’琯溪蜜柚 ’（Citrus maxima Burm.Merr.cv.Guanximiyou）原產(chǎn)于福建省漳州市平和縣,是我國栽培柚類的名品。’紅綿蜜柚’（Citrus maxima（Burm.）Merr.cv.Hongmianmiyou）、’三紅蜜柚’（Citrus maxima（Burm.）Merr.cv.Sanhongmmiyou）和’紅肉蜜柚’（Citrus maxima（Burm.）Merr.cv.Hongroumiyou）均為’琯溪蜜柚’的芽變選育品種。為了解蜜柚果實不同組織的呈色機理,本研究以’琯溪蜜柚’、’紅綿蜜柚’、’三紅蜜柚’和’紅肉蜜柚’為試驗材料,以期探討蜜柚不同組織中主要類胡蘿卜素的積累以及與類胡蘿卜素合成途徑中相關(guān)酶基因之間的關(guān)系,為揭示蜜柚果實的呈色機理奠定理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1、蜜柚果實類胡蘿卜素UPLC檢測體系的建立。采用ACQUITY UPLC（?）（美國WATERS公司）超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,配備ACQUITYUPLC（?）BEHC18 色譜柱,2.1×100mm,1.7 μm,以乙腈:甲醇:四氫呋喃=90:5:5為流動相進(jìn)行等度洗脫... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1 類胡蘿卜素的研究現(xiàn)狀
        1.1 類胡蘿卜素的生物學(xué)功能
            1.1.1 類胡蘿卜素參與光合作用
            1.1.2 類胡蘿卜素具有抗氧化作用
            1.1.3 類胡蘿卜素在細(xì)胞膜上的作用
            1.1.4 類胡蘿卜素是維生素A原
            1.1.5 類胡蘿卜素與蛋白質(zhì)之間的相互作用
            1.1.6 類胡蘿卜素在細(xì)胞膜上的作用
        1.2 類胡蘿卜素的生物合成途徑
        1.3 類胡蘿卜素生物合成途徑中主要酶及基因
    2 類胡蘿卜素的提取技術(shù)
        2.1 有機溶劑提取法
        2.2 酶反應(yīng)法
        2.3 微波輔助萃取法
        2.4 超聲波輔助萃取法
        2.5 超臨界流體萃取法
    3 本研究的意義及內(nèi)容
        3.1 研究意義與主要內(nèi)容
        3.2 技術(shù)路線
第二章 柚果實類胡蘿卜素UPLC方法的建立
    1 材料與方法
        1.1 試驗材料
        1.2 試驗儀器和試劑
            1.2.1 主要試驗儀器
            1.2.2 主要試驗藥品
        1.3 試驗方法
            1.3.1 樣品溶液的制備
            1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
            1.3.3 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 UPLC類胡蘿卜素組分分離條件的優(yōu)化
        2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.3 UPLC定量分析的方法考察
            2.3.1 精密度試驗
            2.3.2 重復(fù)性試驗
            2.3.3 穩(wěn)定性試驗
            2.3.4 加標(biāo)回收試驗
    3 討論
第三章 柚果實類胡蘿卜素的分離與主要色素的含量分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗材料
        1.2 試驗儀器和試劑
        1.3 試驗方法
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 柚果實的發(fā)育及成色過程
        2.2 不同品種柚果實內(nèi)番茄紅素含量的變化
        2.3 不同品種柚果實內(nèi)β-胡蘿卜素含量的變化
        2.4 不同品種柚果實內(nèi)玉米黃素含量的變化
    3 討論
第四章 柚類胡蘿卜素合成途徑相關(guān)基因的克隆及表達(dá)分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗材料
        1.2 試驗方法
            1.2.1 總RNA的提取和cDNA逆轉(zhuǎn)錄
            1.2.2 目的基因克隆
            1.2.3 生物信息學(xué)分析
            1.2.4 熒光定量PCR分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 目的基因克隆
        2.2 生物信息學(xué)分析
        2.3 氨基酸序列多重比對及進(jìn)化樹分析
            2.3.1 CmPSY編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
            2.3.2 CmPDS編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
            2.3.3 CmZDS編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
            2.3.4 CmCRTISO編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
            2.3.5 CmLCYE編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
            2.3.6 CmLCYB編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
            2.3.7 CmBCH編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
            2.3.8 CmZEP編碼氨基酸序列多重比對分析及進(jìn)化樹分析
        2.4 熒光定量PCR分析
            2.4.1 CmPSY在柚果實不同時期表達(dá)分析
            2.4.2 CmPDS在柚果實不同時期表達(dá)分析
            2.4.3 CmZDS在柚果實不同時期表達(dá)分析
            2.4.4 CmCRTISO在柚果實不同時期表達(dá)分析
            2.4.5 CmLCYE在柚果實不同時期表達(dá)分析
            2.4.6 CmLCYB在柚果實不同時期表達(dá)分析
            2.4.7 CmBCH在柚果實不同時期表達(dá)分析
            2.4.8 CmZEP在柚果實不同時期表達(dá)分析
    3 討論
第五章 總結(jié)與展望
    1 總結(jié)
        1.1 蜜柚果實類胡蘿卜素UPLC檢測體系的建立
        1.2 蜜柚果實中主要類胡蘿卜素的分離與鑒定
        1.3 相關(guān)基因的克隆與生物信息學(xué)分析
        1.4 利用熒光定量PCR技術(shù)對相關(guān)基因進(jìn)行表達(dá)分析
    2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄A 柚類胡蘿卜素UPLC條件優(yōu)化
附錄B 編碼區(qū)序列和推導(dǎo)的氨基酸序列
附錄C 生物信息學(xué)分析
攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)論文與研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]‘紅肉蜜柚’與‘紅綿蜜柚’汁胞差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 伍洋.福建農(nóng)林大學(xué) 2013
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[7]甜瓜果實番茄紅素-β環(huán)化酶基因的克隆、表達(dá)與遺傳轉(zhuǎn)化研究[D]. 郝慧.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[8]芒果果實色素與色澤變化規(guī)律及調(diào)控的研究[D]. 張金云.海南大學(xué) 2010
[9]番木瓜類胡蘿卜素生物合成途徑部分酶基因cDNA的克隆與分析[D]. 趙新偉.福建農(nóng)林大學(xué) 2010
[10]牛奶子果實成熟過程中類胡蘿卜素組成及代謝酶基因的克隆與表達(dá)[D]. 郭新倫.浙江師范大學(xué) 2009



本文編號：3204961