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蘋果屬植物山奈素苷的鑒定及其對花粉管伸長和種子數(shù)量的影響

發(fā)布時間:2021-04-26 20:15
  蘋果(Malus)是一類重要的栽培果樹,其含有的類黃酮化合物不僅影響花果色澤,也參與調(diào)控了植物生長發(fā)育和對逆境脅迫的抵御。本研究利用不同花色基因型的蘋果屬植物,在分離鑒定出3種山奈素苷化合物的基礎(chǔ)上,分析了花中類黃酮含量與果實種子數(shù)量之間的關(guān)系、不同類黃酮化合物之間的競爭合成及調(diào)控機制,以及山奈素苷對種子數(shù)量的影響機制,進一步豐富了蘋果屬植物類黃酮代謝的生物學(xué)功能。主要結(jié)果如下:1. 蘋果屬植物花不同組織中山奈素苷與花色苷含量呈負相關(guān),與果實種子數(shù)量呈正相關(guān)。通過多種色譜手段,從蘋果屬花瓣分離純化出3個山奈素苷化合物,經(jīng)過液相-質(zhì)譜聯(lián)用和核磁共振鑒定,3個化合物分別為:山奈素-3-木糖苷(kaempferol3-O-β-xylopyranoside)、山奈素-3-阿拉伯糖苷(kaempferol 3-O-α-arabinofuranoside)和山奈素-3-鼠李糖苷(kaempferol 3-O-α-rhamnopyranoside)。通過分析14個基因型蘋果屬植物不同組織器官發(fā)現(xiàn),山奈素苷主要在花中積累,在葉片和果實中含量極低。并且,白花基因型花瓣、雌蕊和雄蕊中積累相對更多的山奈素苷... 

【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:108 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 類黃酮的種類
    1.2 類黃酮的分離、純化和鑒定
    1.3 類黃酮的生物合成
    1.4 類黃酮的生物學(xué)功能
        1.4.1 類黃酮與植物逆境脅迫
        1.4.2 類黃酮與植物花色
        1.4.3 類黃酮與植物繁殖
    1.5 花粉管的伸長機制
    1.6 花粉與種子數(shù)量
    1.7 本研究的目的和意義
第二章 蘋果屬植物中類黃酮含量和種子數(shù)量關(guān)聯(lián)性分析
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 試驗主要試劑
        2.2.3 實驗主要儀器
    2.3 試驗方法
        2.3.1 蘋果屬植物種子數(shù)量統(tǒng)計
        2.3.2 蘋果屬植物花瓣中類黃酮含量分析
        2.3.3 蘋果屬植物類黃酮化合物的分離和純化
        2.3.4 蘋果屬植物中山奈素苷鑒定
        2.3.5 蘋果屬植物不同組織部位類黃酮含量分析
    2.4 結(jié)果分析
        2.4.1 蘋果屬植物花色和種子數(shù)量關(guān)聯(lián)性
        2.4.2 轉(zhuǎn)基因蘋果花色和種子數(shù)量關(guān)聯(lián)性
        2.4.3 蘋果屬植物花色與類黃酮化合物的關(guān)系
        2.4.4 蘋果屬植物山奈素苷分離鑒定
        2.4.5 蘋果屬植物不同組織部位類黃酮含量
        2.4.6 蘋果屬植物花色苷和山奈素苷含量與種子數(shù)量相關(guān)性
    2.5 討論
第三章 蘋果屬植物花色苷和山奈素苷競爭合成的調(diào)控機制
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 試驗材料
        3.2.2 試驗主要試劑
        3.2.3 實驗主要儀器
    3.3 試驗方法
        3.3.1 RNA提取和cDNA反轉(zhuǎn)錄合成
        3.3.2 蘋果屬植物類黃酮代謝通路相關(guān)基因定量表達分析
        3.3.3 F3’H的進化樹構(gòu)建和序列比對
        3.3.4 基因克隆和轉(zhuǎn)基因載體構(gòu)建
        3.3.5 蘋果和擬南芥中目標(biāo)基因的遺傳轉(zhuǎn)化和驗證
        3.3.6 轉(zhuǎn)基因蘋果和轉(zhuǎn)基因擬南芥類黃酮含量分析
    3.4 結(jié)果分析
        3.4.1 蘋果屬植物花色苷和山奈素苷合成相關(guān)基因在不同組織表達情況
        3.4.2 F3’H和其它物種親緣進化分析
        3.4.3 MdMYB10過表達轉(zhuǎn)基因蘋果表型和基因表達分析
        3.4.4 Md F3’HIIRNAi轉(zhuǎn)基因蘋果鑒定
        3.4.5 Md F3’HIIRNAi轉(zhuǎn)基因蘋果表型和基因表達分析
        3.4.6 Md F3’HII過表達轉(zhuǎn)基因擬南芥類黃酮含量分析
    3.5 討論
第四章 蘋果屬植物山奈素苷對種子數(shù)量的影響機制
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 試驗材料
        4.2.2 試驗主要試劑
        4.2.3 實驗主要儀器
    4.3 試驗方法
        4.3.1 MdMYB10過表達轉(zhuǎn)基因蘋果花粉管伸長的體內(nèi)觀察
        4.3.2 類黃酮外施處理花粉管
        4.3.3 類黃酮外施處理蘋果屬植物柱頭
        4.3.4 轉(zhuǎn)基因擬南芥種子數(shù)量分析
        4.3.5 蘋果屬植物花粉類黃酮含量分析
        4.3.6 蘋果屬植物花粉活力分析
        4.3.7 山奈素-3-鼠李糖苷處理花粉管伸長的轉(zhuǎn)錄組分析及q RT-PCR定量驗證
2+熒光分析">        4.3.8 山奈素-3-鼠李糖苷處理花粉管Ca2+熒光分析
    4.4 結(jié)果分析
        4.4.1 蘋果過表達MdMYB10對花粉管伸長的影響
        4.4.2 類黃酮對蘋果屬植物花粉管伸長的影響
        4.4.3 類黃酮對蘋果屬果實種子數(shù)量的影響
        4.4.4 擬南芥過表達Md F3’HII對種子數(shù)量的影響
        4.4.5 蘋果屬植物花粉中類黃酮含量分析
        4.4.6 蘋果屬植物不同花色基因型花粉活力分析
        4.4.7 山奈素-3-鼠李糖苷對蘋果花粉管伸長相關(guān)基因表達的影響
2+的影響">        4.4.8 山奈素-3-鼠李糖苷對蘋果花粉管Ca2+的影響
    4.5 討論
第五章 結(jié)論和創(chuàng)新點
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點
附錄
參考文獻
致謝
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]果樹育種40年回顧與展望[J]. 鄧秀新,王力榮,李紹華,張紹鈴,張志宏,叢佩華,易干軍,陳學(xué)森,陳厚彬,鐘彩虹.  果樹學(xué)報. 2019(04)
[2]果樹學(xué)科百年發(fā)展回顧[J]. 鄧秀新,束懷瑞,郝玉金,徐強,韓明玉,張紹鈴,段常青,姜全,易干軍,陳厚彬.  農(nóng)學(xué)學(xué)報. 2018(01)
[3]黃酮類化合物的提取·分離純化和含量測定方法的研究進展[J]. 郭雪峰,岳永德.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(26)



本文編號:3162049

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