目前在新疆野扁桃（Amygdalus Ledebouriana Schlecht）的生物學(xué)特征、生理生化檢測(cè)、資源分布等方面的研究中發(fā)現(xiàn)其有較強(qiáng)的抗寒抗旱性,但從基因表達(dá)調(diào)控角度探尋其抗逆性的研究較少。在基因的表達(dá)調(diào)控中,誘導(dǎo)型啟動(dòng)子能依據(jù)植物在特定的生長(zhǎng)環(huán)境下的需求,誘導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá),以響應(yīng)外界環(huán)境的改變,從而減少植物營(yíng)養(yǎng)的浪費(fèi)。因此,探討啟動(dòng)子的功能與作用機(jī)制將有助于對(duì)基因表達(dá)調(diào)控作用和信號(hào)傳導(dǎo)途徑的認(rèn)識(shí)。本試驗(yàn)從新疆野扁桃中克隆獲得了AlsCBF1pro（Amygdalus Ledebouriana Schlecht CBF1 promoter）,并進(jìn)行啟動(dòng)子的功能分析,主要的試驗(yàn)結(jié)果如下:1.用PCR法從新疆野扁桃中克隆得到片段大小是1791 bp的CBF1啟動(dòng)子（GenBank登錄號(hào)為KX785336）,命名為AlsCBF1pro,生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)其序列中含有20個(gè)與低溫脅迫相關(guān)的MYCCONSENSUSAT元件,及大量響應(yīng)鹽、激素、干旱等非生物脅迫的元件。2.構(gòu)建AlsCBF1pro的植物雙元表達(dá)載體,通過(guò)葉盤(pán)轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化煙草。篩選獲得陽(yáng)性植株并于低溫、干旱、ABA和鹽脅... 

【文章來(lái)源】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

野扁桃基因組DNAFig.2-1GenomicDNAofAmygadalusledebourianaSchlecht

選取 OD260/OD280值約 1.8的樣品核酸進(jìn)行啟動(dòng)子全長(zhǎng)圖 2-1 野扁桃基因組 DNAFig.2-1 Genomic DNA of Amygadalus ledebouriana Schlecht桃 CBF1 啟動(dòng)子的 PCR 擴(kuò)增桃 DNA 作模板，AlsCBF1-F 和 AlsCBF1-R 作引物擴(kuò)增出 1800 片段回收后純化，再連接到 pMD 19-T 載體上并轉(zhuǎn)化 DH5α，篩 PCR檢測(cè)（圖 2-2），保菌送測(cè)。測(cè)序結(jié)果顯示獲得 1791 bp大為 AlsCBF1pro。

切驗(yàn)證；M：DL2000 Marker；2：表triction enzyme digestion of expression2000 Marker;2:PCR analysis of express 3-1 表達(dá)載體質(zhì)粒 PCR 及雙酶切驗(yàn)n enzyme digestion and PCR analysis o液 PCR 檢測(cè)的 pCAMBIA1304-AlsCBF1pro液 PCR 鑒定，見(jiàn)圖 3-2，PCR達(dá)載體質(zhì)粒已成功轉(zhuǎn)入 EHA105

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]大豆、小麥抗逆相關(guān)Gm/TaAREB轉(zhuǎn)錄因子基因、啟動(dòng)子克隆及功能鑒定[D]. 高世慶.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007

碩士論文
[1]新疆野扁桃生物學(xué)特性、光合特性及抗寒性研究[D]. 邵麗珊.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]大白菜BrCYP79B2/B3啟動(dòng)子克隆及特異性分析[D]. 葛佳麗.浙江農(nóng)林大學(xué) 2015
[3]新疆野扁桃PetSFB6基因的克隆及生物信息學(xué)分析和居群再生體系的建立[D]. 劉楠楠.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
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本文編號(hào)：2966982