藍(lán)莓（Vaccinium spp.）對(duì)土質(zhì)的要求極為嚴(yán)格,其鐵營(yíng)養(yǎng)具有明顯的低效性。為改善這一現(xiàn)象,生產(chǎn)上常采用降低土壤的pH以增加土壤中有效Fe的濃度。但與此同時(shí),酸性土壤使根際重金屬活化,易引發(fā)毒害作用。目前藍(lán)莓中金屬離子的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)等相關(guān)機(jī)理尚不明確。ZIP轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白能夠轉(zhuǎn)運(yùn)鋅、Fe、錳、銅、鎘、鎳、砷、鈷等金屬元素,其在植物根系吸收金屬元素、長(zhǎng)距離運(yùn)輸及地上部穩(wěn)態(tài)維持等發(fā)揮重要功能,但對(duì)于藍(lán)莓中ZIP轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究甚少。本研究基于對(duì)藍(lán)莓轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)分析,在克隆得到藍(lán)莓ZIP轉(zhuǎn)運(yùn)子家族基因cDNA全長(zhǎng)基礎(chǔ)上,對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析,利用酵母功能互補(bǔ)與異源表達(dá)實(shí)驗(yàn)和擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),對(duì)藍(lán)莓ZIP轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的功能進(jìn)行鑒定。并通過(guò)水培試驗(yàn)分析藍(lán)莓在不同金屬元素處理?xiàng)l件下的生理響應(yīng),以期揭示藍(lán)莓ZIP轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的生物學(xué)功能,并進(jìn)一步闡明藍(lán)莓中金屬元素的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制,有利于改善藍(lán)莓的礦質(zhì)元素吸收低效性和緩解重金屬污染對(duì)藍(lán)莓的脅迫作用。具體研究結(jié)果如下:克隆得到了6個(gè)藍(lán)莓ZIP家族基因,將其命名為VcZIP1、VcZIP2、VcZIP6、VcZIP7、VcZIP8、VcZIP11,其序列長(zhǎng)度為... 

【文章來(lái)源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白參與金屬吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)、區(qū)隔示意圖

A 經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳得到 3 條清晰的條 rRNA 和小亞基 18S rRNA。各條帶均無(wú)的質(zhì)量較好。此外，RNA 的濃度在 1500 n260/OD230大于 2.0，表明該 RNA 無(wú)蛋白R(shí)NA 的純度較高，質(zhì)量較好可以用于后續(xù)莓內(nèi)參基因 GAPDH 引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增該 RNA 可作為擴(kuò)增藍(lán)莓 ZIP 家族基因的

VcZIP6（Kpn I）GGGGTACCCCATGCCGGTGTGCGCGACCGATAC（Xba I）GCTCTAGAGCTCAGGCCCAAAGGGCAAGGATAGACVcZIP7（BamH I）CGCGGATCCATGGATTCGATGGTGGTGAAGAG（Sal I）GCCGACGTCGACTCACCAGTTGAAACTAAGGGACTCAVcZIP8（Kpn I）GGGGTACCCCCGAATGGGCTCGTTAC（Xba I）GCTCTAGAGCTTAAGCCCATTTAGCTATGAGAGVcZIP11（BamH I）CGCGGATCCGCGTCTCCTTTACCTCTCCCTCC（Xba I）GCTCTAGAGCTTAAGTGTCCCAAATCATC以藍(lán)莓葉片和根部混合 cDNA 為模板，高保真酶選擇 PrimerSTAR Max DNAPolymerase，最終擴(kuò)增得到 VcZIP1、VcZIP2、VcZIP6、VcZIP7、VcZIP8、VcZIP11，其序列長(zhǎng)度分別為 1183 bp、1039 bp、1039 bp、1111 bp、1137 bp、765 bp。6 個(gè)基因電泳圖如圖 2.2 所示。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3392016