總黃酮和花青素含量的變化;通過酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了Ntb HLH1與7個(gè)R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子互作的情況;通過雙熒光素酶試驗(yàn)分析了Ntb HLH1與7個(gè)R2R3-MYB形成復(fù)合物對(duì)類黃酮合成途徑的結(jié)構(gòu)基因... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

植物類黃酮合成途徑Fig.1-1Biosynthesispathwayofplantflavonoids

NtbHLH13’末端克隆Fig2-9Cloningof3’endsequenceofNtbHLH1

中國(guó)水仙類黃酮途徑bHLH基因克隆與表達(dá)分析18圖2-8NtbHLH13’RACE擴(kuò)增產(chǎn)物R1：第一輪；R2：第二輪；R3：第三輪；M：MarkerFig.2-83’RACRamplifiedproductofNtbHLH1R1：firstround；R2：secondround；R3：thirdround；M：Marker圖2-9NtbHLH13’末端克隆Fig2-9Cloningof3’endsequenceofNtbHLH12.2NtbHLH1基因ORF序列獲得與分析用DNAMAN將通過3’RACE獲得的NtbHLH1序列與在轉(zhuǎn)錄組找到已知的部分保守序列進(jìn)行拼接，通過對(duì)其進(jìn)行分析可以得出NtbHLH1的ORF大小為1896bp，編碼632個(gè)氨基酸，GenBank登錄號(hào)：QDS02912.1。2.3NtbHLH1的ORF擴(kuò)增根據(jù)拼接獲得NtbHLH1編碼區(qū)全長(zhǎng)，在起始密碼子和終止密碼子處設(shè)計(jì)特

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]桃花青苷著色及原花青素合成的調(diào)控機(jī)制研究[D]. 周暉.中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢植物園) 2015
[3]香雪蘭UDP-葡萄糖：類黃酮3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及其功能鑒定[D]. 隋昕.東北師范大學(xué) 2011
[4]蘋果bHLH轉(zhuǎn)錄因子MdTTL1對(duì)低溫誘導(dǎo)花青苷合成和果實(shí)著色的多途徑調(diào)控[D]. 謝興斌.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]中國(guó)水仙花型、花色發(fā)育基因（NTMADS1、NtMADS3、NTPDS1和NTPZDS1）的克隆與轉(zhuǎn)化[D]. 陳段芬.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2008

碩士論文
[1]中國(guó)水仙類黃酮代謝途徑2個(gè)R2R3-MYB基因的克隆與功能研究[D]. 吳嘉誠(chéng).福建農(nóng)林大學(xué) 2018
[2]中國(guó)水仙花轉(zhuǎn)錄組分析及類黃酮代謝MYB基因功能研究[D]. 王桂青.福建農(nóng)林大學(xué) 2018
[3]香雪蘭類黃酮代謝相關(guān)bHLH轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及其功能鑒定[D]. 單曉彤.東北師范大學(xué) 2016
[4]茶樹黃酮醇糖苷積累的研究及CsFLS基因功能的驗(yàn)證[D]. 吳亞會(huì).安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]小麥黃酮醇合成酶基因TaFLS2在植物抗旱和發(fā)育中的作用[D]. 齊月英.山東大學(xué) 2016
[6]漳州水仙鱗莖盤轉(zhuǎn)錄組分析及類黃酮合成途徑基因的表達(dá)[D]. 羅鵬.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[7]云南紅梨果皮轉(zhuǎn)錄因子MYB、bHLH和WD40互作及調(diào)控果皮著色機(jī)理研究[D]. 崔道雷.昆明理工大學(xué) 2013
[8]Hpt為選擇標(biāo)記中國(guó)水仙遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及導(dǎo)入LYCB基因研究[D]. 曾原飛.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[9]不同LED光源對(duì)番茄果實(shí)轉(zhuǎn)色過程中生理特性及果實(shí)品質(zhì)的影響[D]. 陳強(qiáng).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[10]中國(guó)水仙花色相關(guān)基因的分離和反義Psy基因的遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 鄒清成.浙江大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3397144