植物花色方面的研究一直是人們研究的熱點,對植物新品種的培育具有重要作用。在高等植物中,R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子是植物花色苷生物合成途徑的重要轉(zhuǎn)錄因子,也是研究最廣泛的轉(zhuǎn)錄因子,通過調(diào)控花色苷生物合成途徑的單基因或多基因的表達(dá)進(jìn)一步調(diào)控花色苷物質(zhì)的合成,從而使花色呈現(xiàn)不同顏色。繡球花（Hydrangea macrophyla）因花大、花色艷麗等特點,深受人們喜愛,已成為世界上極具發(fā)展?jié)摿Φ幕ɑ芷贩N之一。目前,對繡球花花色形成的分子機制研究較少,本研究通過對繡球花花色相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行克隆和功能研究,對闡明繡球花花色形成的分子機制和繡球花花色改良具有重要影響。本研究主要研究結(jié)果如下:（1）根據(jù)繡球花不孕花轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中HymMYB2基因的Unigene設(shè)計引物,以藍(lán)色繡球花品種‘無盡夏’盛花期不孕花的cDNA和DNA為模板,成功獲得了HymMYB2基因的全長序列,該基因不含內(nèi)含子,開放讀碼框為939bp,能編碼312個氨基酸。生物信息學(xué)分析表明,HymMYB2轉(zhuǎn)錄因子含有R2、R3結(jié)構(gòu)域,屬于典型的R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子。HymMYB2蛋白的氨基酸序列與獼猴桃的MYB2序列的同源性最高。（... 

【文章來源】：中南林業(yè)科技大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１技術(shù)路線??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏａｄｍａｐ??

碩士畢業(yè)論文?繡球花花色相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的克隆及功能研究??（〇Ｄ２６０ｎｍ／ＯＤ２８（ｍｍ）在?１．８－１．９?之間，，總?ＲＮＡ?的比值（ＯＤ２６〇ｎｍ／〇Ｄ２８０ｎｍ）在?１．９－２．０??之間，說明提取的基因組總ＤＮＡ和總ＲＮＡ的純度較高，可用于后續(xù)試驗。??２８ｓ?ｒＲＮＡ?Ｗ??１８ｓ?ｒＲＮＡ??ＳｓｒＲＮＡ??ａ）?ｂ）??圖２．１繡球花不孕花總ＤＮＡ和總ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．１?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ａｎｄ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?狀“歷ｃ，叫Ａ少＂ａ?ｋ?ｓｔｅｒｉｌｅ?ｆｌｏｗｅｒ??注：ａ為基因組總ＤＮＡ電泳圖；ｂ為總ＲＮＡ電泳圖；Ｍ為５０００ｂｐ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??Ｎｏｔｅ：?ａ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?ｂ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?Ｍ?ｉｓ?５０００ｂｐ??ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??２．３．２?ＨｙｍＭＹＢ２?ＳＩＵ＾ＰＩ??根據(jù)繡球花盛花期不孕花轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中的Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６序列信息設(shè)計??的引物，分別以繡球花品種‘無盡夏’盛花期不孕花的基因組總ＤＮＡ和ｃＤＮＡ為模??板進(jìn)行ＰＣＲ擴增，擴增結(jié)果如圖２．１所示，以基因組總ＤＮＡ和ｃＤＮＡ為模板均得到??了?ｌＯＯＯｂｐ大小的條帶，并且擴增條帶單一。測序結(jié)果共得到９３９個堿基，與繡球花??盛花期不孕花轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６的序列信息一致，基因組總ＤＮＡ??和ｃＤＮＡ為模板得到的條帶序列一致，表明該基因在繡球花基因組序列中無內(nèi)

碩士畢業(yè)論文?繡球花花色相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的克隆及功能研究??（〇Ｄ２６０ｎｍ／ＯＤ２８（ｍｍ）在?１．８－１．９?之間，，總?ＲＮＡ?的比值（ＯＤ２６〇ｎｍ／〇Ｄ２８０ｎｍ）在?１．９－２．０??之間，說明提取的基因組總ＤＮＡ和總ＲＮＡ的純度較高，可用于后續(xù)試驗。??２８ｓ?ｒＲＮＡ?Ｗ??１８ｓ?ｒＲＮＡ??ＳｓｒＲＮＡ??ａ）?ｂ）??圖２．１繡球花不孕花總ＤＮＡ和總ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．１?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ａｎｄ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?狀“歷ｃ，叫Ａ少＂ａ?ｋ?ｓｔｅｒｉｌｅ?ｆｌｏｗｅｒ??注：ａ為基因組總ＤＮＡ電泳圖；ｂ為總ＲＮＡ電泳圖；Ｍ為５０００ｂｐ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??Ｎｏｔｅ：?ａ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?ｂ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?Ｍ?ｉｓ?５０００ｂｐ??ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??２．３．２?ＨｙｍＭＹＢ２?ＳＩＵ＾ＰＩ??根據(jù)繡球花盛花期不孕花轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中的Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６序列信息設(shè)計??的引物，分別以繡球花品種‘無盡夏’盛花期不孕花的基因組總ＤＮＡ和ｃＤＮＡ為模??板進(jìn)行ＰＣＲ擴增，擴增結(jié)果如圖２．１所示，以基因組總ＤＮＡ和ｃＤＮＡ為模板均得到??了?ｌＯＯＯｂｐ大小的條帶，并且擴增條帶單一。測序結(jié)果共得到９３９個堿基，與繡球花??盛花期不孕花轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６的序列信息一致，基因組總ＤＮＡ??和ｃＤＮＡ為模板得到的條帶序列一致，表明該基因在繡球花基因組序列中無內(nèi)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MYB轉(zhuǎn)錄因子在植物非生物脅迫中的研究進(jìn)展[J]. 關(guān)淑艷,焦鵬,蔣振忠,齊拙,夏海豐,曲靜,馬義勇.  吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2019(03)
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[3]Al3+對不同八仙花品種萼片顏色的影響初探[J]. 刁春武,胡波,韓勇,張艷雙,高豐,魏猷剛.  上海蔬菜. 2017(04)
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[9]葡萄風(fēng)信子轉(zhuǎn)錄因子MaMYB2的克隆及表達(dá)模式分析[J]. 李志根,劉雅莉,楊慧萍,劉妮妮.  西北林學(xué)院學(xué)報. 2015(02)
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博士論文
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碩士論文
[1]珙桐苞片優(yōu)勢表達(dá)基因DiASR1的功能分析[D]. 高潤昕.中南林業(yè)科技大學(xué) 2019
[2]6種繡球花新引進(jìn)品種的快繁技術(shù)研究[D]. 郭超.中南林業(yè)科技大學(xué) 2015
[3]多花水仙類黃酮生物合成相關(guān)酶基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 蔡雪玲.福建農(nóng)林大學(xué) 2012



本文編號：3360333