黃瓜（Cucumis20sativus20L.）是一種以嫩果為食用的大宗蔬菜。黃瓜屬于草本科蔓生植物,在生產(chǎn)中易受多種病原菌的侵染,使其產(chǎn)量和品質(zhì)受到嚴重影響。黃瓜霜霉病和棒孢葉斑病是黃瓜生產(chǎn)上的重要病害。病害傳播流行速度快,對黃瓜生產(chǎn)威脅極大。長期使用化學藥劑進行病害防治,已經(jīng)導致霜霉病菌和棒孢葉斑病菌產(chǎn)生抗藥性。同時大量的農(nóng)藥殘留會造成環(huán)境污染和危害人類健康等問題。綠色、經(jīng)濟有效的防治方法仍為選育及利用抗病品種。培育單一抗病品種已無法解決病害給黃瓜生產(chǎn)帶來的嚴重影響。國內(nèi)外對黃瓜棒孢葉斑病的研究基礎比較薄弱,多集中在病原菌生理分化、抗藥性及抗性遺傳規(guī)律等方面,缺少系統(tǒng)的抗病機理方面的研究。黃瓜霜霉病的研究起步雖早,但抗性遺傳規(guī)律仍存在爭議,分子調(diào)控機理尚不明了。本研究從抗源篩選、組織病理學、轉錄組學和基因功能方面對黃瓜雙抗機制進行了研究,主要結果如下:（1）采用苗期人工接種鑒定法,對50份黃瓜種質(zhì)資源進行霜霉病和棒孢葉斑病抗病性鑒定。結果表明,無高抗霜霉病材料,抗霜霉病材料有11份;高抗棒孢葉斑病材料有9份。通過對50份材料雙抗性比較,抗2種病害材料共有5份,品種編號分別為16號（... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 國內(nèi)外研究進展
        1.1.1 黃瓜霜霉病
        1.1.2 黃瓜棒孢葉斑病
        1.1.3 植物抗病性
        1.1.4 AP2/ERF轉錄因子
    1.2 研究目的與意義
    1.3 研究內(nèi)容與技術路線
        1.3.1 研究內(nèi)容
        1.3.2 技術路線
2 材料與方法
    2.1 抗病性鑒定
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗方法
    2.2 組織病理學觀察
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 試驗方法
    2.3 轉錄組測序
        2.3.1 試驗材料
        2.3.2 試驗方法
    2.4 黃瓜CsERF004功能驗證
        2.4.1 CsERF004基因克隆
        2.4.2 CsERF004序列分析
        2.4.3 病原菌脅迫下CsERF004表達模式的分析
        2.4.4 激素誘導下CsERF004表達模式的分析
        2.4.5 CsERF004亞細胞定位的分析
        2.4.6 黃瓜的遺傳轉化
        2.4.7 轉基因黃瓜的接種鑒定
        2.4.8 轉基因黃瓜的基因表達分析
        2.4.9 轉基因黃瓜的激素含量測定
3 結果與分析
    3.1 抗病性鑒定
        3.1.1 黃瓜霜霉病抗性評價
        3.1.2 黃瓜棒孢葉斑病抗性評價
        3.1.3 黃瓜不同生態(tài)類型雙抗性評價
    3.2 組織病理學觀察
        3.2.1 黃瓜霜霉病組織病理學觀察
        3.2.2 黃瓜棒孢葉斑病組織病理學觀察
        3.2.3 黃瓜霜霉病與棒孢葉斑病組織病理學觀察的比較
    3.3 轉錄組測序分析
        3.3.1 轉錄組測序質(zhì)量評估
        3.3.2 差異表達基因分析
        3.3.3 RNA-Seq數(shù)據(jù)的可靠性驗證
        3.3.4 代謝通路分析
    3.4 黃瓜CsERF004功能驗證
        3.4.1 CsERF004基因克隆
        3.4.2 CsERF004序列分析
        3.4.3 CsERF004啟動子分析
        3.4.4 病原菌脅迫下CsERF004表達模式的分析
        3.4.5 激素誘導下CsERF004表達模式的分析
        3.4.6 CsERF004亞細胞定位的分析
        3.4.7 黃瓜的遺傳轉化
        3.4.8 CsERF004轉基因黃瓜的接種鑒定
        3.4.9 CsERF004轉基因黃瓜的分子及生理分析
4 討論
    4.1 抗病性鑒定
    4.2 組織病理學
        4.2.1 病原菌侵染進程
        4.2.2 過敏性反應抑制病原菌生長
        4.2.3 H_2O_2、木質(zhì)素和胼胝質(zhì)積累
    4.3 病原菌脅迫下差異表達基因的分析
        4.3.1 候選基因的篩選
        4.3.2 顯著富集的代謝通路
    4.4 CsERF004功能分析
        4.4.1 CsERF004表達模式及啟動子分析
        4.4.2 CsERF004與黃瓜抗病性
        4.4.3 CsERF004基因與PR基因
        4.4.4 CsERF004與植物激素
    4.5 本研究的創(chuàng)新與不足之處
        4.5.1 本研究的創(chuàng)新之處
        4.5.2 本研究的不足之處
5 結論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀博士學位期間發(fā)表的學術論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]主要黃瓜種質(zhì)資源抗病性評價[J]. 劉東,辛明,周秀艷,王春華,秦智偉.  東北農(nóng)業(yè)大學學報. 2017(03)
[2]黃瓜霜霉病菌與抗性研究進展[J]. 席亞東,向運佳,韓帥,張河慶,吳婕,李洪浩,劉波微,陳國華.  南方農(nóng)業(yè)學報. 2016(10)
[3]壽光溫室黃瓜主栽品種的更替因子與發(fā)展趨勢[J]. 魏家鵬,劉樹森.  中國蔬菜. 2016(09)
[4]不同黃瓜品種對黃瓜棒孢葉斑病的抗性鑒定[J]. 高葦,王勇,張春祥.  北方園藝. 2016(11)
[5]兼抗棒孢葉斑病和黑斑病黃瓜育種材料篩選[J]. 王惠哲,李淑菊,楊瑞環(huán),鄧強,曹明明.  中國瓜菜. 2016(02)
[6]黃瓜棒孢葉斑病種質(zhì)篩選及抗性分布頻率分析[J]. 李亞莉,侯棟,岳宏忠,張東琴.  中國農(nóng)學通報. 2016(04)
[7]富含半胱氨酸的GASA小分子蛋白研究進展[J]. 鐘春梅,王小菁.  植物學報. 2016(01)
[8]擬南芥轉錄因子bHLH17負調(diào)控茉莉素介導的抗性反應[J]. 王翠麗,田海霞,汪姣姣,齊天從,黃煌,任春梅,謝道昕,宋素勝.  植物學報. 2014(06)
[9]黑龍江省黃瓜棒孢葉斑病發(fā)生情況調(diào)查及病原鑒定[J]. 張艷菊,劉東,馬柏壯,周秀艷,苗笛.  東北農(nóng)業(yè)大學學報. 2014(09)
[10]與黃瓜霜霉病抗性相關基因連鎖的分子標記研究[J]. 孟攀奇,蔡麗靜,張桂華,杜勝利.  長江蔬菜. 2014(08)

博士論文
[1]甘蔗應答黑穗病菌侵染的轉錄組與蛋白組研究及抗性相關基因挖掘[D]. 蘇亞春.福建農(nóng)林大學 2014
[2]黃瓜霜霉病抗性相關基因篩選及過敏性抗病機制[D]. 李建武.華中農(nóng)業(yè)大學 2010
[3]海島棉LRR-TM類抗病基因GbaVd1和GbaVd2的克隆與功能研究[D]. 陳捷胤.中國農(nóng)業(yè)科學院 2010
[4]番茄與白粉菌互作的細胞學和轉錄組學分析[D]. 李成偉.中國農(nóng)業(yè)科學院 2007
[5]黃瓜抗病基因同源序列的克隆及其對霜霉病抗病基因標記的研究[D]. 丁國華.東北農(nóng)業(yè)大學 2004

碩士論文
[1]ERFs參與調(diào)控黃瓜果實貯藏冷害機制研究[D]. 王曉晨.華南農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]玉米轉錄因子基因ZmEREB87的克隆及功能分析[D]. 姚海梅.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2016
[3]番茄鈣調(diào)蛋白和類鈣調(diào)蛋白的抗病調(diào)控功能分析[D]. 劉維.浙江大學 2015
[4]蘋果樹腐爛病菌果膠裂解酶基因功能的初步研究[D]. 朱艷天.西北農(nóng)林科技大學 2014
[5]草莓BAG6基因在植物炭疽病抗性中的作用研究[D]. 張慶雨.西北農(nóng)林科技大學 2014



本文編號：3175940