發(fā)布時(shí)間：2021-05-23 20:17

　　茄子（Solanum melongena L.）是全球范圍內(nèi)廣泛種植的重要蔬菜作物,其果皮中富含的花色苷是重要的人體健康有益成分。目前國(guó)內(nèi)大部分栽培茄子品種對(duì)設(shè)施栽培的弱光條件表現(xiàn)出較差的適應(yīng)性,具體表現(xiàn)為茄子果皮著色不均,進(jìn)而引起果實(shí)品質(zhì)下降。由于國(guó)內(nèi)設(shè)施栽培所用的茄子種子大多源于國(guó)外進(jìn)口,這對(duì)于國(guó)內(nèi)茄子產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和種子戰(zhàn)略安全極為不利,因此茄子種質(zhì)是目前制約整個(gè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素,而開展光調(diào)控茄子果實(shí)發(fā)育與著色的分子遺傳機(jī)理研究則能夠?yàn)槲磥?lái)優(yōu)質(zhì)材料的選育提供理論指導(dǎo)。本論文以花色苷合成完全光依賴型的紫長(zhǎng)茄“三月茄”為材料,結(jié)合qRT-PCR技術(shù)、遺傳轉(zhuǎn)化、HPLC及轉(zhuǎn)錄組等技術(shù)和方法分析光形態(tài)建成調(diào)控因子SmCOP1L和SmCIP7在果實(shí)發(fā)育與著色中的功能。主要研究結(jié)果如下:1)通過qRT-PCR技術(shù)分析了花色苷生物合成及調(diào)控基因SmCHS、SmDFR、Sm3GT、SmMYB1、SmTT8、SmCOP1L、SmCOP1、SmCIP7、SmCRY1、SmCRY2和SmHY5在光照或黑暗處理?xiàng)l件下的表達(dá)情況。發(fā)現(xiàn)光能夠強(qiáng)烈地誘導(dǎo)SmCHS、SmDFR、Sm3GT、SmMYB1、S... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：129 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 花色苷概述
        1.2.1 花色苷的結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)
        1.2.2 花色苷生理的功能
    1.3 花色苷的生物合成途徑及調(diào)控機(jī)制研究
        1.3.1 花色苷生物合成途徑
        1.3.2 花色苷生物合成的分子調(diào)控機(jī)理
    1.4 光對(duì)花色苷生物合成的影響
    1.5 COP1調(diào)控植物花色苷合成的研究進(jìn)展
        1.5.1 COP1 與光受體的研究
        1.5.2 COP1與MYB轉(zhuǎn)錄因子的研究
        1.5.3 COP1與HY5 轉(zhuǎn)錄因子的研究
        1.5.4 COP1與CIPs的研究
        1.5.5 COP1與AN3 轉(zhuǎn)錄因子的研究
    1.6 茄子花色苷生物合成及其調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展
    1.7 課題的提出及研究意義
    1.8 本課題的技術(shù)路線及創(chuàng)新點(diǎn)
2 茄子花色苷生物合成調(diào)控基因的篩選
    2.1 材料、試劑與儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料的獲得
        2.2.2 植物總RNA的提取
        2.2.3 cDNA的合成
        2.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)
        2.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
        2.2.6 植物總花色苷的提取及含量測(cè)定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 茄子花色苷生物合成調(diào)控基因的初步篩選
        2.3.2 茄子不同光照條件下花色苷生物合成基因表達(dá)模式分析
        2.3.3 茄子不同光照條件下花色苷生物合成調(diào)控基因表達(dá)模式分析
        2.3.4 茄子不同組織中花色苷生物合成基因表達(dá)模式分析
        2.3.5 茄子不同組織中花色苷生物合成調(diào)控基因表達(dá)模式分析
    2.4 討論
3 SmCOP1L和 SmCIP7 的生物信息學(xué)分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 SmCOP1L的生物信息學(xué)分析
        3.2.2 SmCIP7 的生物信息學(xué)分析
    3.3 討論
4 SmCOP1L和 SmCIP7 基因沉默載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
    4.1 材料、試劑與儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 重組質(zhì)粒SmCOP1L-pMD19-T和 SmCIP7-pMD19-T的獲得
        4.2.2 重組質(zhì)粒pHBLD-SmCOP1L(1)和p HBLD-Sm CIP7(1)的獲得
        4.2.3 重組質(zhì)粒pHBLD-SmCOP1L(2)和p HBLD-Sm CIP7(2)的獲得
        4.2.4 重組質(zhì)粒pBIN19-SmCOP1L和 p BIN19-SmCIP7 的獲得
        4.2.5 農(nóng)桿菌的結(jié)合轉(zhuǎn)移
        4.2.6 茄子的遺傳轉(zhuǎn)化
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 SmCOP1L和 SmCIP7 基因核心特異性片段的克隆
        4.3.2 SmCOP1L-RNAi和 SmCIP7-RNAi載體的構(gòu)建
        4.3.3 轉(zhuǎn)基因植株的再生
    4.4 討論
5 SmCOP1L調(diào)節(jié)花色苷生物合成的機(jī)理研究
    5.1 材料、試劑與儀器
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)
        5.2.2 類黃酮物質(zhì)的提取
        5.2.3 花色苷與綠原酸含量的測(cè)定
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 SmCOP1L-RNAi轉(zhuǎn)基因株系的鑒定
        5.3.2 SmCOP1L-RNAi株系中表型及花色苷結(jié)構(gòu)基因表達(dá)分析
        5.3.3 SmCOP1L-RNAi株系T1 代的鑒定及表型特征分析
        5.3.4 SmCOP1L-RNAi株系T1 代的苯丙烷途徑及相關(guān)調(diào)控基因表達(dá)分析
        5.3.5 過表達(dá)SmMYB1 促進(jìn)了SmCOP1和SmCOP1L的表達(dá)
    5.4 討論
6 SmCIP7 調(diào)節(jié)花色苷生物合成的機(jī)理研究
    6.1 材料、試劑與儀器
    6.2 實(shí)驗(yàn)方法
        6.2.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)
        6.2.2 葉綠素的提取與測(cè)定
    6.3 結(jié)果與分析
        6.3.1 SmCIP7-RNAi株系的篩選及沉默效率的鑒定
        6.3.2 SmCIP7-RNAi株系表型特征分析
        6.3.3 SmCIP7-RNAi株系類黃酮生物合成基因的表達(dá)分析
    6.4 討論
7 SmCIP7 調(diào)節(jié)茄子果實(shí)發(fā)育與著色的轉(zhuǎn)錄組分析
    7.1 材料、試劑與儀器
    7.2 實(shí)驗(yàn)方法
        7.2.1 實(shí)驗(yàn)材料的獲得
        7.2.2 QRT-PCR的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)驗(yàn)證
    7.3 結(jié)果與分析
        7.3.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)分析
        7.3.2 差異表達(dá)基因的篩選
        7.3.3 差異表達(dá)基因的GO功能富集分析
        7.3.4 差異表達(dá)基因的KEGG Pathway顯著性富集分析
        7.3.5 qRT-PCR驗(yàn)證RNA-seq的準(zhǔn)確性
        7.3.6 可能引起SmCIP7 基因沉默株系表型的DEGs分析
    7.4 討論
        7.4.1 可能的涉及花色苷生物合成的DEGs
        7.4.2 可能的涉及的葉綠素合成的DEGs
        7.4.3 可能的涉及細(xì)胞壁合成的DEGs
        7.4.4 可能的涉及的種子發(fā)育的DEGs
        7.4.5 可能的涉及果實(shí)發(fā)育的DEGs
8 結(jié)論與展望
    8.1 主要結(jié)論
    8.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
    A.個(gè)人簡(jiǎn)歷
    B.作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
    C.作者在攻讀碩士學(xué)位期間申請(qǐng)的專利
    D.作者在攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目
    E.作者在攻讀碩士學(xué)位期間獲得的獎(jiǎng)勵(lì)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]茄子紫外光受體蛋白基因SmUVR8的克隆及功能分析[J]. 張君豪,何永軍,周露,劉楊,陳火英.  園藝學(xué)報(bào). 2019(02)
[2]光照對(duì)非光敏型茄子花青素合成相關(guān)基因的影響[J]. 劉衛(wèi),劉楊,任麗,蔣明敏,葛海燕,沈海斌,古在麗,陳火英.  分子植物育種. 2017(03)
[3]“十二五”我國(guó)茄子遺傳育種研究進(jìn)展[J]. 連勇,劉富中,田時(shí)炳,陳鈺輝,張映.  中國(guó)蔬菜. 2017(02)
[4]COP1調(diào)控植物花色苷合成的研究進(jìn)展[J]. 朱婷婷,林玲,楊濤,高帆,劉天宇,潘東明,夏惠.  分子植物育種. 2015(09)
[5]茄子花青素合成中SmTTG1、SmGL3和SmTT8的表達(dá)及其蛋白質(zhì)間的相互作用[J]. 劉新宇,韓洪強(qiáng),葛海燕,蔣明敏,陳火英.  園藝學(xué)報(bào). 2014(11)
[6]茄子花青素合成相關(guān)基因SmMYB的克隆與表達(dá)分析[J]. 邵文婷,劉楊,韓洪強(qiáng),陳火英.  園藝學(xué)報(bào). 2013(03)
[7]植物花青素苷生物合成及調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 高燕會(huì),黃春紅,朱玉球,童再康.  中國(guó)生物工程雜志. 2012(08)
[8]植物MYB轉(zhuǎn)錄因子研究[J]. 劉守梅,孫玉強(qiáng),王慧中.  杭州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(02)
[9]茄子（Solanum melongena L.）葉上表皮紫色花色素苷對(duì)光合機(jī)構(gòu)的保護(hù)效應(yīng)[J]. 薛占軍,高志奎,王梅,鐘傳飛,高榮孚.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2009(03)
[10]植物COP1蛋白的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 陳章權(quán),彭世清,陳守才.  植物學(xué)通報(bào). 2002(05)

博士論文
[1]光信號(hào)誘導(dǎo)茄子花青素合成的分子機(jī)制研究[D]. 蔣明敏.上海交通大學(xué) 2016
[2]紫白菜與紫茄花色苷生物合成及光調(diào)控的分子機(jī)理研究[D]. 張彥杰.重慶大學(xué) 2015

碩士論文
[1]茄子花青素生物合成關(guān)鍵MYB轉(zhuǎn)錄因子的篩選及克隆[D]. 王世界.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]LED光質(zhì)對(duì)茄子生長(zhǎng)發(fā)育及產(chǎn)量、品質(zhì)的影響[D]. 李亞華.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]茄子花青素合成相關(guān)基因SmMYB的克隆與功能研究[D]. 邵文婷.上海交通大學(xué) 2013
[4]茄子花青素生物合成關(guān)鍵基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 李翔.上海交通大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3202914