VvABCG20基因在葡萄花和胚珠中高表達(dá),在營養(yǎng)器官中低表達(dá);在有核葡萄和無核葡萄胚珠發(fā)育過程中的表達(dá)模式存在差異;在種皮中的表達(dá)要高于胚乳;VvABCG20基因直系同源的基因參與種皮軟木脂的生物合成影響種子發(fā)育,因此推測VvABCG20基因可能通過轉(zhuǎn)運(yùn)種皮相關(guān)物質(zhì)參與種子的發(fā)育,進(jìn)而影響胚珠的敗育。啟動子在轉(zhuǎn)錄水平上參與調(diào)控下游相應(yīng)基因表達(dá),因此通過研究VvABCG20基因的啟動子來探討啟動子對基因表達(dá)的影響。在本論文中,克隆了‘黑比諾’和‘無核白’中VvABCG20基因啟動子,構(gòu)建了VvABCG20基因啟動子及其缺失片段與GUS基因的重組載體,通過瞬時轉(zhuǎn)化煙草葉片來分析啟動子全長及各片段的啟動子活性,同時對VvABCG20基因啟動子甲基化和轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控分析。并且對調(diào)控VvABCG20基因的VvDof14基因及其家族進(jìn)行胚珠發(fā)育表達(dá)分析和植物激素處理的表達(dá)分析。通過研究得出以下結(jié)果:1克隆了‘無核白’和‘黑比諾’的ABCG20基因啟動子,發(fā)現(xiàn)都存在兩種序列,全長及缺失41bp的序列,缺失序列在兩個品種中無明顯差異。構(gòu)建啟動子全長及缺失的GUS重組載體,通過瞬時轉(zhuǎn)化煙草發(fā)現(xiàn):啟動子缺... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 無核葡萄研究進(jìn)展
    1.2 植物ABCG家族的研究進(jìn)展
    1.3 Dof家族研究進(jìn)展
    1.4 研究目的和意義
第二章 葡萄VvABCG20 啟動子活性研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 葡萄VvABCG20 基因啟動子的克隆
        2.2.2 葡萄VvABCG20 基因啟動子在不同組織器官中活性差異
        2.2.3 甲基化對VvABCG20 基因的啟動子活性影響
        2.2.4 葡萄VvABCG20 基因5’UTR對啟動子活性影響
        2.2.5 葡萄VvABCG20基因啟動子缺失分析
    2.3 討論
        2.3.1 葡萄VvABCG20 基因啟動子在不同組織器官的表達(dá)
        2.3.2 葡萄VvABCG20 基因啟動子活性
    2.4 小結(jié)
第三章 Vv Dof14 轉(zhuǎn)錄因子負(fù)調(diào)控VvABCG20 基因的表達(dá)
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 VvDof14 基因的克隆及序列分析
        3.2.2 VvDof14 基因亞細(xì)胞定位觀察
        3.2.3 VvDof14 蛋白的自激活驗(yàn)證
        3.2.4 VvDof14與VvABCG20 互作分析
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 葡萄Dof家族基因的鑒定和表達(dá)分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料與方法
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 葡萄Dof家族基因鑒定
        4.2.2 葡萄Dof家族基因多序列比對及保守結(jié)構(gòu)域分析
        4.2.3 葡萄Dof基因結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)發(fā)育分析
        4.2.4 葡萄Dof家族基因在‘黑比諾’和‘無核白’胚珠中的表達(dá)分析
        4.2.5 葡萄Dof家族基因?qū)Σ煌参锷L調(diào)節(jié)劑的響應(yīng)分析
    4.3 討論
        4.3.1 葡萄Dof家族基因與種子發(fā)育的關(guān)系
        4.3.2 葡萄Dof家族基因與植物激素的關(guān)系
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個人簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]葡萄轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ABCG20基因的功能分析[D]. 王玲.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]葡萄細(xì)胞分裂素代謝相關(guān)基因VviABCG14及VviCKXs的分析[D]. 薛竟一.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[3]葡萄VvABCG20基因啟動子的克隆及活性分析[D]. 史圓圓.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]葡萄ABCG基因亞家族半分子成員克隆及表達(dá)分析[D]. 唐玉瑾.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016



本文編號：3019580