本研究以普通橄欖’長營’與清橄欖’清欖1號’為試驗材料,通過超高效液相色譜法測定其果實發(fā)育過程中氨基酸含量,并通過多元統(tǒng)計分析方法得出差異氨基酸,研究差異氨基酸相關(guān)酶活性,探討它們之間的相關(guān)性。主要研究結(jié)果如下:1.探索出一種適于橄欖果實游離氨基酸含量測定的方法。通過單因素實驗初篩茚三酮顯色法中的條件,包括pH、顯色劑含量、加熱溫度和加熱時間,并通過穩(wěn)定性、精密性、重復(fù)性和加樣回收試驗進行方法學(xué)驗證。結(jié)果發(fā)現(xiàn),茚三酮顯色法的最佳反應(yīng)條件為:最大吸收波長568 nm、pH 6.6磷酸緩沖液、0.5 mL茚三酮溶液、加熱溫度100 ℃和加熱時間25 min,在30 min內(nèi)OD值改變0.41%,穩(wěn)定性 RSD=0.34%（n=9）、精密性 RSD=0.09%（n=9）、重復(fù)性 RSD=1.80%（n=6）,回收率達100.34%、RSD=2.21%（n=6）。表明茚三酮顯色法測定橄欖果實游離氨基酸含量在此條件下穩(wěn)定且精密性、重復(fù)性和回收率良好,可用于橄欖果實游離氨基酸的快速簡便測定。2.優(yōu)化出橄欖果實游離氨基酸的最佳提取工藝。以橄欖果實為實驗材料,通過單因素試驗、Plackett-Burm... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 氨基酸概述
        1.1 氨基酸分類
        1.2 氨基酸風味
        1.3 氨基酸的作用
    2 氨基酸的提取方法
        2.1 游離氨基酸的提取方法
        2.2 水解氨基酸的提取方法
            2.2.1 酸水解
            2.2.2 堿水解
            2.2.3 酶解法
    3 氨基酸的測定方法
        3.1 分光光度計法
        3.2 色譜法
            3.2.1 氣相色譜法
            3.2.2 液相色譜法
    4 植物中氨基酸的研究
        4.1 橄欖中氨基酸的研究進展
        4.2 其它植物中氨基酸的研究進展
    5 主成分分析概述
    6 本研究的目的與意義
    7 研究內(nèi)容
第二章 橄欖果實游離氨基酸測定方法優(yōu)化
    1 材料與方法
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 方法
            1.3.1 橄欖果實游離氨基酸溶液的提取
            1.3.2 試劑配制
            1.3.3 茚三酮顯色法
            1.3.4 橄欖果實游離氨基酸測定的單因素試驗
            1.3.5 亮氨酸標準品標準曲線的制作
            1.3.6 茚三酮顯色法橄欖果實游離氨基酸的方法學(xué)驗證
            1.3.7 橄欖果實游離氨基酸含量的測定與計算
            1.3.8 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 影響橄欖果實游離氨基酸測定的單因素試驗
            2.1.1 最大波長的選擇
            2.1.2 pH值的選擇
            2.1.3 顯色劑用量的選擇
            2.1.4 加熱溫度的選擇
            2.1.5 加熱時間的選擇
        2.2 茚三酮顯色法橄欖果實游離氨基酸的方法學(xué)驗證
            2.2.1 穩(wěn)定性試驗
            2.2.2 精密性試驗
            2.2.3 重復(fù)性試驗
            2.2.4 加樣回收試驗
    3 討論
    4 結(jié)論
第三章 響應(yīng)面試驗優(yōu)化超聲法提取橄欖果實游離氨基酸工藝
    1 材料與方法
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 方法
            1.3.1 橄欖果實游離氨基酸的制備
            1.3.2 亮氨酸溶液標準曲線的繪制
            1.3.3 橄欖果實游離氨基酸提取量的測定與計算
            1.3.4 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的單因素試驗
            1.3.5 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的Plackett-Burman試驗
            1.3.6 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的最陡爬坡試驗
            1.3.7 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的響應(yīng)面試驗設(shè)計
            1.3.8 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的單因素試驗
            2.1.1 超聲溫度對游離氨基酸提取量的影響
            2.1.2 超聲功率對游離氨基酸提取量的影響
            2.1.3 超聲時間對游離氨基酸提取量的影響
            2.1.4 料液比對游離氨基酸提取量的影響
            2.1.5 乙醇濃度對游離氨基酸提取量的影響
            2.1.6 提取次數(shù)對游離氨基酸提取量的影響
        2.2 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的PB試驗
        2.3 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的最陡爬坡試驗
        2.4 超聲法提取橄欖果實游離氨基酸的響應(yīng)面試驗
            2.4.1 Box-Behnken試驗設(shè)計結(jié)果及方差分析
            2.4.2 響應(yīng)面分析
            2.4.3 最佳工藝的確定與驗證實驗
    3 討論
    4 結(jié)論
第四章 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法定量分析橄欖果實氨基酸成分
    1 材料與方法
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 方法
            1.3.1 果實若干品質(zhì)的測定
            1.3.2 標準樣品的制備
            1.3.3 橄欖果實粉末的制備
            1.3.4 橄欖果實水解氨基酸樣品的提取
            1.3.5 橄欖果實游離氨基酸樣品的提取
            1.3.6 色譜條件
            1.3.7 質(zhì)譜條件
            1.3.8 氨基酸評價指標計算方法
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 橄欖果實發(fā)育過程若干品質(zhì)的比較
            2.1.1 單果重
            2.1.2 含水率
            2.1.3 縱橫徑、厚度和果形指數(shù)
        2.2 氨基酸檢測數(shù)據(jù)的線性關(guān)系、檢測限和定量限
        2.3 橄欖果實水解氨基酸組分與含量
            2.3.1 橄欖果實各發(fā)育時期水解氨基酸含量和組成的變化
            2.3.2 必需氨基酸與FAO/WHO推薦的氨基酸模式譜的比較
            2.3.3 氨基酸比值系數(shù)法對橄欖果實各發(fā)育時期蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的評價
        2.4 橄欖果實游離氨基酸組分與含量
            2.4.1 橄欖果實各發(fā)育時期游離氨基酸含量和組成
            2.4.2 橄欖果實不同時期游離氨基酸RCT值
    3 討論
第五章 普通橄欖和清橄欖果實游離氨基酸差異成分及其相關(guān)酶活性研究
    1 材料與方法
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 方法
            1.3.1 標準樣品的制備
            1.3.2 橄欖粉末的制備
            1.3.3 橄欖果實游離氨基酸樣品的提取
            1.3.4 色譜條件
            1.3.5 質(zhì)譜條件
            1.3.6 谷氨酰胺代謝相關(guān)酶活性測定
            1.3.7 蔗糖、可溶性糖和還原糖含量測定
            1.3.8 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 橄欖果實游離氨基酸的主成分分析
        2.2 橄欖果實游離氨基酸的偏最小二乘投影判別分析
        2.3 普通橄欖和清橄欖果實差異氨基酸含量比較
        2.4 普通橄欖和清橄欖果實谷氨酰胺及其代謝相關(guān)酶活性變化
            2.4.1 谷氨酰胺代謝相關(guān)酶酶活變化
            2.4.2 谷氨酰胺與其代謝相關(guān)酶活性相關(guān)性分析
        2.5 普通橄欖和清橄欖果實谷氨酰胺與蔗糖、可溶性糖和還原糖含量變化
            2.5.1 蔗糖、可溶性糖和還原糖含量變化
            2.5.2 谷氨酰胺與蔗糖、可溶性糖和還原糖含量相關(guān)性分析
    3 討論
第六章 結(jié)論與展望
    1 結(jié)論
    2 展望
    3 創(chuàng)新點
參考文獻
附錄A '長營'與'清欖1號'花后30 d~190 d果實
附錄B 標準品譜圖
碩士學(xué)習(xí)期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]響應(yīng)面法對3,5-二硝基水楊酸比色法測定水果中還原糖含量條件的優(yōu)化[J]. 李志霞,聶繼云,閆震,李靜,匡立學(xué),沈友明.  分析測試學(xué)報. 2016(10)
[3]不同保存方法對秋石斛葉片抗寒生理指標的影響[J]. 何嘉琦,張東雪,尹俊梅,陸順教.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(09)
[4]萱草修復(fù)石油烴污染土壤的根際機制和根系代謝組學(xué)分析[J]. 王亞男,程立娟,周啟星.  環(huán)境科學(xué). 2016(05)
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[6]南五味子中氨基酸類成分分析評價[J]. 楊文潮,楊潔,段金廒,錢大瑋,朱振華,唐志書.  中藥材. 2016(02)
[7]套袋對‘庫爾勒香梨’果實中游離脂肪酸和游離氨基酸含量的影響[J]. 何子順,李芳芳,張紹鈴,白茹,張虎平.  果樹學(xué)報. 2016(07)
[8]山茶屬3種植物花藥超低溫保存研究[J]. 常維霞,姚小華,龍偉.  中國油料作物學(xué)報. 2016(01)
[9]低溫保存對4種作物種子ATP含量與種子活力的影響[J]. 段乃彬,李群,田茜,戴雙,張文蘭.  山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(02)
[10]高效液相色譜法測定桂花葉片中游離氨基酸濃度[J]. 高肖飛,肖化云,張忠義,鄭能建.  地球與環(huán)境. 2016(01)

博士論文
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碩士論文
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[2]橄欖（Canarium album（Lour.）Raeusch）果實成熟發(fā)育蔗糖代謝變化研究[D]. 李澤坤.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[3]植物葉片中游離氨基酸的測定及其對大氣氮沉降的響應(yīng)[D]. 高肖飛.南昌大學(xué) 2015
[4]山野菜發(fā)酵過程中乳酸菌群和風味物質(zhì)的變化及其發(fā)酵調(diào)節(jié)技術(shù)研究[D]. 張婷.寧夏大學(xué) 2015
[5]鹿藥游離氨基酸的提取及在化妝品中的應(yīng)用[D]. 朱玉婷.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]橄欖（Canarium album（Lour.）Raeusch.）果實發(fā)育成熟過程多酚及相關(guān)酶活性研究[D]. 謝倩.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[7]液相色譜及液質(zhì)聯(lián)用法測定三種山西特色食品中游離氨基酸[D]. 車蘭蘭.山西大學(xué) 2013
[8]福建橄欖（Canarium album（Lour.）Raeusch.）若干功能成分和品質(zhì)相關(guān)指標的研究[D]. 林玉芳.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[9]大腸桿菌BL21（DE3）氨基葡萄糖代謝調(diào)控關(guān)鍵酶的初步研究[D]. 涂宇鵬.復(fù)旦大學(xué) 2011
[10]響應(yīng)面法在生物過程優(yōu)化中的應(yīng)用[D]. 黃新仁.湖南大學(xué) 2011



本文編號：3172338