菜心（Brassica rapa syn. campestris L. ssp. Chinensis var. utiLis Tsen et Lee）又名菜薹,是我國華南地區(qū)栽培規(guī)模最大的特產(chǎn)蔬菜,本研究以菜心早熟品種早熟品種“油青四九”和晚熟品種“油青甜菜心80天”為材料,克隆了菜心自主通路基因BrcuHAC1和BrcuPRMT5并且利用病毒誘導的基因沉默（VIGS）技術(shù)分析了這兩個基因?qū)Σ诵某檗烽_花時間的影響實驗方法和結(jié)果如下：1、以擬南芥AtHAC1和AtPRMT5基因的保守區(qū)域序列為模版設計引物,使用RACE技術(shù)獲得菜心BrcuHACl和BrcuPRMT5基因全長。分別分析了兩個基因的全長、內(nèi)含子和外顯子的多態(tài)性、同源性的比較以及蛋白質(zhì)功能結(jié)構(gòu)的分析。2、用熒光定量PCR對基因BrcuHAC1和BrcuPRMT5在菜心早熟和晚熟品種中的時間表達、空間表達進行分析。早熟和晚熟品種中的BrcuHAC1和BrcuPRMT5基因隨著真葉片數(shù)量的增多表達量增強,早熟和晚熟品種中BrcuHACl和BrcuPRMT5基因的表達量在花器官中最強,莖和葉中次之,根中檢測不到兩個基因的表達量。3、... 

【文章來源】：江西農(nóng)業(yè)大學江西省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
略縮詞
1. 文獻綜述
    1.1 菜心概況
    1.2 VIGS的研究進展
        1.2.1 VIGS機制
        1.2.2 VIGS載體的發(fā)展
        1.2.3 可遺傳的VIGS
    1.3 十字花科植物抽薹開花分子機理研究
        1.3.1 開花抑制因子FLowering Locus C(FLC)
        1.3.2 開花抑制因子FLowering Locus C(FLC)的表觀遺傳調(diào)控研究
    1.4 研究的目的意義
2 菜心組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶BrcuHAC1克隆、表達和功能分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 分析軟件
        2.1.3 菜心的總RNA提取
        2.1.4 第一鏈cDNA合成
        2.1.5 BrcuHAC1目的片段的獲得及重組子鑒定
        2.1.6 采用RACE技術(shù)擴增BrcuHAC1全長
        2.1.7 BrcuHAC1的時空表達
        2.1.8 菜心VIGS體系構(gòu)建
        2.1.9 VIGS體系中BrcuHAC1基因的檢測
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 總RNA的提取
        2.2.2 BrcuHAC1目的片段的獲得
        2.2.3 目的基因的RACE擴增和全長獲得
        2.2.4 BrcuHAC1基因序列及同源性分析
        2.2.5 BrcuHAC1基因內(nèi)含子與外顯子特征分析
        2.2.6 菜心組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶BrcuHAC1結(jié)構(gòu)域的分析
        2.2.7 BrcuHAC1時空表達分析
        2.2.8 qRT-PCR檢測菜心BrcuHAC1基因沉默效果
        2.2.9 BrcuHAC1沉默對菜心抽薹開花的影響
    2.3 討論
3 菜心組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶BrcuPRMT5克隆、表達和功能分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 分析軟件
        3.1.3 菜心總RNA提取
        3.1.4 第一鏈cDNA合成
        3.1.5 BrcuPRMT5目的片段的獲得及重組子鑒定
        3.1.6 采用RACE技術(shù)擴增BrcuPRMT5全長
        3.1.7 BrcuPRMT5的時空表達
        3.1.8 菜心VIGS體系構(gòu)建
        3.1.9 VIGS體系中BrcuPRMT5基因的檢測
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 菜心BrcuPRMT5基因的克隆及序列分析
        3.2.2 BrcuPRMT5基因的同源性比較及進化樹分析
        3.2.3 BrcuPRMT5基因內(nèi)含子與外顯子特征分析
        3.2.4 菜心組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶BrcuPRMT5結(jié)構(gòu)域的分析
        3.2.5 BrcuPRMT5時空表達
        3.2.6 BrcuPRMT5沉默對菜心抽薹開花的影響
        3.2.7 轉(zhuǎn)基因植株中BrcuPRMT5與BrcuFLC基因表達量分析
        3.2.8 轉(zhuǎn)基因品種的性狀觀察與功能分析
    3.3 討論
4、總結(jié)與展望
參考文獻
附錄一
附錄二
致謝



本文編號：3335127