發(fā)布時(shí)間：2021-01-14 09:51

　　植物NADPH氧化酶是巨噬細(xì)胞NADPH氧化酶gp91phox的同源物,其一般以基因家族的形式存在。研究表明,植物NADPH氧化酶在生物和非生物脅迫中起重要的作用;但其在柑橘逆境響應(yīng)中的作用尚不清楚。因此,本研究通過生物信息學(xué)篩選了甜橙NADPH氧化酶基因家族成員;采用qRT-PCR方法分析其在甜橙不同組織、不同逆境脅迫與激素處理下的基因表達(dá)特性;通過病毒誘導(dǎo)的基因沉默方法初步分析NADPH氧化酶基因的抗寒功能;最后分析了甜橙在低溫脅迫下的生理生化指標(biāo)變化。主要研究結(jié)果如下:1.通過生物信息學(xué)分析,在甜橙基因組中共發(fā)現(xiàn)14個(gè)NADPH氧化酶家族成員。這些NADPH氧化酶基因共分布在5條染色體上,主要集中分布在5號、7號和8號染色體。氨基酸序列同源性對比發(fā)現(xiàn),14個(gè)基因成員氨基酸序列同源性較低,且外顯子-內(nèi)含子結(jié)構(gòu)差異大,外顯子的數(shù)目在5～14之間。啟動子分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),NADPH氧化酶基因的啟動子區(qū)域含有大量順式作用元件,如光響應(yīng)元件、防御脅迫響應(yīng)元件等;這表明柑橘NADPH氧化酶基因可能參與多種功能的調(diào)控,如生長和發(fā)育、對非生物和生物脅迫的應(yīng)激反應(yīng)等。通過qRT-PCR方法分析NADP... 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

甜橙NADPH氧化酶基因家族的染色體定位

?Ｃｓ８ｇ１７６４０．１???Ｃｓ５ｇ１１８９０．１??圖２－３甜橙ＮＡＤＰＨ氧化酶基因家族的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?Ａｎａｌｙ

２７??２．２．６?ＮＡＤＰＨ氧化酶基因響應(yīng)ＡＢＡ誘導(dǎo)的表達(dá)分析??如圖２－６所示，通過對ＡＢＡ處理進(jìn)行ｑＲＴ－ＰＣＲ分析發(fā)現(xiàn)，Ｃｓ４ｇ０６９２０＿ｌ的表達(dá)水平在處??理后第６小時(shí)顯著上調(diào)；Ｃｓ５ｇ０２９４０．１和Ｃｓ７ｇｌ９３２０．４的表達(dá)水平在第３小時(shí)后都顯著上調(diào)，??其中Ｃｓ７ｇｌ９３２０．４表達(dá)水平達(dá)處理前的６．７５倍??３〇?＾０６９２０－１?ＣＳ５Ｉ０２９４０．１?＾ｇｌ９３２０．４??ｃ?７?ｃ?＿?ａ?３，?１?ａ??Ｉ?ｉ?ｉ?ｔ?ｉ?ｉ?６０?Ｉ??Ｏｈ?３ｈ?ｂｈ?１２ｈ?２４ｈ?油?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??圖２－６?ＮＡＤＰＨ氧化酶基因響應(yīng)ＡＢＡ誘導(dǎo)的表達(dá)分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２－６?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｐｒｏｆｉｌｅｓ?ｏｆ?ＮＡＤＰＨ?ｏｘｉｄａｓｅ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?ｒｅｓｐｏｎｓｅ?ｔｏ?ＡＢＡ??２．２＿７?ＮＡＤＰＨ氧化酶基因響應(yīng)ＳＡ誘導(dǎo)的表達(dá)分析??如圖２－７所示，通過對ＳＡ處理進(jìn)行ｑＲＴ－ＰＣＲ分析發(fā)現(xiàn)，Ｃｓ５ｇｌｌ８９０．１、Ｃｓ８ｇｌ７６４０．１的??表達(dá)表現(xiàn)出相同的變化模式，即先升高后降低，在處理后的第１２小時(shí)達(dá)到最高值；與之??相反，Ｃｓ８ｇｌ２０００．３在處理后的第３小時(shí)顯著下降，之后維持較低的表達(dá)水平。??Ｃｓ５ｇｌｌ８９０．１?Ｃｓ８ｇｌ２０００．３?Ｃｓ８ｇｌ７６４０．１??６．０?－Ｉ?１＊２１?ａ?５Ｘ）?－｜?ａ??｜５－°－?Ｉ?Ｉ?４－°－?｜??１?：：?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物抗寒性研究進(jìn)展[J]. 李文明,辛建攀,魏馳宇,田如男.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(12)
[2]低溫脅迫對3種柑橘幼苗細(xì)胞膜及滲透調(diào)節(jié)的影響[J]. 徐衛(wèi)平,蔣景龍,任緒明,李麗,李新生,趙樺.  分子植物育種. 2017(03)
[3]外源H2O2對低溫脅迫下柑橘葉片抗寒性的影響[J]. 蔣景龍.  西北植物學(xué)報(bào). 2016(03)
[4]不同時(shí)間下低溫脅迫對油棕幼苗生理生化變化的影響[J]. 劉艷菊,曹紅星,張如蓮.  植物研究. 2015(06)
[5]茶樹NADPH氧化酶基因的克隆、亞細(xì)胞定位與表達(dá)分析[J]. 王明樂,王偉東,趙真,黎星輝.  園藝學(xué)報(bào). 2015(01)
[6]H2O2對牡丹愈傷組織分化及抗氧化酶活性的影響[J]. 賀丹,毛倉倉,陳穎,王政,何松林.  湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(01)
[7]柑橘凍害抵抗分子機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 陳志遠(yuǎn),邸麗俊,王國棟,黃新民,李新生,蔣景龍.  北方園藝. 2014(01)
[8]南昌市6種棕櫚科植物低溫脅迫的生理響應(yīng)[J]. 徐維杰,袁婷,楊寅桂,喻蘇琴.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(06)
[9]低溫脅迫下植物生理反應(yīng)機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 任軍,黃志霖,曾立雄,施征.  世界林業(yè)研究. 2013(06)
[10]植物Rboh基因功能及其活性調(diào)節(jié)機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉秋圓,賀浩華,胡麗芳.  生物技術(shù)通報(bào). 2013(11)

博士論文
[1]靈芝基因沉默體系的建立及NADPH氧化酶基因家族功能分析[D]. 穆大帥.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]低溫脅迫與鍛煉對草莓生理特性的影響和草莓幾丁質(zhì)酶基因的克隆[D]. 羅婭.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]鈣信號系統(tǒng)調(diào)節(jié)柑橘抗寒生理生化機(jī)理的研究[D]. 李新國.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[4]煙草NADPH氧化酶在Na～+、Cu～（2+）脅迫中的活性變化及其作用[D]. 于中連.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005

碩士論文
[1]抗寒轉(zhuǎn)錄因子BpMBF1基因轉(zhuǎn)楊樹的表達(dá)及功能分析[D]. 金曉紅.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]新疆野扁桃生物學(xué)特性、光合特性及抗寒性研究[D]. 邵麗珊.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]椪柑體細(xì)胞胚胎發(fā)生機(jī)理的初步研究[D]. 劉玉玲.揚(yáng)州大學(xué) 2016
[4]低溫脅迫下草莓NADPH氧化酶在ROS形成中的作用[D]. 何雨溈.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[5]清水江流域柑橘受凍狀況及恢復(fù)技術(shù)應(yīng)用與示范[D]. 龍令爐.貴州大學(xué) 2009



本文編號：2976687