目的研究寬葉獨(dú)行菜的經(jīng)濟(jì)價值,探討綠原酸的提取工藝條件;將甘藍(lán)型油菜和寬葉獨(dú)行菜進(jìn)行體細(xì)胞雜交,培育出具有優(yōu)良性狀的雜種植株,從而實現(xiàn)對油菜的遺傳改良。方法通過單因素試驗對乙醇濃度、材料粒度、液料比及超聲功率等工藝參數(shù)進(jìn)行研究,并通過響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝,建立寬葉獨(dú)行菜綠原酸提取得率的多元二次回歸方程;利用PEG-高Ca2+、高p H誘導(dǎo)融合的方法,將油菜葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體同寬葉獨(dú)行菜葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體進(jìn)行不對稱融合,然后依次在Pell B固液雙層培養(yǎng)基、Pell C擴(kuò)增培養(yǎng)基、Pell E生根培養(yǎng)基和MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。培育出雜種植株后對其進(jìn)行形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)鑒定。結(jié)果單因素和響應(yīng)面優(yōu)化綠原酸提取的最優(yōu)參數(shù)為:乙醇濃度80%,材料粒度40目,液料比50:1,超聲功率200W,在此實驗條件下綠原酸取得率的理論值為0.796%,實際驗證值為0.712%。通過在一系列不同培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),并對實驗中各條件因素的調(diào)控,最終獲得了結(jié)合了雙親性狀的雜種植株。結(jié)論寬葉獨(dú)行菜具有很高的經(jīng)濟(jì)利用價值,可以作為綠原酸的提取原材料;將甘藍(lán)型油菜與寬葉獨(dú)行菜進(jìn)行雜交,可以使油菜獲得優(yōu)良的性狀。 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

綠原酸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文的實驗數(shù)據(jù)整理分析繪制成統(tǒng)計圖，如圖 2 所示。由圖 2 可以清晰地看出，當(dāng)乙醇濃度在 30%-70%之間時，綠原酸的提取率隨濃度的增大而增大，當(dāng)乙醇濃度為 70%時，提取率達(dá)到最大值 0.47%，這可能綠原酸本身的理化性質(zhì)有關(guān)，由于綠原酸易溶于乙醇，乙醇的體積分?jǐn)?shù)越大越于寬葉獨(dú)行菜中綠原酸的溶出和提取[5]。當(dāng)乙醇濃度超過 70%時，綠原酸的提逐步降低，這可能與溶劑本身的介電性能和極性有關(guān)，乙醇濃度過高反而使得酸的提取率降低[6]。因此考察乙醇濃度這一單因素時選擇 70%的乙醇溶液作為溶劑最為適宜。

圖 3 材料粒度對綠原酸提取得率的影響Fig.3 The effect of material particle size to the obtain rate of chlorogenic acid3）液料比對寬葉獨(dú)行菜綠原酸提取得率的影響乙醇濃度 70%，材料粒度 120 目，超聲功率 250W，液料比共設(shè)置 7 個不同的梯度分別為：10:1、20:1、30:1、40:1、50:1、60:1、70:1，此時考察液料比對獨(dú)行菜綠原酸提取得率的影響，將實驗所得數(shù)據(jù)進(jìn)行整理分析其結(jié)果如圖 4 所由圖 4 折線的走勢可以清晰地看出，隨著液料比從 10:1 增加到 40:1，寬葉獨(dú)綠原酸的提取率逐步增加，并在 40:1 處達(dá)到最大提取率 0.67%；當(dāng)液料比超:1 時提取率逐步下降，這可能與溶質(zhì)和溶劑之間的相互作用和乙醇含量對綠提取率的影響有關(guān)，綜合實驗數(shù)據(jù)考慮在本實驗中液料比選擇 40:1 比較適

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3246258