莽草酸途徑是連接初級代謝和次生代謝的橋梁,它廣泛存在于植物中,其后有一個重要分支,經(jīng)由分支酸變位酶的催化走向類黃酮代謝。類黃酮類物質主要包括黃酮醇,黃烷醇和花色苷,它們對葡萄酒的顏色和口感起到重要作用,因此葡萄果實的類黃酮代謝一直被廣泛研究。研究表明莽草酸途徑和類黃酮代謝在轉錄水平上存在一定的協(xié)同表達的現(xiàn)象,但是這種協(xié)同表達機制一直未明確。本研究首先通過HPLC-MS和Real-time PCR技術分別從代謝水平和轉錄水平對避雨栽培/露地栽培下莽草酸途徑-類黃酮代謝進行了比較分析,篩選到這兩個代謝途徑協(xié)同表達的基因,并克隆了莽草酸途徑關鍵酶VvDAHPS和VvCM基因,分析其編碼蛋白的生化性質。在此基礎上,對VvDAHPS和VvCM基因啟動子與調控下游類黃酮代謝的MYB家族轉錄因子VvMYBPA1和VvMYB5b的相互作用進行驗證,試圖從產(chǎn)物、蛋白和轉錄三個水平闡明莽草酸代謝-類黃酮代謝的協(xié)同表達機制。主要研究結果如下:通過連續(xù)兩年對避雨栽培和露地栽培的葡萄果實莽草酸-類黃酮代謝產(chǎn)物和相關基因表達分析發(fā)現(xiàn),避雨栽培可以顯著改變果際和葉幕微氣候,但是并沒有降低釀酒葡萄果實品質。2012年... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３由ＤＡＨＰＳ催化的反應??Ｆｉｕｒｅ?１－３?Ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｃａｔａｌｚｅｄ?ｂ３－Ｄｅｏｘ－Ｄ－／ｉｒａ６；＞２〇－Ｈｅｔｕｌｏｓｏｎａｔｅ－７－Ｐｈｏｓｈａｔｅ?Ｓｎｔｈａｓｅ?（Ｈｅｒｎｎａｎｎ１９９５ｂ）??

Ｉ；ｉｇｕｒｅ?２－１?Ｒａｉｎ－ｓｈｅｌｔｅｒ?ｓｈｅｄ?（Ａ），?ｔｈｅ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ?（Ｂ）?ａｎｄ?ｍｅｔｅｏｒｏｌｏｇｉｃａｌ?ｄａｔａ?ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ?（Ｃ，?Ｄ）??２．１．２葡萄樣品??使用２０１２年和２０１３年張裕愛斐堡避雨栽培和露地栽培兩種模式下生長的‘赤霞珠’（Ｋ?ｗ＞７決ｒａ??ｃｖ．?ＣａｂｃｍｃｔＳａｕｖｉｇｎｏｎ）葡萄果實。??２０１２年試驗所選‘赤霞珠’在５月２５丨：｜汗花，花期持續(xù)約１周。果實在花后９周汗始轉色，??轉色期大約４周，到十月中旬（花后２１周）果實成熟采收。避雨棚搭建于葡萄花后１４天。本試??驗從花后３周開始采樣，之后每隔１？２周采樣一次，直至采收。采樣時，注意兼顧朵穗內(nèi)外和南??北朝向，分別從兩種栽培模式下的樹上隨機采摘，每個果穂每次僅采１？２粒，兩種栽培模式每次??采樣量為３０００粒。將３０００粒果實分為：？：個生物學重復，每個重復包含１０００粒果實，其中２００??粒留做理化指標測定，其余８０Ｕ粒用液Ｅ速凍／＾分成兩份ｒ－８Ｕ°Ｃ保存，其中一份用于ＲＮＡ提取，??另一份用于產(chǎn)物檢測。??２０１３年試驗所選‘赤霞珠’在６月７丨丨汁花，花期持續(xù)約１周。果實在花后８周汗始轉色，??轉色期大約３周，到十月上旬（花后１８周）果實成熟采收。避雨棚搭建于葡萄花后４１天。本試??？一

一定的紫外濾減的作用。??２．３．２避雨栽培對果實成熟進程的影響??如圖２－３所示，兩個年份中，葡萄果實在生長過程中均呈現(xiàn)典型的雙“Ｓ”型，隨著果實發(fā)??育，果實重量逐漸增加。２０１２年，避雨栽培果實在進入轉色期后果實重量顯著低于露地栽培，到??成熟至采收期兩者沒有顯著性差異；２０１３年，兩種栽培模式下果實重量處于交替上升的趨勢，僅??在轉色前和轉色完成后第一個點露地栽培高于避雨栽培，其他時期二者沒有顯著性差異。觀察果??實體積的變化發(fā)現(xiàn)，兩年間變化趨勢與果實重量相似，不同的是，２０１２年露地栽培果實體積始終??高于避雨栽培，尤其在采收期出現(xiàn)了一個明顯的上揚；而２０１３年果實體積在露地栽培與避雨栽??培下大多數(shù)發(fā)育期沒有顯著性差異，僅在轉色結束時避雨栽培出現(xiàn)了體積的降低，顯著低于了露??地栽培。對比兩個年份的降水情況可以看出，２０１２年的降水量顯著高于露地栽培，尤其是在Ｓｔａｇｅ??ＩＩ


本文編號：3235116