柑橘屬植物(Citrus L.)多甲氧基黃酮含量檢測、單體純化及其抗疲勞機理研究
發(fā)布時間:2021-02-27 20:38
中國是柑橘屬植物最重要的起源地,具有豐富的柑橘資源。有關(guān)我國柑橘資源的研究雖然經(jīng)歷了半個多世紀,但對地方柑橘品種多甲氧基黃酮的研究仍缺乏相對應(yīng)的研究支持。多甲氧基黃酮是柑橘類水果特有的一種黃酮類化合物,具有抗炎、抗氧化、抗心血管疾病、抗癌等眾多生物活性功能。此外,較黃烷酮相比多甲氧基黃酮良好的口服吸收利用率,使得多甲氧基黃酮有著更好的臨床研究潛力。但是由于同分異構(gòu)現(xiàn)象明顯,多甲氧基黃酮單體的制備普遍存在分離方法繁瑣、純化效率不高、制備過程環(huán)境污染等問題。因此,弄清我國地方特有柑橘品種中多甲氧基黃酮的種類與含量,建立綠色、高效的多甲氧基黃酮制備方法,是未來研究柑橘屬植物多甲氧基黃酮與地方柑橘資源科學(xué)利用亟需解決的關(guān)鍵問題。疲勞使機體處于亞健康狀態(tài),會導(dǎo)致機體免疫力下降、擾亂內(nèi)分泌與神經(jīng)系統(tǒng)穩(wěn)定、誘發(fā)心腦血管等疾病,嚴重危害人們的健康。線粒體是機體能量供應(yīng)的主要細胞器,也是活性氧產(chǎn)生的主要場所。其功能的改善不僅可以增加組織能量的供應(yīng),還能夠增加組織氧化耐受能力,線粒體已成為抗疲勞研究的重要靶向細胞器。近期的研究發(fā)現(xiàn),天然酚類化合物能夠通過激活肌肉組織中某些蛋白的表達,改善肌肉線粒體的功能拮...
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:152 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
1.1 柑橘多甲氧基黃酮研究概況
1.1.1 柑橘資源
1.1.2 多甲氧基黃酮
1.2 多甲氧基黃酮的提取方法
1.3 多甲氧基黃酮的檢測技術(shù)
1.4 多甲氧基黃酮的分離純化
1.5 多甲氧基黃酮單體的生物活性研究
1.5.1 抗氧化活性
1.5.2 抗炎活性
1.5.3 抗癌活性
1.5.4 調(diào)解代謝綜合癥
1.5.5 腦保護作用
1.6 疲勞及其發(fā)生機制
1.7 類黃酮抗疲勞研究
第2章 引言
2.1 研究目的與意義
2.2 研究內(nèi)容
2.3 技術(shù)路線
第3章 我國十三種地方特有柑橘品種多甲氧基黃酮組分與含量的檢測分析
3.1 研究材料
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗主要藥品與試劑
3.1.3 實驗儀器
3.2 研究方法
3.2.1 標準品溶液的制備
3.2.2 類黃酮測定方法的方法學(xué)驗證
3.2.3 樣品的預(yù)處理
3.2.4 樣品類黃酮的提取
3.2.5 色譜條件
3.2.6 統(tǒng)計分析
3.3 實驗結(jié)果
3.3.1 UPLC-PDA方法學(xué)驗證
3.3.2 十三種柑橘材料果皮中多甲氧基黃酮的組分
3.3.3 十三種柑橘材料果皮中多甲氧基黃酮的含量
3.3.4 品種間多甲氧基黃酮的相關(guān)性分析以及主成分分析
3.4 討論
3.4.1 柑橘屬基本類型間多甲氧基黃酮組分與含量的分析
3.4.2 同一類型不同品種間多甲氧基黃酮組分與含量的分析
3.4.3 柑橘屬植物多甲氧基黃酮資源的利用
3.5 本章小結(jié)
第4章 大紅袍紅橘果皮多甲氧基黃酮單體的分離純化與鑒定
4.1 研究材料
4.1.1 柑橘材料
4.1.2 實驗試劑
4.1.3 實驗儀器
4.2 研究方法
4.2.1 大紅袍紅橘果皮多甲氧基黃酮的提取
4.2.2 大紅袍紅橘果皮多甲氧基黃酮的富集純化
4.2.3 多甲氧基黃酮單體的分離制備
4.2.4 多甲氧基黃酮單體的鑒定
4.2.5 統(tǒng)計分析
4.3 實驗結(jié)果
4.3.1 大孔樹脂的篩選
4.3.2 HPD100型大孔樹脂對多甲氧基黃酮的靜態(tài)吸附和解吸分析
4.3.3 HPD100型大孔樹脂對多甲氧基黃酮的吸附熱力學(xué)分析
4.3.4 HPD100型大孔樹脂的動態(tài)吸附與解吸附
4.3.5 HPD100型大孔樹脂純化后粗提物中多甲氧基黃酮的組分及含量變化
4.3.6 分離純化結(jié)果及其單體鑒定
4.4 討論
4.4.1 大孔樹脂對多甲氧基黃酮的吸附與除雜
4.4.2 柑橘果皮多甲氧基黃酮單體的制備與鑒定
4.5 本章小結(jié)
第5章 大紅袍紅橘多甲氧基黃酮抗疲勞體外單體篩選及其體內(nèi)藥效學(xué)驗證
5.1 研究材料
5.1.1 實驗細胞與動物
5.1.2 實驗藥品與試劑
5.1.3 實驗儀器
5.2 研究方法
5.2.1細胞實驗
5.2.2 細胞活力檢測
5.2.3 實時熒光定量Real-time PCR
5.2.4 免疫印記Western Bloting
5.2.5 動物實驗
5.2.6 血乳酸檢測
5.2.7 肌肉糖原檢測
5.2.8 腓腸肌透射電鏡
5.2.9 免疫組化
5.2.10 數(shù)據(jù)分析
5.3 實驗結(jié)果
5.3.1 C2C12 細胞分化結(jié)果及其鑒定
5.3.2 五種多甲氧基黃酮對C2C12 肌管細胞活性的影響
5.3.3 五種多甲氧基黃酮對C2C12 肌管細胞線粒體新生的影響
5.3.4 橘皮素提高C2C12 肌管細胞線粒體新生通路相關(guān)基因的表達
5.3.5 橘皮素激活A(yù)MPK啟動線粒體新生通路的發(fā)生
5.3.6 橘皮素通過能量調(diào)節(jié)途徑影響AMPK的活化
5.3.7 橘皮素激活A(yù)MPK-PGC1-α-NRF1-TFAM信號軸增加C2C12 肌管細胞線粒體生物發(fā)生
5.3.8 橘皮素改善小鼠身體表現(xiàn)延遲疲勞發(fā)生
5.3.9 橘皮素減少小鼠血乳酸的水平增加肌肉糖原的儲備
5.3.10 橘皮素改善小鼠腓腸肌線粒體數(shù)量與體積
5.3.11 橘皮素激活小鼠腓腸肌AMPK-PGC1-α-NRF1-TFAM信號通路
5.4 討論
5.5 本章小結(jié)
第6章 總結(jié)與展望
6.1 本研究結(jié)論
6.2 研究創(chuàng)新
6.3 思考與展望
參考文獻
附錄
致謝
發(fā)表論文和主研課題
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大孔樹脂AB-8分離純化倫晚臍橙總黃酮[J]. 聶超,趙梓燕,徐曉丹,周志欽. 食品工業(yè)科技. 2017(18)
[2]Cellular metabolic energy modulation by tangeretin in 7,12-dimethylbenz(a) anthracene-induced breast cancer[J]. Kuppusamy Periyasamy,Venkatachalam Sivabalan,Kuppusamy Baskaran,Kannayiram Kasthuri,Dhanapal Sakthisekaran. The Journal of Biomedical Research. 2016(02)
[3]枳殼中黃酮類成分的分離與鑒定[J]. 丁邑強,熊英,周斌,鄧敏芝,鄧可眾. 中國中藥雜志. 2015(12)
[4]大孔樹脂分離純化陳皮中多甲氧基黃酮類化合物[J]. 劉韶,陽秀娟. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2014(10)
[5]中國特有柑橘屬植物基本類型不同組織類黃酮含量分析[J]. 李利改,席萬鵬,張元梅,焦必寧,周志欽. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(22)
[6]柑橘果品營養(yǎng)學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 丁曉波,張華,劉世堯,廖益均,周志欽. 園藝學(xué)報. 2012(09)
[7]大孔樹脂純化柑橘皮渣類黃酮的工藝研究[J]. 汪洋,吳劍,曾凡坤. 食品工業(yè). 2011(10)
[8]從28屆國際園藝學(xué)大會看果蔬園藝產(chǎn)品營養(yǎng)學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 蘆琰,周志欽. 園藝學(xué)報. 2011(09)
[9]橘紅素增強5-氟尿嘧啶抑制人胃癌AGS細胞增殖的作用及其機制研究[J]. 魯嵐,董楊,施建蓉,吳大正. 中國藥理學(xué)通報. 2011(06)
[10]論果品營養(yǎng)學(xué)[J]. 靖麗,周志欽. 果樹學(xué)報. 2011(01)
博士論文
[1]基于柑橘皮渣及果膠的新型微納米材料研制及其應(yīng)用研究[D]. 張文林.西南大學(xué) 2017
[2]金柑(Fortunella Swingle)乙醇提取物防治代謝綜合征及其主要酚類物質(zhì)抗癌活性的研究[D]. 譚飔.西南大學(xué) 2016
[3]二氫楊梅素和楊梅素對急性低氧條件下運動能力的保護效應(yīng)及機制研究[D]. 鄒丹.第三軍醫(yī)大學(xué) 2016
[4]燕麥β-葡聚糖的體內(nèi)代謝和抗運動疲勞作用機制研究[D]. 徐超.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[5]廣陳皮黃酮類化合物和揮發(fā)油成分及其活性研究[D]. 高蓓.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]人參多糖抗疲勞和抗抑郁作用及其機制的研究[D]. 王佳.東北師范大學(xué) 2010
[7]槲皮素抗疲勞作用及其相關(guān)機制的實驗研究[D]. 吳健全.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2010
[8]錦橙皮中多甲氧基黃酮抑菌抗氧化活性研究[D]. 姚曉琳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
碩士論文
[1]柑橘果實多甲氧基黃酮的提取、富集與分離純化方法研究[D]. 趙梓燕.西南大學(xué) 2018
[2]凍綠果實中黃酮提純及抗氧化性研究[D]. 王小璐.山西大學(xué) 2017
[3]柑橘果皮中多甲氧基黃酮的提取、分離及抗氧化活性研究[D]. 韓丹丹.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]大豆異黃酮抗疲勞作用及相關(guān)機制的實驗研究[D]. 鄧炳楠.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2015
[5]枸杞葉總黃酮對小鼠抗疲勞作用的研究[D]. 岳明霞.蘭州大學(xué) 2015
[6]香菇(Lentinus edodes)對小鼠抗疲勞、耐缺氧及抗氧化作用的研究[D]. 陳慧嬋.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]荷葉總黃酮提取純化工藝及減肥降脂作用的研究[D]. 薛冬娜.西南大學(xué) 2008
[8]枳實中黃酮類化合物的提取、分離、鑒定與生物活性研究[D]. 王巧能.浙江工商大學(xué) 2008
本文編號:3054771
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:152 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
1.1 柑橘多甲氧基黃酮研究概況
1.1.1 柑橘資源
1.1.2 多甲氧基黃酮
1.2 多甲氧基黃酮的提取方法
1.3 多甲氧基黃酮的檢測技術(shù)
1.4 多甲氧基黃酮的分離純化
1.5 多甲氧基黃酮單體的生物活性研究
1.5.1 抗氧化活性
1.5.2 抗炎活性
1.5.3 抗癌活性
1.5.4 調(diào)解代謝綜合癥
1.5.5 腦保護作用
1.6 疲勞及其發(fā)生機制
1.7 類黃酮抗疲勞研究
第2章 引言
2.1 研究目的與意義
2.2 研究內(nèi)容
2.3 技術(shù)路線
第3章 我國十三種地方特有柑橘品種多甲氧基黃酮組分與含量的檢測分析
3.1 研究材料
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗主要藥品與試劑
3.1.3 實驗儀器
3.2 研究方法
3.2.1 標準品溶液的制備
3.2.2 類黃酮測定方法的方法學(xué)驗證
3.2.3 樣品的預(yù)處理
3.2.4 樣品類黃酮的提取
3.2.5 色譜條件
3.2.6 統(tǒng)計分析
3.3 實驗結(jié)果
3.3.1 UPLC-PDA方法學(xué)驗證
3.3.2 十三種柑橘材料果皮中多甲氧基黃酮的組分
3.3.3 十三種柑橘材料果皮中多甲氧基黃酮的含量
3.3.4 品種間多甲氧基黃酮的相關(guān)性分析以及主成分分析
3.4 討論
3.4.1 柑橘屬基本類型間多甲氧基黃酮組分與含量的分析
3.4.2 同一類型不同品種間多甲氧基黃酮組分與含量的分析
3.4.3 柑橘屬植物多甲氧基黃酮資源的利用
3.5 本章小結(jié)
第4章 大紅袍紅橘果皮多甲氧基黃酮單體的分離純化與鑒定
4.1 研究材料
4.1.1 柑橘材料
4.1.2 實驗試劑
4.1.3 實驗儀器
4.2 研究方法
4.2.1 大紅袍紅橘果皮多甲氧基黃酮的提取
4.2.2 大紅袍紅橘果皮多甲氧基黃酮的富集純化
4.2.3 多甲氧基黃酮單體的分離制備
4.2.4 多甲氧基黃酮單體的鑒定
4.2.5 統(tǒng)計分析
4.3 實驗結(jié)果
4.3.1 大孔樹脂的篩選
4.3.2 HPD100型大孔樹脂對多甲氧基黃酮的靜態(tài)吸附和解吸分析
4.3.3 HPD100型大孔樹脂對多甲氧基黃酮的吸附熱力學(xué)分析
4.3.4 HPD100型大孔樹脂的動態(tài)吸附與解吸附
4.3.5 HPD100型大孔樹脂純化后粗提物中多甲氧基黃酮的組分及含量變化
4.3.6 分離純化結(jié)果及其單體鑒定
4.4 討論
4.4.1 大孔樹脂對多甲氧基黃酮的吸附與除雜
4.4.2 柑橘果皮多甲氧基黃酮單體的制備與鑒定
4.5 本章小結(jié)
第5章 大紅袍紅橘多甲氧基黃酮抗疲勞體外單體篩選及其體內(nèi)藥效學(xué)驗證
5.1 研究材料
5.1.1 實驗細胞與動物
5.1.2 實驗藥品與試劑
5.1.3 實驗儀器
5.2 研究方法
5.2.1細胞實驗
5.2.2 細胞活力檢測
5.2.3 實時熒光定量Real-time PCR
5.2.4 免疫印記Western Bloting
5.2.5 動物實驗
5.2.6 血乳酸檢測
5.2.7 肌肉糖原檢測
5.2.8 腓腸肌透射電鏡
5.2.9 免疫組化
5.2.10 數(shù)據(jù)分析
5.3 實驗結(jié)果
5.3.1 C2C12 細胞分化結(jié)果及其鑒定
5.3.2 五種多甲氧基黃酮對C2C12 肌管細胞活性的影響
5.3.3 五種多甲氧基黃酮對C2C12 肌管細胞線粒體新生的影響
5.3.4 橘皮素提高C2C12 肌管細胞線粒體新生通路相關(guān)基因的表達
5.3.5 橘皮素激活A(yù)MPK啟動線粒體新生通路的發(fā)生
5.3.6 橘皮素通過能量調(diào)節(jié)途徑影響AMPK的活化
5.3.7 橘皮素激活A(yù)MPK-PGC1-α-NRF1-TFAM信號軸增加C2C12 肌管細胞線粒體生物發(fā)生
5.3.8 橘皮素改善小鼠身體表現(xiàn)延遲疲勞發(fā)生
5.3.9 橘皮素減少小鼠血乳酸的水平增加肌肉糖原的儲備
5.3.10 橘皮素改善小鼠腓腸肌線粒體數(shù)量與體積
5.3.11 橘皮素激活小鼠腓腸肌AMPK-PGC1-α-NRF1-TFAM信號通路
5.4 討論
5.5 本章小結(jié)
第6章 總結(jié)與展望
6.1 本研究結(jié)論
6.2 研究創(chuàng)新
6.3 思考與展望
參考文獻
附錄
致謝
發(fā)表論文和主研課題
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大孔樹脂AB-8分離純化倫晚臍橙總黃酮[J]. 聶超,趙梓燕,徐曉丹,周志欽. 食品工業(yè)科技. 2017(18)
[2]Cellular metabolic energy modulation by tangeretin in 7,12-dimethylbenz(a) anthracene-induced breast cancer[J]. Kuppusamy Periyasamy,Venkatachalam Sivabalan,Kuppusamy Baskaran,Kannayiram Kasthuri,Dhanapal Sakthisekaran. The Journal of Biomedical Research. 2016(02)
[3]枳殼中黃酮類成分的分離與鑒定[J]. 丁邑強,熊英,周斌,鄧敏芝,鄧可眾. 中國中藥雜志. 2015(12)
[4]大孔樹脂分離純化陳皮中多甲氧基黃酮類化合物[J]. 劉韶,陽秀娟. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2014(10)
[5]中國特有柑橘屬植物基本類型不同組織類黃酮含量分析[J]. 李利改,席萬鵬,張元梅,焦必寧,周志欽. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(22)
[6]柑橘果品營養(yǎng)學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 丁曉波,張華,劉世堯,廖益均,周志欽. 園藝學(xué)報. 2012(09)
[7]大孔樹脂純化柑橘皮渣類黃酮的工藝研究[J]. 汪洋,吳劍,曾凡坤. 食品工業(yè). 2011(10)
[8]從28屆國際園藝學(xué)大會看果蔬園藝產(chǎn)品營養(yǎng)學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 蘆琰,周志欽. 園藝學(xué)報. 2011(09)
[9]橘紅素增強5-氟尿嘧啶抑制人胃癌AGS細胞增殖的作用及其機制研究[J]. 魯嵐,董楊,施建蓉,吳大正. 中國藥理學(xué)通報. 2011(06)
[10]論果品營養(yǎng)學(xué)[J]. 靖麗,周志欽. 果樹學(xué)報. 2011(01)
博士論文
[1]基于柑橘皮渣及果膠的新型微納米材料研制及其應(yīng)用研究[D]. 張文林.西南大學(xué) 2017
[2]金柑(Fortunella Swingle)乙醇提取物防治代謝綜合征及其主要酚類物質(zhì)抗癌活性的研究[D]. 譚飔.西南大學(xué) 2016
[3]二氫楊梅素和楊梅素對急性低氧條件下運動能力的保護效應(yīng)及機制研究[D]. 鄒丹.第三軍醫(yī)大學(xué) 2016
[4]燕麥β-葡聚糖的體內(nèi)代謝和抗運動疲勞作用機制研究[D]. 徐超.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[5]廣陳皮黃酮類化合物和揮發(fā)油成分及其活性研究[D]. 高蓓.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]人參多糖抗疲勞和抗抑郁作用及其機制的研究[D]. 王佳.東北師范大學(xué) 2010
[7]槲皮素抗疲勞作用及其相關(guān)機制的實驗研究[D]. 吳健全.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2010
[8]錦橙皮中多甲氧基黃酮抑菌抗氧化活性研究[D]. 姚曉琳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
碩士論文
[1]柑橘果實多甲氧基黃酮的提取、富集與分離純化方法研究[D]. 趙梓燕.西南大學(xué) 2018
[2]凍綠果實中黃酮提純及抗氧化性研究[D]. 王小璐.山西大學(xué) 2017
[3]柑橘果皮中多甲氧基黃酮的提取、分離及抗氧化活性研究[D]. 韓丹丹.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]大豆異黃酮抗疲勞作用及相關(guān)機制的實驗研究[D]. 鄧炳楠.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2015
[5]枸杞葉總黃酮對小鼠抗疲勞作用的研究[D]. 岳明霞.蘭州大學(xué) 2015
[6]香菇(Lentinus edodes)對小鼠抗疲勞、耐缺氧及抗氧化作用的研究[D]. 陳慧嬋.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]荷葉總黃酮提取純化工藝及減肥降脂作用的研究[D]. 薛冬娜.西南大學(xué) 2008
[8]枳實中黃酮類化合物的提取、分離、鑒定與生物活性研究[D]. 王巧能.浙江工商大學(xué) 2008
本文編號:3054771
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