·津田’蕪菁色素合成受UV-A光誘導(dǎo),受UV-B/藍(lán)光復(fù)合光的協(xié)同效應(yīng)。因此我們認(rèn)為UV-A信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的光受體不同于擬南芥中發(fā)現(xiàn)的藍(lán)光/UV-A光受體（隱花色素）,是一種新的受UV-A特異誘導(dǎo)的光受體。對‘津田’蕪菁白色直根表皮及其在UV-A光照處理后的差異蛋白組學(xué)分析表明,UV-A光照處理后膜聯(lián)蛋白家族BrANNEXIN蛋白表達(dá)增加。因此本研究以‘津田’蕪菁（Brassica rapa L.’Tsuda’）為試材克隆了‘津田’蕪菁BrANNEXIN家族基因,對該基因的表達(dá)特性和功能進(jìn)行了初步研究對于闡明這一新的受UV-A特異誘導(dǎo)的光受體及其調(diào)控花青素合成信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑將有重要的意義。本研究的主要結(jié)果如下:1.‘津田’蕪菁BrANNEXIN家族基因克隆從‘津田’蕪菁中克隆到了 4個膜聯(lián)蛋白家族基因,分別命名為BrANNEXIN1,2,3,4,開放閱讀框長度分別為 954bp、951 bp、960 bp、948 bp,3’UTR 長度分別為 171 bp,74 bp,130 bp,151 bp。Southern 雜交檢測顯示BrANNEXIN1,3在‘津田’蕪菁基因組中均至少有2個拷貝,而B... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?ＤＮＡ從瓊脂糖凝膠轉(zhuǎn)移至尼龍膜示意圖??（７）紫外膠聯(lián)：２０?ｈ轉(zhuǎn)膜后，尼龍膜轉(zhuǎn)有ＤＮＡ片段的一面用鉛筆做標(biāo)記，雜交箱調(diào)到??

?東北林、丨卩人９碩上９位論文???；ｎ癱；．，■?ｖ－??：：ｕ??圖２－２津田蕪菁總ＲＮＡ電泳圖??通過ＮａｎｏＤｒｏｐ２０００分光光度計檢測總ＲＮＡ吸光和濃度，結(jié)果顯不總ＲＮＡ在２６０??ｎｍ紫外光下有吸收峰，濃度適中，可以用于下一部反轉(zhuǎn)錄試驗。??２．７．１．２?‘津田’蕪菁家族基因開放閱讀框的克隆??用Ｐｒｉｍｅｒ?Ｐｒｉｍｉｅｒ?６．０設(shè)計膜聯(lián)蛋白家族基因克隆所需同源引物，以‘津田’蕪菁肉??質(zhì)根幻’：色表皮總ＲＮＡ為模板，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，然后以同源引物進(jìn)行開放閱讀框??ＰＣＲ，獲得了與預(yù)期目的片段大小相似長約１０００?ｂｐ的片段，將目的條帶在短波長紫外??燈下切膠回收，與ｐＥａｓｙ－Ｔ載體連接，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)入ＴｏｐｌＯ大腸桿菌（Ｅ．ｃｏ／／）感受態(tài)??細(xì)胞，經(jīng)ｘ－ｇａｌ／ＩＰＴＧ藍(lán)白斑篩選獲得克隆，陽性克隆通過菌液ＰＣＲ反應(yīng)和１?％瓊脂糖??凝膠電泳鑒定。陽性克隆菌液送博仕公司測序，電泳圖如圖２－３所示：??Ｍ?Ａ１??Ｋｙ??＇－＿攀??圖２－３?Ｓ；ｖｉＡＷ￡Ａ７／／／基因電泳檢測結(jié)果??測序結(jié)果顯示獲得包括‘津田’蕪菁５ＭＡＷ￡Ａ７Ａ＾／基因起始密碼子和終止密碼子的??幵放閱讀框，長度為９５４?ｂｐ，開放閱讀框氨基酸比對如圖２－４所示，ＮＣＢＩ數(shù)據(jù)庫中??－１６－??Ｉ??

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3349165