猴頭菌（Hericium erinaceus）是我國珍貴的食藥用兼用真菌,有“山珍猴頭,海味燕窩”的美稱。猴頭菌化學成分非常復雜,有多糖、甾醇類、萜類、脂肪酸、酚類等化合物,猴頭菌子實體也具有提高免疫力、抗氧化、抗腫瘤、降血脂、抗衰老等多種功效。隨著對猴頭菌的深入研究,猴頭菌類產品也日益增多,猴頭菇市場需求量急劇增大,而優(yōu)良猴頭菌株是獲得高品質猴頭菇的前提和基礎。因此,選育活性代謝物含量高、生物學轉化率高的菌株具有實際應用價值。本文以生物轉化率較高的猴頭菌株0605和子實體形態(tài)較好的刺長菌株為親本菌株,制備原生質體單核體,進行單核體雜交和原生質體融合育種,對得到的雜合子和融合子進行鑒定、篩選和栽培,以活性成分、營養(yǎng)成分及外觀品質等為主要指標篩選優(yōu)良猴頭菌品種。本論文主要研究內容如下:1.通過單因素試驗和正交試驗確定了猴頭菌原生質體制備與再生的最佳條件:酶系統(tǒng)2.0%溶壁酶+0.5%崩潰酶,酶解溫度32℃,酶解時間2.5 h,菌絲體菌齡10 d,恒溫搖床轉速120 rpm,在此制備條件下,猴頭菌原生質體的數量和再生率均較高,分別為13.10×10⁶個/mL、0.83... 

【文章來源】：上海海洋大學上海市

【文章頁數】：77 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同酶系統(tǒng)對原生質體釋放量和再生率的影響

注：a.菌齡 8d 的原生質體再生菌落；b.菌齡 10d 的原生質體再生菌落；c.菌齡 12d 的原生質體再生菌落圖 2-3 不同菌齡再生菌落Fig.2-3 The regenerated strain of different mycelial age2.2.1.3 酶解時間的影響在篩選獲得的最佳酶系統(tǒng)和菌齡條件下研究了不同酶解時間對原生質體制備與再生的影響。實驗結果見圖 2-4。從圖 2-4(A)可以看出：原生質體數量在酶解初期隨著酶解時間的延長而增加，在 2.5h 達到最大 12.65×106個/mL。酶解時間再延長原生質體數量下降，可能是因為酶解時間過長，裂解酶造成了原生質體的破裂或溶解。圖 2-4( B)中菌絲酶解 3.5h 的再生率達到最高 0.50%，但此時原生質體數量為 1.68×106個/ mL， 遠低于最大原生質體數量 12.65×106個/ mL。而酶解 2.5h 的再生率為 0.41%稍低于峰值，且原生質體數量最大。因此，綜合原生質體數量和再生率，本試驗采用酶解時間 2.5h。

注：a.菌齡 8d 的原生質體再生菌落；b.菌齡 10d 的原生質體再生菌落；c.菌齡 12d 的原生質體再生菌落圖 2-3 不同菌齡再生菌落Fig.2-3 The regenerated strain of different mycelial age2.2.1.3 酶解時間的影響在篩選獲得的最佳酶系統(tǒng)和菌齡條件下研究了不同酶解時間對原生質體制備與再生的影響。實驗結果見圖 2-4。從圖 2-4(A)可以看出：原生質體數量在酶解初期隨著酶解時間的延長而增加在 2.5h 達到最大 12.65×106個/mL。酶解時間再延長原生質體數量下降，可能是因為酶解時間過長，裂解酶造成了原生質體的破裂或溶解。圖 2-4( B)中菌絲酶解 3.h 的再生率達到最高 0.50%，但此時原生質體數量為 1.68×106個/ mL， 遠低于最大原生質體數量 12.65×106個/ mL。而酶解 2.5h 的再生率為 0.41%稍低于峰值，且原生質體數量最大。因此，綜合原生質體數量和再生率，本試驗采用酶解時間 2.5h


本文編號：3236076