果實(shí)中糖分的含量、組分及其比例是決定果實(shí)甜度及風(fēng)味品質(zhì)的關(guān)鍵因素,不同品種梨果實(shí)中積累的糖分種類和糖分的積累特點(diǎn)存在差異。糖在果實(shí)內(nèi)的積累和分配是決定果實(shí)品質(zhì)的最重要因素,梨葉片光合作用產(chǎn)生的碳水化合物以山梨醇和蔗糖的形態(tài)運(yùn)輸?shù)綆炱鞴俟麑?shí)中,這一長距離的運(yùn)載需要經(jīng)過糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),而后卸載進(jìn)入果實(shí)中,果實(shí)中的糖在相關(guān)酶的作用下進(jìn)行代謝轉(zhuǎn)化,最終以各種糖分的形式貯存在果實(shí)中。然而,目前國內(nèi)外對梨果實(shí)發(fā)育過程中糖的轉(zhuǎn)運(yùn)與其轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的研究相對有限。因此,本文選用低蔗糖積累型的’鴨梨’（Pyrus bretschneideri Rehd.cv.’Yali’）和高蔗糖積累型的’豐水’（Pyrus pyrifolia Nakai.cv.’Hosui’）為材料,開展了果實(shí)發(fā)育過程中葉片和果實(shí)中糖分含量變化及其相關(guān)性研究;梨果實(shí)中蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的克隆和功能分析、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的克隆和功能分析、山梨醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的克隆與表達(dá)特性分析和套袋對糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)特性的影響等內(nèi)容的研究,探討了梨果實(shí)糖分積累的源庫關(guān)系和梨果實(shí)的糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因功能,為闡明梨果實(shí)糖分轉(zhuǎn)運(yùn)與積累的分子機(jī)理和果實(shí)品質(zhì)的基因改良... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：137 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 梨果實(shí)內(nèi)糖分積累的特性及調(diào)控
        1.1 果實(shí)內(nèi)糖的卸載途徑
        1.2 果實(shí)中糖分積累的特性
        1.3 果實(shí)糖分積累的調(diào)控
            1.3.1 環(huán)境因子調(diào)控梨果實(shí)內(nèi)糖分的含量
            1.3.2 栽培措施調(diào)控梨果實(shí)糖分的含量
    2 植物糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其功能
        2.1 蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其功能
            2.1.1 蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因家族
            2.1.2 蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的亞細(xì)胞定位
            2.1.3 蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的功能及其調(diào)控
        2.2 單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其功能
            2.2.1 單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因
            2.2.2 單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的功能
        2.3 山梨醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其功能
第二章 梨糖分積累的庫和源關(guān)系及果實(shí)內(nèi)糖的代謝變化
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 果實(shí)相對生長速率的測定
        1.3 可溶性糖的提取和測定
        1.4 蔗糖代謝相關(guān)酶的提取和活性測定
            1.4.1 蔗糖代謝相關(guān)酶的提取
            1.4.2 酶活性的測定
            1.4.3 果實(shí)蛋白質(zhì)含量的測定
            1.4.4 酶活性計(jì)算
        1.5 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 '鴨梨'和'豐水'果實(shí)鮮重和相對生長速率的變化
        2.2 '鴨梨'果實(shí)和葉片中可溶性糖含量的變化
        2.3 '豐水'梨果實(shí)和葉片中可溶性糖含量的變化
        2.4 葉片、新梢韌皮部和果實(shí)的可溶性糖含量
        2.5 果實(shí)和葉片中可溶性糖的相關(guān)關(guān)系
        2.6 蔗糖代謝相關(guān)酶的活性變化
        2.7 果實(shí)蔗糖含量與蔗糖代謝酶活性的相關(guān)性分析
    3 討論
        3.1 梨糖分含量的庫和源的相關(guān)性
        3.2 蔗糖積累與相關(guān)代謝酶活性
第三章 梨蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PbSUT2基因的克隆和功能研究
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 PbSUT2基因的克隆
            1.2.1 試驗(yàn)試劑
            1.2.2 PbSUT2基因全長序列的克隆
            1.2.3 序列分析
        1.3 PbSUT2基因的表達(dá)分析
        1.4 PbSUT2基因的亞細(xì)胞定位
        1.5 PbSUT2基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.6 番茄Micro-Tom的遺傳轉(zhuǎn)化
            1.6.1 番茄無菌苗和重組根癌農(nóng)桿菌的培養(yǎng)
            1.6.2 轉(zhuǎn)化
            1.6.3 抗性材料的篩選和培養(yǎng)
            1.6.4 生根培養(yǎng)
            1.6.5 植株移栽
        1.7 轉(zhuǎn)基因番茄的分子檢測
        1.8 轉(zhuǎn)基因番茄植株中PbSUT2基因表達(dá)分析
        1.9 轉(zhuǎn)基因番茄植株的生長發(fā)育的形態(tài)與生理鑒定
            1.9.1 轉(zhuǎn)基因植株的生長形態(tài)觀察
            1.9.2 葉片凈光合速率的測定
            1.9.3 番茄果實(shí)中可溶性糖含量的測定
        1.10 統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 PbSUT2基因的克隆及生物信息學(xué)分析
        2.2 PbSUT2基因在梨果實(shí)發(fā)育過程中的表達(dá)量分析
        2.3 PbSUT2的亞細(xì)胞定位
        2.4 PbSUT2基因的功能分析
            2.4.1 PbSUT2基因表達(dá)載體構(gòu)建
            2.4.2 番茄Micro-Tom遺傳轉(zhuǎn)化
            2.4.3 PbSUT2基因的功能鑒定
    3 討論
        3.1 PbSUT2定位于細(xì)胞質(zhì)膜
        3.2 PbSUT2基因影響果實(shí)糖分的含量
        3.3 超量表達(dá)PbSUT2導(dǎo)致植株早花
第四章 梨已糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因PbHT1的克隆和功能研究
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 PbHT1基因的克隆
            1.2.1 試驗(yàn)試劑
            1.2.2 PbHT1基因全長序列的克隆
            1.2.3 序列分析
        1.3 PbHT1基因的表達(dá)分析
        1.4 PbHT1基因的亞細(xì)胞定位
        1.5 PbHT1植物表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.6 番茄Micro-Tom的遺傳轉(zhuǎn)化
        1.7 轉(zhuǎn)基因番茄的分子檢測
        1.8 轉(zhuǎn)基因番茄植株中PbHT1基因表達(dá)分析
        1.9 轉(zhuǎn)基因番茄植株的生長發(fā)育的形態(tài)與生理鑒定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 PbHT1基因的克隆及生物信息學(xué)分析
        2.2 PbHT1基因在梨果實(shí)發(fā)育過程中的表達(dá)量分析
        2.3 PbHT1的亞細(xì)胞定位
        2.4 PbHT1基因的功能分析
            2.4.1 PbHT1基因表達(dá)載體構(gòu)建
            2.4.2 番茄Micro-Tom遺傳轉(zhuǎn)化
            2.4.3 轉(zhuǎn)基因株系的分子鑒定
            2.4.4 PbHT1基因的功能鑒定
    3 討論
        3.1 PbHT1為定位于質(zhì)膜的梨己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因
        3.2 梨果實(shí)中己糖的積累與PbHT1基因表達(dá)的相關(guān)性
        3.3 PbHT1基因促進(jìn)番茄果實(shí)己糖的轉(zhuǎn)運(yùn)與積累
第五章 梨山梨醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因PbSOT2的克隆與表達(dá)分析
    1 材料與方法
        1.1 植物材料
        1.2 RNA的提取與cDNA的合成
        1.3 山梨醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因PbSOT2的克隆
        1.4 系統(tǒng)發(fā)育與序列分析
        1.5 PbSOT2基因的亞細(xì)胞定位
        1.6 熒光定量PCR分析PbSOT2的表達(dá)量
        1.7 山梨醇代謝酶的提取和活性測定
        1.8 統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 PbSOT2基因的克隆和生物信息學(xué)分析
        2.2 PbSOT2的亞細(xì)胞定位
        2.3 PbSOT2基因在梨果實(shí)發(fā)育過程中的表達(dá)模式
        2.4 '鴨梨'果實(shí)發(fā)育過程中山梨醇代謝相關(guān)酶活性變化
    3 討論
        3.1 PbSOT2基因?qū)儆谥饕谆映易澹∕FS）成員
        3.2 GFP熒光蛋白表達(dá)與PbSOT2亞細(xì)胞定位
        3.3 PbSOT2基因的表達(dá)與果實(shí)中山梨醇的含量
第六章 套袋對梨果實(shí)中糖分含量與糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因表達(dá)量的影響
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 果實(shí)中可溶性糖含量的測定
            1.2.2 RNA提取與反轉(zhuǎn)錄
            1.2.3 果實(shí)糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因PbSUT2、PbHT1和PbSOT2的表達(dá)量分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 套袋對梨果實(shí)中糖分含量的影響
        2.2 套袋對梨果實(shí)發(fā)育過程中的PbSUT2基因表達(dá)量的影響
        2.3 套袋對梨果實(shí)發(fā)育過程中的PbHT1基因表達(dá)量的影響
        2.4 套袋對梨果實(shí)發(fā)育過程中的PbSOT2基因表達(dá)量的影響
    3 討論
        3.1 套袋改變梨果實(shí)中糖分的含量
        3.2 套袋對糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因表達(dá)的調(diào)控
全文結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表（待發(fā)表）的論文及成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]‘鴨梨’ב京白梨’雜交后代果實(shí)可溶性糖積累差異以及相關(guān)酶活性研究[J]. 楊志軍,樂文全,張紹鈴,姚改芳,張虎平,馬翠云,吳俊.  園藝學(xué)報(bào). 2012(06)
[2]套袋對梨果實(shí)發(fā)育過程中糖組分及其相關(guān)酶活性的影響[J]. 柯凡君,張虎平,陶書田,張紹鈴.  西北植物學(xué)報(bào). 2011(07)
[3]A Transgenic Study on Affecting Potato Tuber Yield by Expressing the Rice Sucrose Transporter Genes OsSUT5Z and OsSUT2M[J]. Pieter B.F.Ouwerkerk.  Journal of Integrative Plant Biology. 2011(07)
[4]不同采收期對南果梨果實(shí)糖酸含量的影響[J]. 于年文,李俊才,王家珍,蔡忠民,沙守峰,李宏軍.  北方園藝. 2010(23)
[5]不同果袋對鴨梨果實(shí)品質(zhì)的影響[J]. 王宏偉,徐穎,王少敏,魏樹偉,曹永.  山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(11)
[6]豐水梨不同施氮量對果實(shí)品質(zhì)形成及葉片生理特性的影響[J]. 陳磊,伍濤,張紹鈴,姚改芳,陶書田,賈兵,苗永春,曹慧蓮.  果樹學(xué)報(bào). 2010(06)
[7]不同栽培種梨果實(shí)中可溶性糖組分及含量特征[J]. 姚改芳,張紹鈴,曹玉芬,劉軍,吳俊,袁江,張虎平,肖長城.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(20)
[8]梨花序不同序位坐果對果實(shí)發(fā)育及品質(zhì)的影響[J]. 王鑫,伍濤,陶書田,席東,孫繼亮,張紹鈴.  西北植物學(xué)報(bào). 2010(09)
[9]套袋對翠冠梨果實(shí)外觀色澤及糖、酸含量的影響[J]. 盛寶龍,藺經(jīng),程進(jìn),楊青松,李曉剛,李慧,王中華,付蓉.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(04)
[10]氨基酸液肥對滿天紅梨品質(zhì)及產(chǎn)量的影響[J]. 周瑞金,張傳來,金新富,劉建國.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(03)

博士論文
[1]枳抗逆基因的克隆及功能鑒定[D]. 黃小三.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]砂梨品種資源糖酸及石細(xì)胞含量特點(diǎn)的研究[D]. 霍月青.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3154014