蘭花（Cymbidium spp.）清幽脫俗極具觀賞價值和收藏價值,近年來,隨著社會的進步,蘭花越來越受到人們的重視,同時,蘭花也是是廣東順德等地的高效創(chuàng)匯產(chǎn)業(yè)。但是,病毒病嚴重危害著蘭花產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。蘭花病毒病可造成蘭花花葉、壞死以及花朵變色和畸形,嚴重影響其品質(zhì),其中建蘭花葉病毒（Cymbidium mosaic virus,CymMV）是造成蘭花經(jīng)濟損失的主要病毒之一。本研究獲得了三個建蘭花葉病毒分離物,分別標記為Cym MV-GDFS1、Cym MV-GDFS2、Cym MV-GDFS3。三個分離物基因組全長序列分別由6227、6222、6224個堿基組成,各包含5個開放閱讀框,分別為4254bp的RdRp、702bp的TGB1、339bp的TGB2、276bp的TGB3、以及672bp的CP基因。對這三個分離物的的全基因組核苷酸序列相似性進行分析,結(jié)果表明CymMV-GDFS1與Cym MV-GDFS2相似性最低為98.1%,Cym MV-GDFS2與CymMV-GDFS3相似性為98.5%,CymMV-GDFS1與Cym MV-GDFS3相似性最高為99.3%。與已報導(dǎo)的其它... 

【文章來源】：華南農(nóng)業(yè)大學廣東省

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

質(zhì)粒pCAMBIA-CymMV的構(gòu)建示意圖

樣品有目的條帶并且都是采集自佛山的樣品，后續(xù)實驗就以這三個樣品為實別標為 CymMV-GDFS1、CymMV-GDFS2、CymMV-GDFS3。分別用引物 CYⅠ-R，CYⅡ-F/CYⅡ-R 對這 3 份提取的總 RNA 進行 RT-PCR 擴增。擴增產(chǎn)物在脂糖凝膠上電泳后，可以分別觀察到 2381 bp 和 4039 bp 的目的條帶如圖 2 所

大腸桿菌 JM109。重組質(zhì)粒分別進行 RCR 及雙酶切鑒定。內(nèi)切酶 KpnⅠ和 BamHⅠ分別酶切 pMD19T -Ⅰ，內(nèi)切酶 SacⅠ和 BamHⅠ分別酶切 pMD19T -Ⅱ，雙酶切電泳后可以分別觀察到目的條帶如圖3所示，3A中分別得到了2300 bp的目的條帶與2700 bp

【參考文獻】：
期刊論文
[1]建蘭花葉病毒貴州分離物的分子鑒定[J]. 李欲軻,洪鯤,張宇斌,乙引,萬晴姣.  植物檢疫. 2014(05)
[2]蘭花病毒病的診斷與防治[J]. 王婷婷.  黑龍江科技信息. 2013(19)
[3]建蘭花葉病毒南京分離物基因組測定與侵染性克隆構(gòu)建[J]. 張昌偉,王靜靜,言燕華,韋武青,馬志虎,侯喜林.  南京農(nóng)業(yè)大學學報. 2013(04)
[4]花卉已成為我國出口農(nóng)產(chǎn)品中一枝獨秀的朝陽產(chǎn)業(yè)[J]. 曠野.  中國花卉園藝. 2011(13)
[5]廣東蘭花兩種主要病毒的檢測[J]. 吳竹妍,黎園,何曉盈,童詩涵,孫輝,向梅梅,饒雪琴.  廣東農(nóng)業(yè)科學. 2011(11)
[6]環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)檢測建蘭花葉病毒[J]. 許春英,李逢慧,羅超.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2009(08)
[7]建蘭花葉病毒及齒蘭環(huán)斑病毒的檢測方法(綜述)[J]. 劉沛然,王四清.  熱帶作物學報. 2009(01)
[8]蘭花的食用和藥用價值[J]. 余誠.  花木盆景(花卉園藝). 2006(09)
[9]建蘭花葉病毒檢測標準方法的建立[J]. 楊翠云,于翠,鄭建中,陶庭典,王壽南,顧勁翊,趙惠玲.  上海交通大學學報(農(nóng)業(yè)科學版). 2006(03)
[10]建蘭花葉病毒廈門分離物的提純及RT-PCR檢測[J]. 明艷林,鄭國華.  植物保護. 2006(01)



本文編號：3141725