·津田’蕪菁色素合成受UV-A光誘導,受UV-B/藍光復合光的協(xié)同效應。因此我們認為UV-A信號轉導的光受體不同于擬南芥中發(fā)現(xiàn)的藍光/UV-A光受體（隱花色素）,是一種新的受UV-A特異誘導的光受體。對‘津田’蕪菁白色直根表皮及其在UV-A光照處理后的差異蛋白組學分析表明,UV-A光照處理后膜聯(lián)蛋白家族BrANNEXIN蛋白表達增加。因此本研究以‘津田’蕪菁（Brassica rapa L.’Tsuda’）為試材克隆了‘津田’蕪菁BrANNEXIN家族基因,對該基因的表達特性和功能進行了初步研究對于闡明這一新的受UV-A特異誘導的光受體及其調控花青素合成信號轉導途徑將有重要的意義。本研究的主要結果如下:1.‘津田’蕪菁BrANNEXIN家族基因克隆從‘津田’蕪菁中克隆到了 4個膜聯(lián)蛋白家族基因,分別命名為BrANNEXIN1,2,3,4,開放閱讀框長度分別為 954bp、951 bp、960 bp、948 bp,3’UTR 長度分別為 171 bp,74 bp,130 bp,151 bp。Southern 雜交檢測顯示BrANNEXIN1,3在‘津田’蕪菁基因組中均至少有2個拷貝,而B... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?ＤＮＡ從瓊脂糖凝膠轉移至尼龍膜示意圖??（７）紫外膠聯(lián)：２０?ｈ轉膜后，尼龍膜轉有ＤＮＡ片段的一面用鉛筆做標記，雜交箱調到??

?東北林、丨卩人９碩上９位論文???；ｎ癱；．，■?ｖ－??：：ｕ??圖２－２津田蕪菁總ＲＮＡ電泳圖??通過ＮａｎｏＤｒｏｐ２０００分光光度計檢測總ＲＮＡ吸光和濃度，結果顯不總ＲＮＡ在２６０??ｎｍ紫外光下有吸收峰，濃度適中，可以用于下一部反轉錄試驗。??２．７．１．２?‘津田’蕪菁家族基因開放閱讀框的克隆??用Ｐｒｉｍｅｒ?Ｐｒｉｍｉｅｒ?６．０設計膜聯(lián)蛋白家族基因克隆所需同源引物，以‘津田’蕪菁肉??質根幻’：色表皮總ＲＮＡ為模板，進行反轉錄反應，然后以同源引物進行開放閱讀框??ＰＣＲ，獲得了與預期目的片段大小相似長約１０００?ｂｐ的片段，將目的條帶在短波長紫外??燈下切膠回收，與ｐＥａｓｙ－Ｔ載體連接，連接產(chǎn)物轉入ＴｏｐｌＯ大腸桿菌（Ｅ．ｃｏ／／）感受態(tài)??細胞，經(jīng)ｘ－ｇａｌ／ＩＰＴＧ藍白斑篩選獲得克隆，陽性克隆通過菌液ＰＣＲ反應和１?％瓊脂糖??凝膠電泳鑒定。陽性克隆菌液送博仕公司測序，電泳圖如圖２－３所示：??Ｍ?Ａ１??Ｋｙ??＇－＿攀??圖２－３?Ｓ；ｖｉＡＷ￡Ａ７／／／基因電泳檢測結果??測序結果顯示獲得包括‘津田’蕪菁５ＭＡＷ￡Ａ７Ａ＾／基因起始密碼子和終止密碼子的??幵放閱讀框，長度為９５４?ｂｐ，開放閱讀框氨基酸比對如圖２－４所示，ＮＣＢＩ數(shù)據(jù)庫中??－１６－??Ｉ??

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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3349165