獼猴桃(Actinidia L.)熒光原位雜交技術(shù)體系的建立與優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2021-02-28 19:24
獼猴桃(Kiwifruit)屬獼猴桃科(Actinidiaceae)獼猴桃屬(Actinidia Lindl.),雌雄異株,為多年生攀緣性落葉藤本果樹(shù),是20世紀(jì)人工馴化栽培野生果樹(shù)最為成功的四大果樹(shù)種之一。獼猴桃屬植物種類繁多,分布范圍廣泛,生態(tài)習(xí)性各異,含有大量的野生資源及近緣物種,具有較為復(fù)雜的遺傳多樣性,且由于自然雜交、實(shí)生選種和雜交育種等因素,使種間和種內(nèi)的基因漸滲頻繁,從而形成了極為豐富的種間變型和種內(nèi)變型,因此獼猴桃屬植物遺傳多樣性以及種間與種內(nèi)親緣關(guān)系的深入研究具有明顯的重要性與必要性。當(dāng)前,國(guó)內(nèi)外學(xué)者運(yùn)用形態(tài)學(xué)、孢粉學(xué)、細(xì)胞學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)等從不同層次、不同方面、不同角度對(duì)獼猴桃屬及其近緣野生種植物進(jìn)行了大量的遺傳多樣性與親緣關(guān)系研究分析,取得了重要進(jìn)展。熒光原位雜交技術(shù)(Fluorescence in situ hybridization,FISH)作為分子細(xì)胞遺傳學(xué)一項(xiàng)重要的研究手段,在動(dòng)植物遺傳圖譜構(gòu)建、遺傳多樣性與親緣關(guān)系分析、基因定位、雜種鑒定等方面具有廣泛的應(yīng)用,但由于獼猴桃屬植物染色體。0.61.5μm)且數(shù)目多(2n...
【文章來(lái)源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 熒光原位雜交概述
1.1.1 熒光原位雜交技術(shù)(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
1.1.2 熒光原位雜交技術(shù)的原理及特點(diǎn)
1.1.3 熒光原位雜交技術(shù)體系關(guān)鍵因素
1.1.4 熒光原位雜交技術(shù)在植物研究方面的應(yīng)用
1.2 基因組原位雜交(Genome in situ hybridization,GISH)概述
1.2.1 基因組原位雜交技術(shù)的原理及特點(diǎn)
1.2.2 基因組原位雜交技術(shù)要點(diǎn)
1.2.3 基因組原位雜交技術(shù)的應(yīng)用
1.3 DNA纖維熒光原位雜交(DNA fiber-FISH)概述
1.3.1 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)的原理及特點(diǎn)
1.3.2 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)要點(diǎn)
1.3.3 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)的應(yīng)用
1.4 獼猴桃屬植物染色體研究
1.4.1 獼猴桃屬植物概述
1.4.2 獼猴桃屬植物染色體研究
第2章 引言
2.1 目的與意義
2.2 研究?jī)?nèi)容
2.2.1 獼猴桃GISH技術(shù)體系建立與優(yōu)化
2.2.2 獼猴桃FISH技術(shù)體系建立與優(yōu)化
2.2.3 獼猴桃DNA fiber-FISH技術(shù)體系建立與優(yōu)化
第3章 材料與方法
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 GISH試驗(yàn)材料
3.1.2 FISH試驗(yàn)材料
3.1.3 DNA fiber-FISH試驗(yàn)材料
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 探針的制備與標(biāo)記
3.2.2 染色體制備
3.2.3 DNA纖維制備
3.2.4 GISH與 FISH技術(shù)流程
3.2.5 Fiber-FISH技術(shù)流程
第4章 結(jié)果與分析
4.1 探針制備與標(biāo)記
4.2 GISH技術(shù)體系的建立與優(yōu)化
4.2.1 試驗(yàn)材料的選擇
4.2.2 中期染色體變性溫度與時(shí)間
4.2.3 封阻DNA比例篩選
4.3 45SrDNA-FISH技術(shù)體系的建立與優(yōu)化
4.4 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)體系的建立與優(yōu)化
4.4.1 細(xì)胞核提取
4.4.2 DNA纖維制備
4.4.3 獼猴桃DNA fiber-FISH技術(shù)體系優(yōu)化
第5章 討論
5.1 基因組原位雜交關(guān)鍵影響因素
5.2 雜交后洗脫溫度對(duì)45S r DNA-FISH的影響
5.3 DNA纖維原位雜交的關(guān)鍵技術(shù)因素
5.4 關(guān)于Fiber-FISH雜交信號(hào)的特點(diǎn)與真實(shí)性
5.5 關(guān)于獼猴桃GISH、FISH與 Fiber-FISH技術(shù)體系建立的意義與應(yīng)用前景
第6章 結(jié)論
第7章 論文創(chuàng)新點(diǎn)及下一步研究計(jì)劃
7.1 論文創(chuàng)新點(diǎn)
7.2 下一步研究計(jì)劃
參考文獻(xiàn)
附錄
在讀期間發(fā)表論文及參研課題
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]新中國(guó)果樹(shù)科學(xué)研究70年——獼猴桃[J]. 方金豹,鐘彩虹. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2019(10)
[2]六倍體小黑麥染色體的熒光原位雜交分析[J]. 楊婷,陳星灼,隋建樞,王偉,楊春苗,彭澤,耿廣東,張慶勤,張素勤. 西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(04)
[3]毛竹和厚壁毛竹的核型分析及45S和5S rDNA的FISH分析[J]. 韓言利,郭起榮,韓永華,于釗妍,米月穎. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(02)
[4]熒光原位雜交技術(shù)的發(fā)展及其在植物基因組研究中的應(yīng)用[J]. 劉玉玲,劉林杰,彭仁海. 分子植物育種. 2018(17)
[5]88個(gè)獼猴桃品種(系)及近緣野生種的倍性變異分析[J]. 廖光聯(lián),陳璐,鐘敏,黃春輝,陶俊杰,曲雪艷,徐小彪. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(04)
[6]長(zhǎng)白山地區(qū)野生軟棗獼猴桃遺傳多樣性研究[J]. 趙成日. 北方園藝. 2018(08)
[7]基因組原位雜交技術(shù)及其在園藝植物基因組研究中的應(yīng)用[J]. 王燕,陳清,陳濤,張靜,湯浩茹,王小蓉. 西北植物學(xué)報(bào). 2017(10)
[8]基于cpDNA序列的獼猴桃種質(zhì)資源多態(tài)性分析[J]. 高麗楊,夏惠,謝玥,沈妍秋,王秀,梁東. 分子植物育種. 2017(09)
[9]獼猴桃屬十個(gè)種的染色體倍性鑒定[J]. 王發(fā)明,李潔維,胡亞康,莫權(quán)輝,蔣橋生,龔弘娟,葉開(kāi)玉,劉平平. 廣西植物. 2018(02)
[10]雙色原位雜交顯示海帶配子體5SrDNA與45SrDNA的非連鎖關(guān)系[J]. 劉宇,董無(wú)善,劉麗,周志剛. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(07)
博士論文
[1]獼猴桃種間高密度遺傳圖譜的構(gòu)建及果實(shí)性狀QTLs定位[D]. 劉春燕.中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢植物園) 2016
[2]基于45S rDNA-FISH與GISH分析的草莓屬(Fragaria)野生種親緣關(guān)系與系統(tǒng)分類研究[D]. 翁天均.西南大學(xué) 2011
[3]棉花單染色體分離和DNA纖維FISH及其應(yīng)用研究[D]. 彭仁海.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[4]利用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)對(duì)中國(guó)明對(duì)蝦和櫛孔扇貝若干重要基因定位的研究[D]. 郇聘.中國(guó)科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2009
[5]天然與人工合成三倍體枇杷基因組變異及其DNA甲基化分析[D]. 汪衛(wèi)星.西南大學(xué) 2008
[6]獼猴桃屬植物分類學(xué)研究[D]. 李新偉.中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢植物園) 2007
[7]熒光原位雜交技術(shù)在大白菜染色體基因定位中的應(yīng)用研究[D]. 軒淑欣.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[8]獼猴桃屬植物的遺傳多樣性及種質(zhì)超低溫保存研究[D]. 徐小彪.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[9]柑橘體細(xì)胞雜種細(xì)胞遺傳學(xué)及抗CTV等基因?qū)﹁椎腇ISH分析[D]. 陳春麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[10]熒光原位雜交和分子標(biāo)記在水稻和小麥種質(zhì)資源研究中的應(yīng)用[D]. 余舜武.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002
碩士論文
[1]抗寒性多年生麥草的選育及分子細(xì)胞學(xué)研究[D]. 劉曉強(qiáng).哈爾濱師范大學(xué) 2019
[2]基于基因組原位雜交技術(shù)(GISH)對(duì)部分蘋(píng)果屬種類親緣關(guān)系的研究[D]. 華利源.聊城大學(xué) 2019
[3]獼猴桃抗?jié)儾≠Y源的離體篩選及主要類型的分子細(xì)胞遺傳學(xué)分析[D]. 王鵬.西南大學(xué) 2019
[4]基于熒光原位雜交的沙地云杉及近緣種親緣關(guān)系研究[D]. 王菊.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[5]廣東獼猴桃種質(zhì)資源遺傳多樣性研究及其核心種質(zhì)構(gòu)建[D]. 葉嬋娟.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 2016
[6]草棉1號(hào)染色體物理圖譜的構(gòu)建及CCICR轉(zhuǎn)座子家族的發(fā)現(xiàn)與分析[D]. 崔興雷.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[7]柑橘及其近緣屬植物5SrDNA的FISH位點(diǎn)研究[D]. 陳志.西南大學(xué) 2015
[8]桑屬植物染色體倍性研究及FISH分析[D]. 李楊.西南大學(xué) 2015
[9]棗基因組原位雜交技術(shù)體系建立及贊皇大棗起源的研究[D]. 劉京京.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[10]用三倍體作母本實(shí)現(xiàn)百合種質(zhì)滲入育種[D]. 袁國(guó)良.浙江大學(xué) 2014
本文編號(hào):3056331
【文章來(lái)源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 熒光原位雜交概述
1.1.1 熒光原位雜交技術(shù)(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
1.1.2 熒光原位雜交技術(shù)的原理及特點(diǎn)
1.1.3 熒光原位雜交技術(shù)體系關(guān)鍵因素
1.1.4 熒光原位雜交技術(shù)在植物研究方面的應(yīng)用
1.2 基因組原位雜交(Genome in situ hybridization,GISH)概述
1.2.1 基因組原位雜交技術(shù)的原理及特點(diǎn)
1.2.2 基因組原位雜交技術(shù)要點(diǎn)
1.2.3 基因組原位雜交技術(shù)的應(yīng)用
1.3 DNA纖維熒光原位雜交(DNA fiber-FISH)概述
1.3.1 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)的原理及特點(diǎn)
1.3.2 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)要點(diǎn)
1.3.3 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)的應(yīng)用
1.4 獼猴桃屬植物染色體研究
1.4.1 獼猴桃屬植物概述
1.4.2 獼猴桃屬植物染色體研究
第2章 引言
2.1 目的與意義
2.2 研究?jī)?nèi)容
2.2.1 獼猴桃GISH技術(shù)體系建立與優(yōu)化
2.2.2 獼猴桃FISH技術(shù)體系建立與優(yōu)化
2.2.3 獼猴桃DNA fiber-FISH技術(shù)體系建立與優(yōu)化
第3章 材料與方法
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 GISH試驗(yàn)材料
3.1.2 FISH試驗(yàn)材料
3.1.3 DNA fiber-FISH試驗(yàn)材料
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 探針的制備與標(biāo)記
3.2.2 染色體制備
3.2.3 DNA纖維制備
3.2.4 GISH與 FISH技術(shù)流程
3.2.5 Fiber-FISH技術(shù)流程
第4章 結(jié)果與分析
4.1 探針制備與標(biāo)記
4.2 GISH技術(shù)體系的建立與優(yōu)化
4.2.1 試驗(yàn)材料的選擇
4.2.2 中期染色體變性溫度與時(shí)間
4.2.3 封阻DNA比例篩選
4.3 45SrDNA-FISH技術(shù)體系的建立與優(yōu)化
4.4 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)體系的建立與優(yōu)化
4.4.1 細(xì)胞核提取
4.4.2 DNA纖維制備
4.4.3 獼猴桃DNA fiber-FISH技術(shù)體系優(yōu)化
第5章 討論
5.1 基因組原位雜交關(guān)鍵影響因素
5.2 雜交后洗脫溫度對(duì)45S r DNA-FISH的影響
5.3 DNA纖維原位雜交的關(guān)鍵技術(shù)因素
5.4 關(guān)于Fiber-FISH雜交信號(hào)的特點(diǎn)與真實(shí)性
5.5 關(guān)于獼猴桃GISH、FISH與 Fiber-FISH技術(shù)體系建立的意義與應(yīng)用前景
第6章 結(jié)論
第7章 論文創(chuàng)新點(diǎn)及下一步研究計(jì)劃
7.1 論文創(chuàng)新點(diǎn)
7.2 下一步研究計(jì)劃
參考文獻(xiàn)
附錄
在讀期間發(fā)表論文及參研課題
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]新中國(guó)果樹(shù)科學(xué)研究70年——獼猴桃[J]. 方金豹,鐘彩虹. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2019(10)
[2]六倍體小黑麥染色體的熒光原位雜交分析[J]. 楊婷,陳星灼,隋建樞,王偉,楊春苗,彭澤,耿廣東,張慶勤,張素勤. 西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(04)
[3]毛竹和厚壁毛竹的核型分析及45S和5S rDNA的FISH分析[J]. 韓言利,郭起榮,韓永華,于釗妍,米月穎. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(02)
[4]熒光原位雜交技術(shù)的發(fā)展及其在植物基因組研究中的應(yīng)用[J]. 劉玉玲,劉林杰,彭仁海. 分子植物育種. 2018(17)
[5]88個(gè)獼猴桃品種(系)及近緣野生種的倍性變異分析[J]. 廖光聯(lián),陳璐,鐘敏,黃春輝,陶俊杰,曲雪艷,徐小彪. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(04)
[6]長(zhǎng)白山地區(qū)野生軟棗獼猴桃遺傳多樣性研究[J]. 趙成日. 北方園藝. 2018(08)
[7]基因組原位雜交技術(shù)及其在園藝植物基因組研究中的應(yīng)用[J]. 王燕,陳清,陳濤,張靜,湯浩茹,王小蓉. 西北植物學(xué)報(bào). 2017(10)
[8]基于cpDNA序列的獼猴桃種質(zhì)資源多態(tài)性分析[J]. 高麗楊,夏惠,謝玥,沈妍秋,王秀,梁東. 分子植物育種. 2017(09)
[9]獼猴桃屬十個(gè)種的染色體倍性鑒定[J]. 王發(fā)明,李潔維,胡亞康,莫權(quán)輝,蔣橋生,龔弘娟,葉開(kāi)玉,劉平平. 廣西植物. 2018(02)
[10]雙色原位雜交顯示海帶配子體5SrDNA與45SrDNA的非連鎖關(guān)系[J]. 劉宇,董無(wú)善,劉麗,周志剛. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(07)
博士論文
[1]獼猴桃種間高密度遺傳圖譜的構(gòu)建及果實(shí)性狀QTLs定位[D]. 劉春燕.中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢植物園) 2016
[2]基于45S rDNA-FISH與GISH分析的草莓屬(Fragaria)野生種親緣關(guān)系與系統(tǒng)分類研究[D]. 翁天均.西南大學(xué) 2011
[3]棉花單染色體分離和DNA纖維FISH及其應(yīng)用研究[D]. 彭仁海.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[4]利用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)對(duì)中國(guó)明對(duì)蝦和櫛孔扇貝若干重要基因定位的研究[D]. 郇聘.中國(guó)科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2009
[5]天然與人工合成三倍體枇杷基因組變異及其DNA甲基化分析[D]. 汪衛(wèi)星.西南大學(xué) 2008
[6]獼猴桃屬植物分類學(xué)研究[D]. 李新偉.中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢植物園) 2007
[7]熒光原位雜交技術(shù)在大白菜染色體基因定位中的應(yīng)用研究[D]. 軒淑欣.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[8]獼猴桃屬植物的遺傳多樣性及種質(zhì)超低溫保存研究[D]. 徐小彪.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[9]柑橘體細(xì)胞雜種細(xì)胞遺傳學(xué)及抗CTV等基因?qū)﹁椎腇ISH分析[D]. 陳春麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[10]熒光原位雜交和分子標(biāo)記在水稻和小麥種質(zhì)資源研究中的應(yīng)用[D]. 余舜武.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002
碩士論文
[1]抗寒性多年生麥草的選育及分子細(xì)胞學(xué)研究[D]. 劉曉強(qiáng).哈爾濱師范大學(xué) 2019
[2]基于基因組原位雜交技術(shù)(GISH)對(duì)部分蘋(píng)果屬種類親緣關(guān)系的研究[D]. 華利源.聊城大學(xué) 2019
[3]獼猴桃抗?jié)儾≠Y源的離體篩選及主要類型的分子細(xì)胞遺傳學(xué)分析[D]. 王鵬.西南大學(xué) 2019
[4]基于熒光原位雜交的沙地云杉及近緣種親緣關(guān)系研究[D]. 王菊.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[5]廣東獼猴桃種質(zhì)資源遺傳多樣性研究及其核心種質(zhì)構(gòu)建[D]. 葉嬋娟.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 2016
[6]草棉1號(hào)染色體物理圖譜的構(gòu)建及CCICR轉(zhuǎn)座子家族的發(fā)現(xiàn)與分析[D]. 崔興雷.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[7]柑橘及其近緣屬植物5SrDNA的FISH位點(diǎn)研究[D]. 陳志.西南大學(xué) 2015
[8]桑屬植物染色體倍性研究及FISH分析[D]. 李楊.西南大學(xué) 2015
[9]棗基因組原位雜交技術(shù)體系建立及贊皇大棗起源的研究[D]. 劉京京.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[10]用三倍體作母本實(shí)現(xiàn)百合種質(zhì)滲入育種[D]. 袁國(guó)良.浙江大學(xué) 2014
本文編號(hào):3056331
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