為了更好地開展萱草屬植物雜交育種研究,摸清其染色體數(shù)目和形態(tài)特征,本試驗對所收集的萱草屬（Hemerocallisspp.）植物種質(zhì)資源進行倍性鑒定與核型分析。結(jié)合染色體制片技術(shù)、流式細胞術(shù)及核型分析手段,對萱草屬植物種質(zhì)資源的染色體倍性、結(jié)構(gòu)特征進行了分析,為今后我國萱草屬植物細胞學(xué)遺傳研究奠定了基礎(chǔ)。（1）以‘茄子 1 號’（H0003 Hemerocallis‘Qiezi 1’,2n=2x=22）根尖為材料,分析了8—羥基喹啉溶液預(yù)處理溫度與預(yù)處理時間、解離時間、解離后蒸餾水浸泡時間等因素對制片效果的影響,構(gòu)建了萱草屬植物染色體制片技術(shù)優(yōu)化體系。結(jié)果表明,0.002 mol/L 8—羥基喹啉溶液最適預(yù)處理溫度和時間分別為4℃和4～6h;1 mol/LHCl的最適解離時間為7～8min,解離后蒸餾水最適浸泡時間為10min,在此條件下染色體制片效果最佳。（2）本試驗對所收集的82份萱草屬材料進行了倍性鑒定。其中66份材料采用優(yōu)化后的根尖染色體制片技術(shù)進行鑒定,發(fā)現(xiàn)‘子花’（H0002）等53份材料為二倍體（2n=2x=22）,‘宿遷1號’（H0001）等10份材料為三倍體（2n=3... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－３解離后蒸餾水不同浸泡時間后根尖染色體制片效果??

２．３不同解離時間的結(jié)果??不一樣的萱草屬植物解離的最適時間也不相同［５｜］。試驗結(jié)果表明，解離時間分別為??７ｍｉｎ、８ｍｉｎ時，染色體數(shù)目清晰（圖２－２－Ａ、圖２－２－Ｂ）；解離９ｍｉｎ時，染色體出現(xiàn)拖尾??現(xiàn)象（圖２－２－Ｃ）；解離ｌＯｍｉｎ時，染色不深，細胞分散，但是也有拖尾現(xiàn)象（圖２－２－Ｄ）；??解離ｌｌｍｉｎ時，細胞出現(xiàn)碎裂現(xiàn)象（圖２－２－Ｅ）。??，：ｆｒ?■??Ａ?，ｃ?，ｐｒ?ｒ?丨，Ｅ??Ａ：?７ｍｉｎ；?Ｂ：?８ｍｉｎ；?Ｃ：?９ｍｉｎ；?Ｄ：?ｌＯｍｉｎ；?Ｅ：?ｌｌｍｉｎ??圖２－２不同解離時間的染色體制片效果??Ｆｉｇ２－２．?Ｔｈｅ?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ?ｔｉｍｅｓ??２．４解離后蒸餾水不同浸泡時間對制片效果的影響??試驗結(jié)果表明，解離完之后，不使用蒸餾水對根尖浸泡，根尖上殘留ＨＣ１溶液，染??色劑不易上色，染色效果差（圖２－３－Ａ）；浸泡５ｍｉｎ時，細胞間間隔較小，導(dǎo)致染色體分??散不足

２．２利用流式細胞術(shù)鑒定的結(jié)果??ＤＮＡ含量與細胞數(shù)目相關(guān)，其中Ｇ１期的ＤＮＡ含量可間接反映該細胞的倍性水平［７］。??以Ｈ０００６?（２ｎ＝２ｘ＝２２）為對照材料，其Ｇ１期的熒光值處于４８．４５處（圖３－２－Ａ），以此檢??測其他材料的倍性。利用流式細胞術(shù)鑒定不同品種萱草屬植物倍性，二倍體的Ｇ１期峰??值在４８．５４附近，三倍體的Ｇ１期峰值在７２．６７５附近，四倍體的Ｇ１期峰值在９６．９附近（圖??３－２），分別對應(yīng)圖３－２中的圖３－２－Ｂ、圖３－２－Ｃ、圖３－２－Ｄ。在鑒定相同倍性的樣品時，熒??光值會有微小差別，但不影響倍性判斷。結(jié)果表明，Ｈ０００７、Ｈ００１６等１３個品種和‘大??同金針’倍性相同，為二倍體（２ｎ＝２ｘ＝２２）；?Ｈ００１５、Ｈ００２４等４個品種為三倍體??（２ｎ＝３ｘ＝３３）；?Ｈ００３３、Ｈ００５６等８個品種為四倍體（２ｎ＝４ｘ＝４４）（表３－３）。??］?Ｉｎ??§－?１?二??＇?Ａ?．?：?Ｂ??１－??細｜？－?“」??胞?Ｊ?：?Ｉ１＇??數(shù)：?妄」??：?Ｍ?Ｉ??°?產(chǎn)、－ｊ?ｒ?１１?Ｉ?＂Ｉ?Ｉ?ｉ｜?ｉ?ｉ?ｉ?°?．廣丨－（ｉ?ｉ?丨－ｒ?ｉ?ｉ?ｉ￣｜??０?５０?１００?１５０?Ｃ?５０?１００?１５０?２００?２５０??ＦＬ２－Ａ?ＦＬ２－Ａ??２２??

【參考文獻】：
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本文編號：3107480