為進一步拓寬枇杷離體培養(yǎng)的外植體類型,嘗試探索出更加適宜的再生系統(tǒng),本研究分別以’大五星’枇杷的葉片和葉脈為實驗材料,比較兩者的離體培養(yǎng)表現(xiàn)。通過對影響葉片及葉脈離體培養(yǎng)的多種因素進行較為系統(tǒng)的篩選,最終在葉片培養(yǎng)中獲得生長狀況良好的胚性愈傷組織及分化的心形胚。另外,應用高效液相色譜法（HPLC）首次對枇杷葉片和胚性愈傷組織的內源激素含量進行了研究,分析內源激素與胚性愈傷組織發(fā)生之間的關系,為快速獲得胚性材料、基因轉化及種質資源保存等奠定了一定的基礎。主要研究結果如下:1.外植體及接種方式的選擇:取以3～5月、展葉12 d、葉長約14 cm、外被淺褐色絨毛且毛量較少、呈淺綠色枇杷葉的中基部葉片和葉脈在離體培養(yǎng)及愈傷組織誘導的過程中表現(xiàn)較好。葉脈褐化少且出愈率較高,葉片愈傷組織雖出現(xiàn)時間較晚但質量較好,分化潛力較大。葉片和葉脈的離體培養(yǎng)對接種方式的要求不盡相同。葉片以葉面向上（即遠軸面接觸培養(yǎng)基）接種的培養(yǎng)效果較好且愈傷組織的生長量更多,出愈率達60.3%,顯著高于葉背向上的接種方式。而葉脈培養(yǎng)則相反,葉背向上接種（即近軸面接觸培養(yǎng)基）時愈傷組織能較快形成,出愈率相較于葉面向上時高35.... 

【文章來源】：四川農業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖８不同光質處理下愈傷組織的生長曲線??Ｆｉｇ．?８?Ｔｈｅ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｃａｌｌｕｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｉｇｈｔ?ｑｕａｌｉｔｉｅｓ??

４．３．１內源激素測定的定性與定量分析??在甲醇－水－乙酸（４５：５４．２：０．８）組合的流動相中，四種激素能完全分離且重??復性較好（如圖１１所示），其中２１＇的保留時間為２．３３８?１�。必保�，０八３為３．３５〇１＾１１，??ＩＡＡ的為６．１７８?ｍｉｎ，ＡＢＡ為１０．３２２?ｍｉｎ。四種激素的回歸方程及相關系數如表??１３所示。??７〇〇?＾?ＡＢＡ??＜?６００＾??Ｚ?５００?—??＾?４００?—??

選取的４種典型形態(tài)的愈傷組織分別為黃綠色顆粒狀愈傷組織、淡黃色生長??較慢的胚性愈傷組織、黃白色顆粒狀表面略干燥的愈傷組織及水漬狀且部分褐化??的愈傷組織，４種愈傷組織的內源激素含量有所不同（如圖１３所示）。其中愈傷??組織內ＧＡ３含量普遍高于其他幾種內源激素，比較發(fā)現(xiàn)水漬褐化狀愈傷組織內??ＧＡ３的水平最高，達０．４４７?ｐｇ／ｇ，其次為黃白色顆粒狀愈傷和黃綠色顆粒狀愈傷，??分別為０．３６６?ｐｇ／ｇ和０．２５３?ｐｇ／ｇ，而淡黃色胚性愈傷組織的內源ＧＡ３含量最低，??為０．２３２?ｐｇ／ｇ。愈傷組織內ＩＡＡ含量也存在明顯差異，比較發(fā)現(xiàn)黃綠色顆粒狀愈??傷組織和淺黃色胚性愈傷組織的內源ＩＡＡ含量較高，分別為０．１２６?ｐｇ／ｇ和０．０９５??ｐｇ／ｇ，黃白色愈傷內ＩＡＡ含量略少，而水潰狀愈傷組織內ＩＡＡ含量僅為黃綠色??愈傷組織的１／３。在內源ＡＢＡ和ＺＴ的比較上發(fā)現(xiàn)，淡黃色胚性愈傷組織和黃綠??色顆粒狀愈傷組織內的含量均顯著較高。其中ＡＢＡ水平在胚性愈傷組織中表現(xiàn)??最高

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3038292