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草地早熟禾花發(fā)育相關(guān)基因PpCHS1與PpSPL4的克隆和功能分析

發(fā)布時間:2021-03-29 06:20
  本試驗分析空間誘變草地早熟禾(Poapratensis L.)矮化突變體A16轉(zhuǎn)錄組發(fā)現(xiàn)萜類生物合成、植物激素代謝以及次級代謝產(chǎn)物相關(guān)通路上的基因轉(zhuǎn)錄水平與野生型差異顯著,其中類黃酮物質(zhì)合成關(guān)鍵基因CHS基因家族6個基因都發(fā)生變化,以PpCHS1差異最為明顯,與花發(fā)育相關(guān)SPL基因家族含有5個基因,以PpSPL4差異最為明顯。同時,本研究發(fā)現(xiàn)草地早熟禾空間矮化突變體A16類黃酮物質(zhì)含量升高,花期推遲、種子顏色加深以及飽和度提高。因此選取PpCHS1和PpSPL4兩個基因為研究對象。以草地早熟禾轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)為基礎(chǔ),克隆得到Pp-HS1基因cDNA序列。該基因包含查爾酮合成酶超基因家族保守區(qū)域,軟件分析表明該蛋白屬于疏水性蛋白,Ⅲ型聚酮合酶,具有同源二聚體結(jié)構(gòu),亞細胞定位結(jié)果顯示該基因編碼蛋白定位于細胞質(zhì)。PpCHS1表達分析表明該基因可能參與草地早熟禾花發(fā)育黃酮類物質(zhì)合成,并受到紫外線和高鹽誘導(dǎo),同時外施MeJA下持續(xù)高表達。該基因啟動子區(qū)域包含多個核心啟動子元件TATA-box、CAAT-box,光調(diào)控相關(guān)的作用元件,植物激素調(diào)控元件,以及干旱誘導(dǎo)以及類黃酮物質(zhì)合成相關(guān)MYB轉(zhuǎn)錄因子反式... 

【文章來源】:北京林業(yè)大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

草地早熟禾花發(fā)育相關(guān)基因PpCHS1與PpSPL4的克隆和功能分析


一技術(shù)路線圖

對比圖,小穗,表型,植株


植物種植材料為營養(yǎng)土、蛭石(1:1),混勻后裝入20x20cm花盆中,平整營養(yǎng)??土表面,均勻播種空間草地早熟禾矮化突變體Al6、同期保存北京林業(yè)大學草坪研??究所Baron種子,覆蓋上種植材料(圖2-1)。種植人I:氣候培養(yǎng)箱中,日夜溫度??24°C/18°C,光照12h,光強400阿〇卜定期修剪。??Kj??圖2-1.?WT和A16的表型對比圖??注:左,Al6:右,WT:?a,植株;b,葉片;c,小穗。??Fig?2-1.?Phenotypic?comparison?of?WT?and?A16??Note:?Left,?Aj6;?Right,?WT;?a,?plant;?b,?leaf;?c,?spikelet.??2.2.2空間誘變草地早熟禾突變體轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析??利用轉(zhuǎn)錄組測序公司諾和致源提供Novofmder軟件、本地Blast軟件進行數(shù)據(jù)分??析草地早熟禾類黃酮物質(zhì)代謝通路上相關(guān)基因表達水平。??2.2.3空間誘變草地早熟禾突變體類黃酮物質(zhì)含量測定??13??

分類圖,過程,環(huán)境信息,細胞


Differential?gene?of?CHS?gene?family?in?the?transcriptome?of??Kentucky?bluegrass??

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3107070

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