蘋果成花誘導(dǎo)階段MdCOL和MdNF-YB協(xié)同調(diào)控MdFT1轉(zhuǎn)錄的分子機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-15 18:23
FLOWERING LOCUS T(FT)蛋白在成花誘導(dǎo)階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,擬南芥CONSTANS(CO)蛋白和Nuclear Factor Y(NF-Y)轉(zhuǎn)錄因子家族可以協(xié)同調(diào)控AtFT的轉(zhuǎn)錄。試驗(yàn)以成花能力差異較大的‘長富2號(hào)’和‘秦冠’蘋果品種為材料,利用酵母單雜交、酵母雙雜交等試驗(yàn)方法,系統(tǒng)研究蘋果CONSTANS-Like(MdCOL)和MdNF-Y亞家族成員MdNF-YB在協(xié)同調(diào)控MdFT1轉(zhuǎn)錄過程中的作用機(jī)制。主要研究成果總結(jié)如下:1、MdCOL、MdNF-YB轉(zhuǎn)錄因子家族和MdFT1鑒定、表達(dá)分析。將MdCOL轉(zhuǎn)錄因子家族氨基酸序列與擬南芥AtCOL家族第一組成員(AtCO、AtCOL1至AtCOL5)及AtCOL9的氨基酸序列進(jìn)行同源性比對;同時(shí)將蘋果轉(zhuǎn)錄因子家族MdNF-YB與擬南芥AtNF-YB2和AtNF-YB3蛋白序列進(jìn)行同源性比對,綜合本實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫分析結(jié)果,篩選出7個(gè)MdCOL家族基因和1個(gè)MdNF-YB家族基因,進(jìn)行表達(dá)量分析。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q-PCR)測定MdCOL、MdNF-YB部分家族成員與MdFT1在不同組織中表達(dá)量。結(jié)果表明MdF...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:55 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 研究背景
1.2 花發(fā)育過程
1.2.1 成花誘導(dǎo)
1.2.2 花芽發(fā)端
1.2.3 花器官發(fā)育
1.3 FT與植物開花關(guān)系
1.4 CO和NF-Y調(diào)控FT分子機(jī)制
1.5 蘋果成花調(diào)控研究進(jìn)展
1.6 酵母單雜交及酵母雙雜交試驗(yàn)原理
1.7 選題的目的和意義
第二章 MdCOL、MdNF-YB基因家族和MdFT1鑒定、表達(dá)分析
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 序列分析
2.2.2 總RNA提取
2.2.3 消化基因組DNA及反轉(zhuǎn)錄
2.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 MdCOL、MdNF-YB家族分析
2.3.2 MdCOL、MdNF-YB部分基因家族成員與MdFT1在不同組織中表達(dá)分析
2.3.3 部分MdCOL、MdNF-YB家族成員結(jié)構(gòu)域分析
2.4 討論
第三章 MdCOL、MdNF-YB家族蛋白成員與MdFT1啟動(dòng)子結(jié)合能力分析
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 菌株及載體
3.1.3 試劑
3.1.4 引物合成及測序
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 構(gòu)建酵母單雜載體
3.2.2 酵母單雜交
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 MdCOL及MdNF-YB3載體構(gòu)建
3.3.2 MdFT1啟動(dòng)子載體構(gòu)建
3.3.3 MdCOL與MdNF-YB3蛋白結(jié)合MdFT1啟動(dòng)子能力
3.4 討論
第四章 MdCOL和MdNF-YB家族成員之間相互作用分析
4.1 試驗(yàn)材料
4.1.1 菌株及載體
4.1.2 試劑
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 構(gòu)建酵母雙雜載體
4.2.2 酵母雙雜交
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 自激活和毒性檢測
4.3.2 蛋白相互作用鑒定
4.4 討論
第五章 小結(jié)與展望
5.1 小結(jié)
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄 1
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]The CONSTANS-like 4 transcription factor,AtCOL4,positively regulates abiotic stress tolerance through an abscisic acid-dependent manner in Arabidopsis[J]. Ji-Hee Min,Jung-Sung Chung,Kyeong-Hwan Lee,Cheol Soo Kim. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(03)
[2]PBO對蘋果幼樹生長、葉片品質(zhì)及成花的影響[J]. 邢利博,張慶偉,韓明玉,趙彩平,陳錫龍,侯玉玨,劉航空. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(05)
[3]赤霉素對凱特芒果開花特性調(diào)控研究[J]. 李貴利,潘宏兵,杜邦,劉斌,周文靜. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(14)
[4]CO基因的調(diào)控表達(dá)與植物光周期反應(yīng)[J]. 吳連成,常麗麗,陳曉,庫麗霞. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(02)
[5]拉枝角度對富士蘋果樹生理特性和果實(shí)品質(zhì)的影響[J]. 韓明玉,李永武,范崇輝,趙彩萍. 園藝學(xué)報(bào). 2008(09)
[6]植物開花轉(zhuǎn)換的分子生物學(xué)研究[J]. 陳曉,陳彥惠,任永哲. 分子植物育種. 2005(04)
[7]果樹花芽分化機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 曹尚銀,張秋明,吳順. 果樹學(xué)報(bào). 2003(05)
[8]GA3和PP333調(diào)控蘋果花芽孕育機(jī)理的研究[J]. 曹尚銀,湯一卒,江愛華. 園藝學(xué)報(bào). 2001(04)
[9]GA3對楊梅葉片木質(zhì)素水平及其相關(guān)酶活性和成花的影響[J]. 李興軍,李三玉,呂均良,汪國云. 園藝學(xué)報(bào). 2001(02)
[10]蘋果梨花芽形態(tài)分化觀察[J]. 李秉真,李雄,王維霞,鄔全紅. 北方園藝. 1999(01)
碩士論文
[1]噴施6-BA和IAA對富士幼樹花芽孕育期間激素與相關(guān)基因表達(dá)的影響[D]. 李有梅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[2]蘋果Flowering locus T (FT)基因及其啟動(dòng)子的克隆及表達(dá)分析[D]. 鄭小一.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
本文編號(hào):3396565
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:55 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 研究背景
1.2 花發(fā)育過程
1.2.1 成花誘導(dǎo)
1.2.2 花芽發(fā)端
1.2.3 花器官發(fā)育
1.3 FT與植物開花關(guān)系
1.4 CO和NF-Y調(diào)控FT分子機(jī)制
1.5 蘋果成花調(diào)控研究進(jìn)展
1.6 酵母單雜交及酵母雙雜交試驗(yàn)原理
1.7 選題的目的和意義
第二章 MdCOL、MdNF-YB基因家族和MdFT1鑒定、表達(dá)分析
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 序列分析
2.2.2 總RNA提取
2.2.3 消化基因組DNA及反轉(zhuǎn)錄
2.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 MdCOL、MdNF-YB家族分析
2.3.2 MdCOL、MdNF-YB部分基因家族成員與MdFT1在不同組織中表達(dá)分析
2.3.3 部分MdCOL、MdNF-YB家族成員結(jié)構(gòu)域分析
2.4 討論
第三章 MdCOL、MdNF-YB家族蛋白成員與MdFT1啟動(dòng)子結(jié)合能力分析
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 菌株及載體
3.1.3 試劑
3.1.4 引物合成及測序
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 構(gòu)建酵母單雜載體
3.2.2 酵母單雜交
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 MdCOL及MdNF-YB3載體構(gòu)建
3.3.2 MdFT1啟動(dòng)子載體構(gòu)建
3.3.3 MdCOL與MdNF-YB3蛋白結(jié)合MdFT1啟動(dòng)子能力
3.4 討論
第四章 MdCOL和MdNF-YB家族成員之間相互作用分析
4.1 試驗(yàn)材料
4.1.1 菌株及載體
4.1.2 試劑
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 構(gòu)建酵母雙雜載體
4.2.2 酵母雙雜交
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 自激活和毒性檢測
4.3.2 蛋白相互作用鑒定
4.4 討論
第五章 小結(jié)與展望
5.1 小結(jié)
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄 1
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]The CONSTANS-like 4 transcription factor,AtCOL4,positively regulates abiotic stress tolerance through an abscisic acid-dependent manner in Arabidopsis[J]. Ji-Hee Min,Jung-Sung Chung,Kyeong-Hwan Lee,Cheol Soo Kim. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(03)
[2]PBO對蘋果幼樹生長、葉片品質(zhì)及成花的影響[J]. 邢利博,張慶偉,韓明玉,趙彩平,陳錫龍,侯玉玨,劉航空. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(05)
[3]赤霉素對凱特芒果開花特性調(diào)控研究[J]. 李貴利,潘宏兵,杜邦,劉斌,周文靜. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(14)
[4]CO基因的調(diào)控表達(dá)與植物光周期反應(yīng)[J]. 吳連成,常麗麗,陳曉,庫麗霞. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(02)
[5]拉枝角度對富士蘋果樹生理特性和果實(shí)品質(zhì)的影響[J]. 韓明玉,李永武,范崇輝,趙彩萍. 園藝學(xué)報(bào). 2008(09)
[6]植物開花轉(zhuǎn)換的分子生物學(xué)研究[J]. 陳曉,陳彥惠,任永哲. 分子植物育種. 2005(04)
[7]果樹花芽分化機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 曹尚銀,張秋明,吳順. 果樹學(xué)報(bào). 2003(05)
[8]GA3和PP333調(diào)控蘋果花芽孕育機(jī)理的研究[J]. 曹尚銀,湯一卒,江愛華. 園藝學(xué)報(bào). 2001(04)
[9]GA3對楊梅葉片木質(zhì)素水平及其相關(guān)酶活性和成花的影響[J]. 李興軍,李三玉,呂均良,汪國云. 園藝學(xué)報(bào). 2001(02)
[10]蘋果梨花芽形態(tài)分化觀察[J]. 李秉真,李雄,王維霞,鄔全紅. 北方園藝. 1999(01)
碩士論文
[1]噴施6-BA和IAA對富士幼樹花芽孕育期間激素與相關(guān)基因表達(dá)的影響[D]. 李有梅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[2]蘋果Flowering locus T (FT)基因及其啟動(dòng)子的克隆及表達(dá)分析[D]. 鄭小一.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
本文編號(hào):3396565
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