番茄褪綠病毒的分子鑒定及熒光定量PCR檢測(cè)體系的建立與應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2021-07-04 13:20
番茄褪綠病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)作為危害番茄生產(chǎn)的重要病毒。研究快速、高效的識(shí)別及檢測(cè)該病毒的方法,有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)病毒并采取相應(yīng)預(yù)防措施,從而減少其造成的經(jīng)濟(jì)損失。本研究通過(guò)RT-PCR對(duì)天津市、河北省番茄產(chǎn)區(qū)的番茄及周邊寄主ToCV發(fā)生情況及ToCV與番茄黃化曲葉病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)復(fù)合侵染情況進(jìn)行檢測(cè)鑒定,并建立了ToCV SYBR Green I實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)方法,并對(duì)番茄不同品種、不同發(fā)病時(shí)期及不同發(fā)病部位的病毒含量進(jìn)行了初步定量。主要結(jié)果如下:(1)對(duì)天津市、河北省的番茄產(chǎn)區(qū)采集的319份番茄樣品和55份雜草樣品進(jìn)行ToCV檢測(cè)。其中番茄樣品ToCV檢出率為16.0%,雜草上未檢測(cè)到該病毒。獲得的分離物序列(GenBank登錄號(hào)KP219722/KP226698、KP217199/KP217201、KP217196/KP217197、KP217195/KP217202、KP217200/KP217198)與中國(guó)、日本和美國(guó)的分離物都聚類在同一個(gè)組上。(2)對(duì)感染ToCV...
【文章來(lái)源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
ToCV病毒粒子的電子顯微鏡照片(Orílioetal.,2014)
山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 et al., 2014; kil et al., 2015)等眾多國(guó)家和地區(qū)均有 ToCV 的分在臺(tái)灣地區(qū)報(bào)道該病毒病的發(fā)生(Tsai et al., 2004),隨后在北京北省、天津市、河南省等地區(qū)的番茄植株上檢測(cè)到 ToCV(Zhao ., 2013; Zhao et al., 2014; 高利利 等, 2015; 吳淑華, 2016),并且增的趨勢(shì)(圖 1-3)。
ToCV 與番茄侵染性褪綠病毒(Tomato infectious chlorosis virus, TICV)在癥狀表十分相似,很難區(qū)分,需要通過(guò)鑒別寄主進(jìn)行甄別(Hanssen et al., 2010),此外,以通過(guò)分子探針進(jìn)行區(qū)別。其典型癥狀還與“缺素癥”導(dǎo)致的褪綠黃化類似。感病發(fā)病初期,下部老葉開(kāi)始發(fā)病,葉片脈間褪綠黃化,葉脈顏色不變?nèi)员3志G色,葉厚變脆易折斷;發(fā)病中期,植株由下至上蔓延,葉片由葉緣向內(nèi)逐漸干枯壞死;發(fā)期,整個(gè)植株變黃,迅速衰老死亡,果實(shí)膨大受到限制,果實(shí)商品性能受到嚴(yán)重影茄褪綠病毒病會(huì)給番茄植株生長(zhǎng)帶來(lái)毀滅性的災(zāi)害,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失(圖 1-外,在我國(guó)已經(jīng)有 ToCV 和 TYLCV 復(fù)合侵染的相關(guān)報(bào)道。發(fā)生復(fù)合侵染的植株部條上葉片邊緣褪綠黃化、葉片皺縮卷曲及增厚等典型 TYLCV 癥狀,枝條頂梢癥狀;而有的枝條葉片則脈間均勻褪綠黃化,葉片增厚變脆易折,嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)壞死斑等 ToCV 癥狀。感病植株后期還會(huì)出現(xiàn)葉片均向上縱卷的現(xiàn)象(趙黎明 等, 2014)(5)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]江蘇省番茄黃化曲葉病毒和褪綠病毒復(fù)合侵染的分子檢測(cè)[J]. 吳淑華,李廷芳,趙文浩,程兆榜,郭青云,趙統(tǒng)敏,余文貴,朱葉芹,季英華. 園藝學(xué)報(bào). 2016(01)
[2]天津地區(qū)番茄褪綠病毒的分子檢測(cè)和鑒定[J]. 高利利,孫國(guó)珍,王勇,高葦,張春祥,張安勝,竺曉平. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2015(03)
[3]番茄褪綠病毒與番茄黃化曲葉病毒復(fù)合侵染的分子鑒定[J]. 趙黎明,李剛,劉永光,國(guó)家進(jìn),魏家鵬,竺曉平. 中國(guó)蔬菜. 2014(12)
[4]番茄褪綠病毒在山東暴發(fā)及其防治措施[J]. 劉永光,魏家鵬,喬寧,李美芹,劉曉明,竺曉平. 中國(guó)蔬菜. 2014(05)
[5]環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在植物病原物檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 秦文韜,王忠躍,張昊. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2013(03)
[6]煙粉虱是一個(gè)物種復(fù)合體[J]. 劉樹(shù)生. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2012(04)
[7]逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)花生條紋病毒[J]. 謝宏峰,遲玉成,許曼琳,樊堂群,張建建,吳菊香,許婷婷. 植物病理學(xué)報(bào). 2011(06)
[8]番茄黃化曲葉病毒研究進(jìn)展[J]. 李廷剛,李長(zhǎng)松. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2011(02)
[9]山東省局部地區(qū)番茄黃化曲葉病毒的分子鑒定[J]. 褚棟,侯麗霞,劉國(guó)霞,高長(zhǎng)生,Judith K Brown. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(02)
[10]山東省番茄黃化曲葉病毒病的發(fā)生及其防治[J]. 孫作文,楊進(jìn)緒,張美珍,李向東. 中國(guó)蔬菜. 2009(21)
博士論文
[1]我國(guó)煙粉虱生物型、遺傳分化及對(duì)常用殺蟲(chóng)劑的抗性機(jī)理研究[D]. 饒瓊.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
碩士論文
[1]番茄斑萎病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)方法的建立[D]. 習(xí)鳳妮.中南大學(xué) 2013
[2]北方三省番茄黃化曲葉病毒的檢測(cè)鑒定及變異分析[D]. 劉文浩.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3264862
【文章來(lái)源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
ToCV病毒粒子的電子顯微鏡照片(Orílioetal.,2014)
山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 et al., 2014; kil et al., 2015)等眾多國(guó)家和地區(qū)均有 ToCV 的分在臺(tái)灣地區(qū)報(bào)道該病毒病的發(fā)生(Tsai et al., 2004),隨后在北京北省、天津市、河南省等地區(qū)的番茄植株上檢測(cè)到 ToCV(Zhao ., 2013; Zhao et al., 2014; 高利利 等, 2015; 吳淑華, 2016),并且增的趨勢(shì)(圖 1-3)。
ToCV 與番茄侵染性褪綠病毒(Tomato infectious chlorosis virus, TICV)在癥狀表十分相似,很難區(qū)分,需要通過(guò)鑒別寄主進(jìn)行甄別(Hanssen et al., 2010),此外,以通過(guò)分子探針進(jìn)行區(qū)別。其典型癥狀還與“缺素癥”導(dǎo)致的褪綠黃化類似。感病發(fā)病初期,下部老葉開(kāi)始發(fā)病,葉片脈間褪綠黃化,葉脈顏色不變?nèi)员3志G色,葉厚變脆易折斷;發(fā)病中期,植株由下至上蔓延,葉片由葉緣向內(nèi)逐漸干枯壞死;發(fā)期,整個(gè)植株變黃,迅速衰老死亡,果實(shí)膨大受到限制,果實(shí)商品性能受到嚴(yán)重影茄褪綠病毒病會(huì)給番茄植株生長(zhǎng)帶來(lái)毀滅性的災(zāi)害,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失(圖 1-外,在我國(guó)已經(jīng)有 ToCV 和 TYLCV 復(fù)合侵染的相關(guān)報(bào)道。發(fā)生復(fù)合侵染的植株部條上葉片邊緣褪綠黃化、葉片皺縮卷曲及增厚等典型 TYLCV 癥狀,枝條頂梢癥狀;而有的枝條葉片則脈間均勻褪綠黃化,葉片增厚變脆易折,嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)壞死斑等 ToCV 癥狀。感病植株后期還會(huì)出現(xiàn)葉片均向上縱卷的現(xiàn)象(趙黎明 等, 2014)(5)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]江蘇省番茄黃化曲葉病毒和褪綠病毒復(fù)合侵染的分子檢測(cè)[J]. 吳淑華,李廷芳,趙文浩,程兆榜,郭青云,趙統(tǒng)敏,余文貴,朱葉芹,季英華. 園藝學(xué)報(bào). 2016(01)
[2]天津地區(qū)番茄褪綠病毒的分子檢測(cè)和鑒定[J]. 高利利,孫國(guó)珍,王勇,高葦,張春祥,張安勝,竺曉平. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2015(03)
[3]番茄褪綠病毒與番茄黃化曲葉病毒復(fù)合侵染的分子鑒定[J]. 趙黎明,李剛,劉永光,國(guó)家進(jìn),魏家鵬,竺曉平. 中國(guó)蔬菜. 2014(12)
[4]番茄褪綠病毒在山東暴發(fā)及其防治措施[J]. 劉永光,魏家鵬,喬寧,李美芹,劉曉明,竺曉平. 中國(guó)蔬菜. 2014(05)
[5]環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在植物病原物檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 秦文韜,王忠躍,張昊. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2013(03)
[6]煙粉虱是一個(gè)物種復(fù)合體[J]. 劉樹(shù)生. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2012(04)
[7]逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)花生條紋病毒[J]. 謝宏峰,遲玉成,許曼琳,樊堂群,張建建,吳菊香,許婷婷. 植物病理學(xué)報(bào). 2011(06)
[8]番茄黃化曲葉病毒研究進(jìn)展[J]. 李廷剛,李長(zhǎng)松. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2011(02)
[9]山東省局部地區(qū)番茄黃化曲葉病毒的分子鑒定[J]. 褚棟,侯麗霞,劉國(guó)霞,高長(zhǎng)生,Judith K Brown. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(02)
[10]山東省番茄黃化曲葉病毒病的發(fā)生及其防治[J]. 孫作文,楊進(jìn)緒,張美珍,李向東. 中國(guó)蔬菜. 2009(21)
博士論文
[1]我國(guó)煙粉虱生物型、遺傳分化及對(duì)常用殺蟲(chóng)劑的抗性機(jī)理研究[D]. 饒瓊.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
碩士論文
[1]番茄斑萎病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)方法的建立[D]. 習(xí)鳳妮.中南大學(xué) 2013
[2]北方三省番茄黃化曲葉病毒的檢測(cè)鑒定及變異分析[D]. 劉文浩.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3264862
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