發(fā)布時(shí)間：2021-07-02 08:57

　　蘋(píng)果是世界范圍內(nèi)最受歡迎的水果之一。西北黃土高原產(chǎn)區(qū)是我國(guó)蘋(píng)果的最佳產(chǎn)區(qū)。然而,因其地處內(nèi)陸干旱區(qū),降水量少且季節(jié)分配不均勻,導(dǎo)致干旱等不良生長(zhǎng)環(huán)境限制了該地區(qū)蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。質(zhì)膜內(nèi)在蛋白PIPs（Plasma membrane intrinsic proteins）是水通道蛋白（Aquaporins,AQPs）的一個(gè)亞家族,定位于細(xì)胞質(zhì)膜,能夠選擇性地跨膜高效轉(zhuǎn)運(yùn)水分子及其它中性小分子物質(zhì),參與植物體對(duì)水分的吸收與運(yùn)輸。本論文從‘金冠’（Malus×domestica Borkh.cv.Golden Delicious）中克隆了MdPIP2;2基因,研究了其在蘋(píng)果不同組織中的表達(dá)特異性,及對(duì)干旱、高溫、低溫及外源ABA的響應(yīng)。利用大腸桿菌SUMO化系統(tǒng)確定了MdPIP2;2是MdSUMO2A的靶蛋白。利用MdPIP2;2基因過(guò)表達(dá)株系進(jìn)一步鑒定了MdPIP2;2基因在干旱、高溫脅迫下的生物學(xué)功能。主要結(jié)果如下:1.蘋(píng)果MdPIP2;2基因克隆與表達(dá)分析。從‘金冠’中克隆了蘋(píng)果MdPIP2;2,該基因CDS編碼區(qū)域全長(zhǎng)846 bp,共編碼281個(gè)氨基酸。對(duì)MdPIP2;2基因的組織... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MdPIP2;2基因在富平楸子不同器官中的表達(dá)模式

圖 2-2 MdPIP2;2響應(yīng)不同脅迫處理的表達(dá)模式Fig. 2-2 Expression patterns of MdPIP2;2 in response to various abiotic stressesA，MdPIP2;2在‘秦冠’中響應(yīng)短期干旱的表達(dá)模式；B，MdPIP2;2在‘秦冠’中響應(yīng)長(zhǎng)期干旱的表達(dá)模式；C-D，MdPIP2;2在富平楸子（C）、‘金冠’（D）中響應(yīng)低溫脅迫的表達(dá)模式；E，MdPIP2;2在‘金冠’中響應(yīng)高溫脅迫的表達(dá)模式；F，MdPIP2;2在‘金冠’中響應(yīng)外源 ABA處理。A. Expression patterns of MdPIP2;2 in response to short-term drought in Qinguan. B. Expressionpatterns of MdPIP2;2 in response to long-term drought in Qinguan (C). C-D. Expression patterns ofMdPIP2;2 in response to low temperature stress in Malus prunifolia (C) and Golden Delicious (D). E.Expression patterns of MdPIP2;2 in response to high temperature stress in Golden Delicious. F.MdPIP2;2 is responsive to ABA treatment in Golden Delicious2.3.2 蘋(píng)果 MdPIP2;2 蛋白的 SUMO 化修飾使用網(wǎng)站 http://sumosp.biocuckoo.org/online.php，預(yù)測(cè) MdPIP2;2 的 SUMO 化修飾位點(diǎn)。如圖 2-3所示，預(yù)測(cè) MdPIP2;2 的 SUMO化修飾位點(diǎn)為第 272位賴(lài)氨酸（K）。

西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 2-3 預(yù)測(cè) MdPIP2;2 的 SUMO 化位點(diǎn)Fig.2-3 Predicted SUMOylation site of MdPIP2;2的特殊性，MdPIP2;2全長(zhǎng)蛋白在大腸桿菌系統(tǒng)中MdPIP2;2 進(jìn)行截短，只保留了位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)羧基端內(nèi)包含了預(yù)測(cè)的第 272 位 SUMO 化修飾位點(diǎn)。將EX4T-1上，并將其轉(zhuǎn)入原核表達(dá)的SUMO化修飾系Western blot 檢測(cè) MdPIP2;2 的 SUMO 化修飾狀態(tài)。2位的賴(lài)氨酸位點(diǎn)發(fā)生 MdSUMO2A介導(dǎo)的 SUMO化氨酸（R）后，MdPIP2;2 的 SUMO 化修飾消失，點(diǎn)確實(shí)為第 272位的賴(lài)氨酸。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
[1]蘋(píng)果自噬相關(guān)基因MdATG5-1和MdATG5-2在干旱、高溫逆境中的功能分析[D]. 賈昕.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018



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