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日本雪椿組織培養(yǎng)再生體系的建立

發(fā)布時間:2021-07-09 00:40
  為了解決日本雪椿引進困難,種子和種苗來源不足,難以滿足林業(yè)建設(shè)和構(gòu)建生態(tài)文明社會的需求,本實驗以雪椿葉片和莖段作為外植體,研究其再生植株體系,獲得改良的雪椿外植體最佳消毒方式及時間,有效減輕雪椿試驗材料褐變的方法,雪椿再生體系建立的培養(yǎng)條件,雪椿愈傷組織誘導(dǎo)、增殖及分化的最佳激素配比,莖段誘導(dǎo)芽及芽增殖的最佳激素配比,再生植株生根方式方法。主要研究結(jié)果如下:(1)雪椿外植體最佳消毒組合及時間選取生長健壯的雪椿植株,剪取雪椿兩年生枝條嫩梢的莖段用自來水清洗30 min,洗去浮塵,然后用洗潔精進一步清洗,再用自來水將洗潔精殘留沖洗干凈,然后置于無菌室超凈工作臺上,用無菌水清洗1 min,再用75%的乙醇浸泡20-30s,后用無菌水沖洗2次,放入0.1%Hg Cl2中,8 min,取出后用無菌水沖洗5遍,置于無菌濾紙上吸干水分,接種于附加不同植物生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基上做初代培養(yǎng)。(2)雪椿愈傷組織誘導(dǎo),增殖及分化的最佳激素配比MS+6-BA 2.0 mg?L-1+2,4-D 0.5 mg?L-1培養(yǎng)基是雪椿新生葉片愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基,MS+6-BA 15mg?L-1+IBA 0.5 ... 

【文章來源】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

日本雪椿組織培養(yǎng)再生體系的建立


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愈傷組織,葉片,外植體,愈傷組織生長


Table. 11 The effects of different concentrations of hormone treatment on callus growth condition處理 2,4-D 質(zhì)量濃度/ (mg L-1)外植體數(shù)/個愈傷組織數(shù)/個誘導(dǎo)率/%污染數(shù)/個污染率/%愈傷組織生長情況C-1 0.1 45 18 40 3 7 ++C-2 0.5 45 42 93 4 9 ++++C-3 1.0 45 23 51 5 11 ++D-1 0.1 45 15 33 5 11 +D-2 0.5 45 35 76 4 9 +++D-3 1.0 45 20 44 6 13 ++4.2.3 不同外植體對愈傷組織誘導(dǎo)影響的分析從圖 2、圖 3 可知,在相同的培養(yǎng)時間里,葉片形成的愈傷組織的時間短,葉片誘導(dǎo)形成的愈傷組織生長狀態(tài)也更好,愈傷的狀態(tài)呈淺綠色,質(zhì)地細(xì)密,且褐化數(shù)量較少,可以確定葉片為愈傷組織誘導(dǎo)率最佳的外植體。

愈傷組織,莖段,外植體,愈傷組織生長


Table. 11 The effects of different concentrations of hormone treatment on callus growth condition處理 2,4-D 質(zhì)量濃度/ (mg L-1)外植體數(shù)/個愈傷組織數(shù)/個誘導(dǎo)率/%污染數(shù)/個污染率/%愈傷組織生長情況C-1 0.1 45 18 40 3 7 ++C-2 0.5 45 42 93 4 9 ++++C-3 1.0 45 23 51 5 11 ++D-1 0.1 45 15 33 5 11 +D-2 0.5 45 35 76 4 9 +++D-3 1.0 45 20 44 6 13 ++4.2.3 不同外植體對愈傷組織誘導(dǎo)影響的分析從圖 2、圖 3 可知,在相同的培養(yǎng)時間里,葉片形成的愈傷組織的時間短,葉片誘導(dǎo)形成的愈傷組織生長狀態(tài)也更好,愈傷的狀態(tài)呈淺綠色,質(zhì)地細(xì)密,且褐化數(shù)量較少,可以確定葉片為愈傷組織誘導(dǎo)率最佳的外植體。


本文編號:3272658

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