莽草酸途徑是連接初級(jí)代謝和次生代謝的橋梁,它廣泛存在于植物中,其后有一個(gè)重要分支,經(jīng)由分支酸變位酶的催化走向類黃酮代謝。類黃酮類物質(zhì)主要包括黃酮醇,黃烷醇和花色苷,它們對(duì)葡萄酒的顏色和口感起到重要作用,因此葡萄果實(shí)的類黃酮代謝一直被廣泛研究。研究表明莽草酸途徑和類黃酮代謝在轉(zhuǎn)錄水平上存在一定的協(xié)同表達(dá)的現(xiàn)象,但是這種協(xié)同表達(dá)機(jī)制一直未明確。本研究首先通過(guò)HPLC-MS和Real-time PCR技術(shù)分別從代謝水平和轉(zhuǎn)錄水平對(duì)避雨栽培/露地栽培下莽草酸途徑-類黃酮代謝進(jìn)行了比較分析,篩選到這兩個(gè)代謝途徑協(xié)同表達(dá)的基因,并克隆了莽草酸途徑關(guān)鍵酶VvDAHPS和VvCM基因,分析其編碼蛋白的生化性質(zhì)。在此基礎(chǔ)上,對(duì)VvDAHPS和VvCM基因啟動(dòng)子與調(diào)控下游類黃酮代謝的MYB家族轉(zhuǎn)錄因子VvMYBPA1和VvMYB5b的相互作用進(jìn)行驗(yàn)證,試圖從產(chǎn)物、蛋白和轉(zhuǎn)錄三個(gè)水平闡明莽草酸代謝-類黃酮代謝的協(xié)同表達(dá)機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:通過(guò)連續(xù)兩年對(duì)避雨栽培和露地栽培的葡萄果實(shí)莽草酸-類黃酮代謝產(chǎn)物和相關(guān)基因表達(dá)分析發(fā)現(xiàn),避雨栽培可以顯著改變果際和葉幕微氣候,但是并沒(méi)有降低釀酒葡萄果實(shí)品質(zhì)。2012年... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３由ＤＡＨＰＳ催化的反應(yīng)??Ｆｉｕｒｅ?１－３?Ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｃａｔａｌｚｅｄ?ｂ３－Ｄｅｏｘ－Ｄ－／ｉｒａ６；＞２〇－Ｈｅｔｕｌｏｓｏｎａｔｅ－７－Ｐｈｏｓｈａｔｅ?Ｓｎｔｈａｓｅ?（Ｈｅｒｎｎａｎｎ１９９５ｂ）??

Ｉ；ｉｇｕｒｅ?２－１?Ｒａｉｎ－ｓｈｅｌｔｅｒ?ｓｈｅｄ?（Ａ），?ｔｈｅ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ?（Ｂ）?ａｎｄ?ｍｅｔｅｏｒｏｌｏｇｉｃａｌ?ｄａｔａ?ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ?（Ｃ，?Ｄ）??２．１．２葡萄樣品??使用２０１２年和２０１３年張?jiān)?ài)斐堡避雨栽培和露地栽培兩種模式下生長(zhǎng)的‘赤霞珠’（Ｋ?ｗ＞７決ｒａ??ｃｖ．?ＣａｂｃｍｃｔＳａｕｖｉｇｎｏｎ）葡萄果實(shí)。??２０１２年試驗(yàn)所選‘赤霞珠’在５月２５丨：｜汗花，花期持續(xù)約１周。果實(shí)在花后９周汗始轉(zhuǎn)色，??轉(zhuǎn)色期大約４周，到十月中旬（花后２１周）果實(shí)成熟采收。避雨棚搭建于葡萄花后１４天。本試??驗(yàn)從花后３周開(kāi)始采樣，之后每隔１？２周采樣一次，直至采收。采樣時(shí)，注意兼顧朵穗內(nèi)外和南??北朝向，分別從兩種栽培模式下的樹(shù)上隨機(jī)采摘，每個(gè)果穂每次僅采１？２粒，兩種栽培模式每次??采樣量為３０００粒。將３０００粒果實(shí)分為：？：個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)包含１０００粒果實(shí)，其中２００??粒留做理化指標(biāo)測(cè)定，其余８０Ｕ粒用液Ｅ速凍／＾分成兩份ｒ－８Ｕ°Ｃ保存，其中一份用于ＲＮＡ提取，??另一份用于產(chǎn)物檢測(cè)。??２０１３年試驗(yàn)所選‘赤霞珠’在６月７丨丨汁花，花期持續(xù)約１周。果實(shí)在花后８周汗始轉(zhuǎn)色，??轉(zhuǎn)色期大約３周，到十月上旬（花后１８周）果實(shí)成熟采收。避雨棚搭建于葡萄花后４１天。本試??？一

一定的紫外濾減的作用。??２．３．２避雨栽培對(duì)果實(shí)成熟進(jìn)程的影響??如圖２－３所示，兩個(gè)年份中，葡萄果實(shí)在生長(zhǎng)過(guò)程中均呈現(xiàn)典型的雙“Ｓ”型，隨著果實(shí)發(fā)??育，果實(shí)重量逐漸增加。２０１２年，避雨栽培果實(shí)在進(jìn)入轉(zhuǎn)色期后果實(shí)重量顯著低于露地栽培，到??成熟至采收期兩者沒(méi)有顯著性差異；２０１３年，兩種栽培模式下果實(shí)重量處于交替上升的趨勢(shì)，僅??在轉(zhuǎn)色前和轉(zhuǎn)色完成后第一個(gè)點(diǎn)露地栽培高于避雨栽培，其他時(shí)期二者沒(méi)有顯著性差異。觀察果??實(shí)體積的變化發(fā)現(xiàn)，兩年間變化趨勢(shì)與果實(shí)重量相似，不同的是，２０１２年露地栽培果實(shí)體積始終??高于避雨栽培，尤其在采收期出現(xiàn)了一個(gè)明顯的上揚(yáng)；而２０１３年果實(shí)體積在露地栽培與避雨栽??培下大多數(shù)發(fā)育期沒(méi)有顯著性差異，僅在轉(zhuǎn)色結(jié)束時(shí)避雨栽培出現(xiàn)了體積的降低，顯著低于了露??地栽培。對(duì)比兩個(gè)年份的降水情況可以看出，２０１２年的降水量顯著高于露地栽培，尤其是在Ｓｔａｇｅ??ＩＩ


本文編號(hào)：3235116