番茄中一個(gè)抗病基因的遺傳轉(zhuǎn)化及抗病性的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-07 14:32
番茄抗病基因中含有卷曲螺旋結(jié)構(gòu)(coiled-coil,CC)、核苷酸結(jié)合位點(diǎn)(Nucleotide binding site, NBS)和富含亮氨酸的重復(fù)序列(Leucine-rich repeat, LRR)結(jié)構(gòu)域是植物中最大類抗病家族之一,其中多數(shù)的R基因都具有核苷酸結(jié)合位點(diǎn)(NBS)和富含亮氨酸的重復(fù)序列(LRR)結(jié)構(gòu)域。CC-NBS-LRR結(jié)構(gòu)是R基因重要的結(jié)構(gòu),對(duì)植物的抗病起到很重要的作用。青枯病、早疫病、晚疫病、枯萎病、葉霉病等病害為番茄生產(chǎn)帶來了毀滅性的的影響,同時(shí)外界不良的環(huán)境以及各種病原菌通常會(huì)給植物生長(zhǎng)發(fā)育造成一定侵害,植物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中已經(jīng)形成了完善的自我保護(hù)機(jī)制以抵御病原菌入侵以及外界不良環(huán)境的傷害。研究表明植物抗病R基因能夠識(shí)別病原體引發(fā)過敏性反應(yīng)(Hypersensitive response, HR),從而提高植物病害的防御能力。本研究中通過酵母雙雜篩選獲得了DDB1IP9基因,與番茄中重要DDB1基因蛋白具有相互作用,并通過Sol Genomics Network和NCBI (National Center for Biotechnology In...
【文章來源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
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【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]番茄NBS-LRR抗病基因家族全基因組分析[J]. 劉云飛,萬紅建,韋艷萍,李志邈,葉青靜,王榮青,阮美穎,姚祝平,周國(guó)治,楊悅儉. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2014(05)
[2]植物細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)的建立及研究進(jìn)展[J]. 周丹丹,俞嘉寧. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2013(24)
[3]轉(zhuǎn)基因番茄的研究現(xiàn)狀及其產(chǎn)業(yè)化[J]. 王傲雪,陳秀玲. 遺傳. 2011(09)
[4]A Pid3 allele from rice cultivar Gumei2 confers resistance to Magnaporthe oryzae[J]. Jie Chen~a,Yongfeng Shi~a,Wenzheng Liu~a,Rongyao Chai~b,Yaping Fu~a, Jieyun Zhuang~a,Jianli Wu~(a,*) a State Key Laboratory of Rice Biology,China National Rice Research Institute,Hangzhou 310006,China b Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou 310028,China. 遺傳學(xué)報(bào). 2011(05)
[5]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草瞬時(shí)表達(dá)試驗(yàn)條件優(yōu)化[J]. 吳英杰,姜波,張巖,李彥邦,賀琳,王玉成. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(09)
[6]農(nóng)桿菌介導(dǎo)水稻轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理與應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 張紅霞,鄧啟云,吳俊. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(11)
[7]利用煙草瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)檢測(cè)高等植物基因的剪接加工[J]. 高少培,牛向麗,羅笛,常麗娟,喻旭,李欲翔,劉永勝. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2010(06)
[8]植物組織培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 盛玉婷. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2008(09)
[9]小麥愈傷組織誘導(dǎo)及其植株再生研究進(jìn)展[J]. 王廷璞,陳荃,崔愛明,劉瑞媛,馬偉超. 天水師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(02)
[10]植物瞬間表達(dá)系統(tǒng)與功能基因組學(xué)研究[J]. 王華忠,陳雅平,陳佩度. 生物工程學(xué)報(bào). 2007(03)
本文編號(hào):3389718
【文章來源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖3.?lD£)W/f9基因PC民擴(kuò)增圖??Fig.3.1?Amplification?of?DDB1IP9?by?PCR??
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?的0公公/貨9片段,證明公公公7/巧基因已經(jīng)連接到中間載體pEASY-Blunt上,如??圖3.3所示。其中一個(gè)質(zhì)粒酶切結(jié)果出現(xiàn)H條帶,分析由于是平端酶切位點(diǎn),??酶切速率較慢,有部分質(zhì)粒未被酶切造成的,因此酶切過程中可盡量加長(zhǎng)酶切??時(shí)間。???M?1?2??3??sooobp—*??.?>?皂?|??圖3.?3?pEASY-Bkmt-DDBlIP9陽性質(zhì)粒酶切鑒定圖??Fig.?3.?3?Digestion?of?Plasmid?of?pEASY-B?山?nt-DDBlIP9?by?enzymes??M:?Trans2KDNAMarker;?1-3:?pEASY-B山nt-DDBlIP9?質(zhì)粒雙酶切結(jié)果,其中?1,3?號(hào)鑒定正??確,2號(hào)未能酶切完無法確定。??將菌落PC艮鑒定正確且pEASY-Blimt-DDBlIP9質(zhì)粒酶切基因大小正確的大腸??桿菌菌液送到測(cè)序公司測(cè)序,測(cè)序結(jié)果比對(duì)正確。保存菌液,用15%的滅菌好的??甘油保存于-80度冰箱中,W便于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。并將測(cè)序正確目的基因質(zhì)粒酶切,膠??回收目的基因0公公7/尸乂切膠結(jié)果如圖3.4所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,DD如彷9片段??25Ubp,與被切除的位置一致,雙泳道回收,是為了獲取更多目的基因酶切產(chǎn)物。??M?0?1?1??3〇〇〇bp—??2000bp_??圖3.?4?pEASY-BIunt-DDBlIP9質(zhì)粒中O公公;/P9回收?qǐng)D??Fig.3.4?Recycle?DDB1IP9?from?Plasmid?of?pEASY-Blunt-DDBlIP9??M:打犯s2KDNAMarker;?0空白泳道
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]番茄NBS-LRR抗病基因家族全基因組分析[J]. 劉云飛,萬紅建,韋艷萍,李志邈,葉青靜,王榮青,阮美穎,姚祝平,周國(guó)治,楊悅儉. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2014(05)
[2]植物細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)的建立及研究進(jìn)展[J]. 周丹丹,俞嘉寧. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2013(24)
[3]轉(zhuǎn)基因番茄的研究現(xiàn)狀及其產(chǎn)業(yè)化[J]. 王傲雪,陳秀玲. 遺傳. 2011(09)
[4]A Pid3 allele from rice cultivar Gumei2 confers resistance to Magnaporthe oryzae[J]. Jie Chen~a,Yongfeng Shi~a,Wenzheng Liu~a,Rongyao Chai~b,Yaping Fu~a, Jieyun Zhuang~a,Jianli Wu~(a,*) a State Key Laboratory of Rice Biology,China National Rice Research Institute,Hangzhou 310006,China b Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou 310028,China. 遺傳學(xué)報(bào). 2011(05)
[5]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草瞬時(shí)表達(dá)試驗(yàn)條件優(yōu)化[J]. 吳英杰,姜波,張巖,李彥邦,賀琳,王玉成. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(09)
[6]農(nóng)桿菌介導(dǎo)水稻轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理與應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 張紅霞,鄧啟云,吳俊. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(11)
[7]利用煙草瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)檢測(cè)高等植物基因的剪接加工[J]. 高少培,牛向麗,羅笛,常麗娟,喻旭,李欲翔,劉永勝. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2010(06)
[8]植物組織培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 盛玉婷. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2008(09)
[9]小麥愈傷組織誘導(dǎo)及其植株再生研究進(jìn)展[J]. 王廷璞,陳荃,崔愛明,劉瑞媛,馬偉超. 天水師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(02)
[10]植物瞬間表達(dá)系統(tǒng)與功能基因組學(xué)研究[J]. 王華忠,陳雅平,陳佩度. 生物工程學(xué)報(bào). 2007(03)
本文編號(hào):3389718
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