由Valsa mali引起的腐爛病是危害我國蘋果樹最為嚴重的生物災害。明確病菌的分子致病機制對有效防控蘋果腐爛病意義重大。本研究在已建立的蘋果腐爛病菌（Valsa mali）ATMT突變體庫的基礎上,重點對蘋果腐爛病菌突變體G1-G50進行了表型篩選,得到了致病缺失突變體,并對突變基因進行了克隆和序列分析;同時開展了突變體G23和野生菌株sdau11-175的轉錄組測序分析,初步分析了突變基因在轉錄水平上的表達和調控作用。研究結果如下:1.突變體G1-G50 50個突變體中,僅有G23在生長發(fā)育和致病性方面與野生型菌株sdau11-175有明顯差異。進一步對突變體G23的表型進行分析,發(fā)現(xiàn)G23菌株致病性完全喪失,生長速率明顯減慢;與野生型相比,G23氣生菌絲生長較弱,菌落表面較為濕潤;在25℃黑暗條件下培養(yǎng),突變體G23始終不產(chǎn)生子實體。2.參照TAIL-PCR、hiTAIL-PCR和FPNI-PCR方法,建立了適合蘋果腐爛病菌pBHt2和pKO1-HPH兩種載體ATMT突變體的改進hiTAIL-PCR方法,該方法較原始的TAIL-PCR方法有著更高的特異性和擴增效率,能獲得更長的特... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學山東省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

S.cerevisiae中Tpk2調控flo8和Sfl1至flo11啟動子

圖 1.2 M. oryzae 環(huán)化腺苷酸信號途徑模式圖（摘自 Yan et al.，2011）Fig. 1.2 Model of the c AMP/PKA signaling pathway in M. Oryzae 中，SomA 行使著與 MoSom1 相似的功能，即調控真調控多個控制A. fumigatus分生孢子和細胞粘附力轉

圖 1.3 A. fumigatus 中 SomA 和 SomA-PtaB 基因網(wǎng)絡模式圖（摘自 Lin et al.，2015）Fig. 1.3 Model of the SomA and SomA-PtaB genetic network in A. Fumigatus（Lin et al.，2015）上述說明 Som1 基因在調控病原真菌的生長發(fā)育及致病過程中發(fā)揮著重要作用。在蘋果腐爛病菌 ATMT 突變體庫的篩選中，發(fā)現(xiàn)了菌落生長緩慢，子實體產(chǎn)生及致

【參考文獻】：
期刊論文
[1]近50年我國蘋果樹腐爛病發(fā)生情況分析[J]. 趙緒生,齊永志,王亞南,甄文超,曹克強.  貴州農(nóng)業(yè)科學. 2014(11)
[2]蘋果腐爛病菌原生質體制備與再生條件優(yōu)化[J]. 陳亮,倫瑩瑩,孫庚午,趙迎彤,何邦令,王洪凱,劉會香.  山東農(nóng)業(yè)科學. 2014(08)
[3]蘋果樹腐爛病菌GTP-環(huán)化水解酶II基因敲除載體構建及其突變體的表型分析[J]. 宋娜,戴青青,宋娜,黃麗麗,韓青梅.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2014(15)
[4]蘋果樹腐爛病菌致病因子及其與菌株致病性的關系[J]. 李超,李保華,李桂舫,王彩霞.  北方園藝. 2014(13)
[5]蘋果樹腐爛病菌T-DNA插入突變體表型及致病突變體研究[J]. 黃定宣,胡楊,孫光超,高小寧,尹志遠,黃麗麗.  西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2014(07)
[6]我國蘋果主要病害研究進展與病害防治中的問題[J]. 李保華,王彩霞,董向麗.  植物保護. 2013(05)
[7]基于PCR的非酶連型基因組步移技術研究進展[J]. 李旭娟,陳楊玲,王海波,龔明,鄒竹榮.  中國農(nóng)業(yè)科技導報. 2013(02)
[8]非模式生物轉錄組研究[J]. 劉紅亮,鄭麗明,劉青青,權富生,張涌.  遺傳. 2013(08)
[9]染色體步移技術克隆已知序列側翼啟動子的研究進展[J]. 康丹,方小艷,游騰飛,王婷婷,眭安平,楊星勇.  農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2013(03)
[10]蘋果樹腐爛病菌發(fā)酵液中根皮苷主要降解成分的分析[J]. 王建華,柯希望,黃以超,王惠,黃麗麗.  西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2012(08)

博士論文
[1]黑曲霉FGSC A1279次級代謝調控研究[D]. 呂揚勇.華南理工大學 2014
[2]黑腐皮殼侵染蘋果的組織細胞學及轉錄組學研究[D]. 柯希望.西北農(nóng)林科技大學 2013
[3]稻瘟病菌麥角甾醇生物合成途徑和cAMP-PKA信號途徑致病相關新基因功能研究[D]. 閆霞.浙江大學 2012

碩士論文
[1]指狀青霉（Penicillium digitatum）新的甾醇調控蛋白（SreA）的功能研究及轉錄組分析[D]. 劉婧.華中師范大學 2015
[2]基于轉錄組分析的哈茨木霉Thga1基因功能研究[D]. 孫青.中國農(nóng)業(yè)科學院 2015
[3]蘋果樹腐爛病菌4個多聚半乳糖醛酸酶基因功能的初步研究[D]. 宋娜.西北農(nóng)林科技大學 2014
[4]蘋果樹腐爛病菌2個己糖激酶基因功能的初步研究[D]. 戴青青.西北農(nóng)林科技大學 2014
[5]蘋果樹腐爛病菌內切多聚半乳糖醛酸酶基因的功能研究[D]. 許利軍.西北農(nóng)林科技大學 2014
[6]蘋果樹腐爛病菌生長發(fā)育相關突變體篩選及側翼序列分析[D]. 程明明.西北農(nóng)林科技大學 2014
[7]蘋果樹腐爛病菌致病物質的初步研究[D]. 王建華.西北農(nóng)林科技大學 2012



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