發(fā)布時間：2021-01-09 16:08

　　目前在新疆野扁桃（Amygdalus Ledebouriana Schlecht）的生物學特征、生理生化檢測、資源分布等方面的研究中發(fā)現(xiàn)其有較強的抗寒抗旱性,但從基因表達調(diào)控角度探尋其抗逆性的研究較少。在基因的表達調(diào)控中,誘導型啟動子能依據(jù)植物在特定的生長環(huán)境下的需求,誘導相關(guān)基因的表達,以響應(yīng)外界環(huán)境的改變,從而減少植物營養(yǎng)的浪費。因此,探討啟動子的功能與作用機制將有助于對基因表達調(diào)控作用和信號傳導途徑的認識。本試驗從新疆野扁桃中克隆獲得了AlsCBF1pro（Amygdalus Ledebouriana Schlecht CBF1 promoter）,并進行啟動子的功能分析,主要的試驗結(jié)果如下:1.用PCR法從新疆野扁桃中克隆得到片段大小是1791 bp的CBF1啟動子（GenBank登錄號為KX785336）,命名為AlsCBF1pro,生物信息學分析發(fā)現(xiàn)其序列中含有20個與低溫脅迫相關(guān)的MYCCONSENSUSAT元件,及大量響應(yīng)鹽、激素、干旱等非生物脅迫的元件。2.構(gòu)建AlsCBF1pro的植物雙元表達載體,通過葉盤轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化煙草。篩選獲得陽性植株并于低溫、干旱、ABA和鹽脅... 

【文章來源】：新疆農(nóng)業(yè)大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

野扁桃基因組DNAFig.2-1GenomicDNAofAmygadalusledebourianaSchlecht

選取 OD260/OD280值約 1.8的樣品核酸進行啟動子全長圖 2-1 野扁桃基因組 DNAFig.2-1 Genomic DNA of Amygadalus ledebouriana Schlecht桃 CBF1 啟動子的 PCR 擴增桃 DNA 作模板，AlsCBF1-F 和 AlsCBF1-R 作引物擴增出 1800 片段回收后純化，再連接到 pMD 19-T 載體上并轉(zhuǎn)化 DH5α，篩 PCR檢測（圖 2-2），保菌送測。測序結(jié)果顯示獲得 1791 bp大為 AlsCBF1pro。

切驗證；M：DL2000 Marker；2：表triction enzyme digestion of expression2000 Marker;2:PCR analysis of express 3-1 表達載體質(zhì)粒 PCR 及雙酶切驗n enzyme digestion and PCR analysis o液 PCR 檢測的 pCAMBIA1304-AlsCBF1pro液 PCR 鑒定，見圖 3-2，PCR達載體質(zhì)粒已成功轉(zhuǎn)入 EHA105

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]‘赤霞珠’葡萄Vv5GT3基因啟動子的克隆及其對光照的響應(yīng)[J]. 邢冉冉,潘秋紅.  基因組學與應(yīng)用生物學. 2016(11)
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[7]3種野生扁桃油脂的理化性質(zhì)及脂肪酸組成研究[J]. 朱緒春,烏云塔娜,姜仲茂,黃夢真.  中國油脂. 2016(03)
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[9]大豆rbcS基因啟動子的克隆及在轉(zhuǎn)基因煙草中的功能缺失分析[J]. 崔喜艷,陳眾峰,范貝,韓琳,劉曉慶,董雅致,張治安.  西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2015(05)
[10]大豆中疫霉誘導性GmDRRP基因啟動子的克隆與功能分析[J]. 柴春月,林艷玲,吳育人,沈丹宇,竇道龍.  植物病理學報. 2015(01)

博士論文
[1]大豆、小麥抗逆相關(guān)Gm/TaAREB轉(zhuǎn)錄因子基因、啟動子克隆及功能鑒定[D]. 高世慶.中國農(nóng)業(yè)科學院 2007

碩士論文
[1]新疆野扁桃生物學特性、光合特性及抗寒性研究[D]. 邵麗珊.新疆農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]大白菜BrCYP79B2/B3啟動子克隆及特異性分析[D]. 葛佳麗.浙江農(nóng)林大學 2015
[3]新疆野扁桃PetSFB6基因的克隆及生物信息學分析和居群再生體系的建立[D]. 劉楠楠.新疆農(nóng)業(yè)大學 2015
[4]野扁桃主要生物學特性的觀測[D]. 徐葉挺.新疆農(nóng)業(yè)大學 2008



本文編號：2966982