本文以青海大學(xué)高原花卉研究中心提供的萬壽菊雄性不育兩用系為材料,利用RAPD、ISSR、SRAP三種分子標(biāo)記篩選與萬壽菊雄性不育基因相關(guān)的分子標(biāo)記,然后轉(zhuǎn)化成穩(wěn)定的SCAR標(biāo)記,將SCAR標(biāo)記用于兩用系苗期鑒定。主要研究結(jié)果如下:（1）以萬壽菊雄性不育兩用系2-2的不育單株DNA為試驗材料,結(jié)合單因素優(yōu)化和L16（45）正交設(shè)計,建立并優(yōu)化了萬壽菊雄性不育兩用系的RAPD-PCR擴增體系。用200條RAPD引物對兩用系2-2的可育和不育基因池進行了PCR擴增,沒有篩選出在可育和不育中具有差異性條帶的引物。（2）用20條ISSR引物對兩用系2-2的可育和不育基因池進行了PCR擴增,從中篩選出3條在可育和不育之間擴增出差異條帶的引物,即I1、I7、I15。（3）以萬壽菊雄性不育兩用系2-2的不育單株DNA為試驗材料,采用單因素和L16（45）正交設(shè)計對影響SRAP-PCR反應(yīng)體系的五個參數(shù)進行篩選,在此基礎(chǔ)上對退火溫度進行優(yōu)化,得到了最佳的SRAP-PCR反應(yīng)體系和擴增程序。利用209對SRAP引物組合對兩用系2-2可育和不育花器官DNA進行SRAP-PCR擴增,篩選出4對在兩用系可育和不... 

【文章來源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 萬壽菊研究現(xiàn)狀
        1.1.1 萬壽菊簡介
        1.1.2 育種研究
    1.2 植物雄性不育遺傳理論研究
        1.2.1 植物雄性不育遺傳類型
        1.2.2 植物雄性不育遺傳機理
        1.2.3 植物雄性不育的應(yīng)用
    1.3 分子標(biāo)記技術(shù)在園林植物育種研究上的應(yīng)用
        1.3.1 常見的分子標(biāo)記類型
        1.3.2 菊科植物分子標(biāo)記研究進展
        1.3.3 萬壽菊屬植物分子育種進展
    1.4 本研究的目的、意義和內(nèi)容
        1.4.1 本研究目的和意義
        1.4.2 本研究的內(nèi)容和技術(shù)路線
第2章 萬壽菊雄性不育兩用系RAPD分子標(biāo)記反應(yīng)體系建立及差異性標(biāo)記篩選
    2.1 本章引論
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試驗材料與試劑
        2.2.2 葉片總DNA提取與檢測
        2.2.3 構(gòu)建基因池
        2.2.4 萬壽菊雄性不育兩用系RAPD-PCR反應(yīng)體系建立與優(yōu)化
        2.2.5 與萬壽菊雄性育性相關(guān)的引物篩選
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 DNA濃度及質(zhì)量分析
        2.3.2 RAPD-PCR單因素試驗結(jié)果分析
        2.3.3 RAPD-PCR正交試驗結(jié)果分析
        2.3.4 退火溫度和循環(huán)數(shù)的優(yōu)化
        2.3.5 反應(yīng)體系驗證
        2.3.6 引物篩選結(jié)果
    2.4 小結(jié)與討論
第3章 萬壽菊雄性不育兩用系ISSR分子標(biāo)記的差異性標(biāo)記篩選
    3.1 本章引論
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試驗材料與試劑
        3.2.2 葉片總DNA提取與檢測
        3.2.3 構(gòu)建基因池
        3.2.4 與萬壽菊雄性育性相關(guān)的引物篩選
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 DNA濃度及質(zhì)量分析
        3.3.2 引物篩選結(jié)果
    3.4 小結(jié)與討論
第 4章 萬壽菊雄性不育兩用系SRAP分子標(biāo)記反應(yīng)體系建立及差異性標(biāo)記篩選
    4.1 本章引論
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試驗材料與試劑
        4.2.2 基因組DNA提取與檢測
        4.2.3 萬壽菊雄性不育兩用系SRAP-PCR反應(yīng)體系建立與優(yōu)化
        4.2.4 與萬壽菊雄性不育相關(guān)的引物篩選
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 DNA濃度及質(zhì)量分析
        4.3.2 SRAP-PCR單因素試驗結(jié)果分析
        4.3.3 SRAP-PCR正交試驗結(jié)果分析
        4.3.4 退火溫度的優(yōu)化
        4.3.5 反應(yīng)體系驗證
        4.3.6 引物篩選結(jié)果
    4.4 小結(jié)與討論
第5章 萬壽菊雄性不育兩用系SCAR分子標(biāo)記的建立
    5.1 本章引論
    5.2 材料與方法
        5.2.1 試驗材料與試劑
        5.2.2 目的片段的回收與檢測
        5.2.3 回收產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化和測序
        5.2.4 SCAR引物的設(shè)計及反應(yīng)體系
        5.2.5 SCAR標(biāo)記的檢測與驗證
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 目的片段的回收與檢測結(jié)果
        5.3.2 克隆片段的測序結(jié)果
        5.3.3 SCAR引物的設(shè)計
        5.3.4 SCAR標(biāo)記的檢測與驗證
    5.4 小結(jié)與討論
第6章 結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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[8]菊芋SSR-PCR反應(yīng)體系優(yōu)化及3個品種的分子鑒別[J]. 任鵬鴻,韓睿,馬勝超,李莉.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2013(06)
[9]基于ISSR標(biāo)記的大菊品種資源遺傳多樣性分析[J]. 雒新艷,王晨,戴思蘭,李寶琴,劉倩倩,朱珺,盧潔.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(11)
[10]萬壽菊雄性不育系ISSR-PCR體系建立與優(yōu)化[J]. 伍亞平,唐道城.  分子植物育種. 2013(02)

博士論文
[1]萬壽菊雄性不育性狀的遺傳分析及其育種應(yīng)用[D]. 何燕紅.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]萬壽菊雄性不育兩用系遺傳差異性分析[D]. 伍亞平.青海大學(xué) 2013
[2]萬壽菊雄性不育RAPD分子標(biāo)記的研究[D]. 沈一嵐.北京林業(yè)大學(xué) 2006



本文編號：3313865