表皮蠟質(zhì)是植物與外界接觸的第一道屏障,在植物生長發(fā)育和抵御外界不良環(huán)境等方面起著重要的作用。蠟質(zhì)的合成決定了蠟質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)和功能。擬南芥中研究發(fā)現(xiàn),β-酮脂酰-Co A合酶（KCS）是蠟質(zhì)合成過程中限速酶,CER6是控制KCS合成的關(guān)鍵基因。本論文通過克隆紅星蘋果表皮MdCER6,分析其生物學(xué)功能,并在蘋果不同發(fā)育階段和采后貯藏期間,研究了乙烯和1-MCP對MdCER6表達和對表皮蠟質(zhì)含量的影響,以期初步闡明乙烯通過MdCER6調(diào)控蘋果表皮蠟質(zhì)合成的分子機制,為從基因水平研究乙烯調(diào)控蘋果表皮蠟質(zhì)合成機制提供參考。主要結(jié)果如下:1、從紅星蘋果果皮中克隆得到MdCER6基因片段,獲得其全長,經(jīng)生物信息學(xué)分析表明,該基因編碼蘋果表皮KCS,控制蘋果表皮蠟質(zhì)中超長鏈脂肪酸（VLCFAs）的合成。2、在蘋果果實生長發(fā)育期和采后貯藏期,MdCER6均有表達:在采前7 d和貯藏30 d、60 d相對表達量較高,其余階段表達量均較低。紅星蘋果表皮蠟質(zhì)質(zhì)量分布密度及二十八烷酸含量的變化均與MdCER6相對表達量的變化表現(xiàn)一致。3、在蘋果采前階段,乙烯對氨基環(huán)丙烷羧酸合酶（ACS）活性以及MdACS1和... 

【文章來源】：山東理工大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 植物蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能及合成研究進展
        1.1.1 植物蠟質(zhì)的結(jié)構(gòu)、組成與作用
        1.1.2 植物蠟質(zhì)的合成途徑和運輸
        1.1.3 蠟質(zhì)合成關(guān)鍵基因研究進展
    1.2 乙烯在果實發(fā)育和貯藏應(yīng)用中的研究進展
        1.2.1 乙烯和 1-MCP應(yīng)用進展
        1.2.2 控制乙烯合成相關(guān)基因研究進展
    1.3 乙烯對蠟質(zhì)及其合成的影響研究進展
    1.4 問題的提出
第二章 蘋果MdCER6的克隆
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料處理
        2.1.2 試劑
        2.1.3 儀器設(shè)備
        2.1.4 實驗方法
            2.1.4.1 蘋果RNA的提取
            2.1.4.2 反轉(zhuǎn)錄
            2.1.4.3 設(shè)計特異性引物和目的基因序列的獲得
            2.1.4.4 蘋果MdCER6的RT-PCR技術(shù)
            2.1.4.5 MdCER6基因序列分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 蘋果RNA提取物的鑒定
        2.2.2 MdCER6的克隆
        2.2.3 MdCER6基因序列比對
        2.2.4 MdCER6基因序列分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 蘋果發(fā)育和貯藏期MdCER6的表達
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料處理
        3.1.2 試劑
        3.1.3 儀器設(shè)備
        3.1.4 實驗方法
            3.1.4.1 蘋果RNA的提取
            3.1.4.2 反轉(zhuǎn)錄
            3.1.4.3 引物的設(shè)計與合成
            3.1.4.4 實時熒光定量PCR
            3.1.4.5 蘋果表皮蠟質(zhì)提取和測定
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 蘋果發(fā)育和貯藏期MdCER6表達
        3.2.2 蘋果發(fā)育和貯藏期表皮蠟質(zhì)質(zhì)量分布密度變化
        3.2.3 蘋果發(fā)育和貯藏期表皮蠟質(zhì)組成及其變化
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 乙烯對蘋果采前乙烯合成相關(guān)基因及MdCER6表達的共調(diào)控研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料處理
        4.1.2 試劑
        4.1.3 儀器設(shè)備
        4.1.4 實驗方法
            4.1.4.1 蘋果RNA的提取
            4.1.4.2 反轉(zhuǎn)錄
            4.1.4.3 引物的設(shè)計與合成
            4.1.4.4 實時熒光定量PCR
            4.1.4.5 ACS活性測定
            4.1.4.6 ACO活性測定
            4.1.4.7 ACC含量測定
            4.1.4.8 蘋果其他生理指標
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 采前乙烯對乙烯合成相關(guān)基因及MdCER6的共調(diào)控
        4.2.2 乙烯對采前蘋果ACS、ACO活性和ACC含量的影響
        4.2.3 采收前乙烯對蘋果其他生理指標的影響
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
第五章 乙烯對采后蘋果MdCER6表達的調(diào)控
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料處理
        5.1.2 試劑
        5.1.3 儀器設(shè)備
        5.1.4 實驗方法
            5.1.4.1 蘋果RNA的提取
            5.1.4.2 反轉(zhuǎn)錄
            5.1.4.3 引物的設(shè)計與合成
            5.1.4.4 實時熒光定量PCR
            5.1.4.5 ACS活性測定
            5.1.4.6 ACO活性測定
            5.1.4.7 ACC含量測定
            5.1.4.8 蘋果其他生理指標
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 乙烯對采后蘋果MdCER6表達的調(diào)控
        5.2.2 乙烯對采后蘋果果實ACS、ACO活性及ACC含量的影響
        5.2.3 乙烯對采后蘋果其他理化指標的影響
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3060673