蘋果蠟質(zhì)相關(guān)基因MdCER1的分離及功能鑒定
發(fā)布時(shí)間:2021-01-08 13:29
陸生植物大約在4.5億年前由水生生物進(jìn)化而來,水生生物過渡到干燥的陸地環(huán)境中需要發(fā)育一層擴(kuò)散隔膜來幫助植物抵御干旱脅迫,于是植物進(jìn)化出角質(zhì)層。角質(zhì)層的出現(xiàn)是植物史上最偉大及最有創(chuàng)新性的進(jìn)化之一。角質(zhì)層由角質(zhì)及表皮蠟組成,表皮蠟在植物發(fā)育和植物與環(huán)境之間相互作用的過程中扮演了至關(guān)重要的角色,包括保護(hù)植物免于干燥、適應(yīng)變化莫測(cè)的溫度、抵抗紫外輻射以及昆蟲與病原菌的侵害。而蘋果蠟質(zhì)與生長(zhǎng)發(fā)育過程中的逆境及采后貯藏品質(zhì)等息息相關(guān):蘋果表皮的蠟質(zhì)能抵御真菌、昆蟲等造成的外部損傷,并且能阻止內(nèi)部組織水分蒸發(fā),提高采后貯藏品質(zhì),所以研究蘋果的蠟質(zhì)是非常有意義的。近年來,與蠟質(zhì)合成相關(guān)的調(diào)控機(jī)制被報(bào)道的越來越多,例如Drought Hypersensitive(DHS)基因、DEWAX基因、eceriferum(cer)相關(guān)基因以及MYB轉(zhuǎn)錄因子MYB106、MYB16、MYB30和MYB96等。蠟質(zhì)在調(diào)節(jié)植物的生物和非生物脅迫中發(fā)揮重要作用,但是這些蠟合成相關(guān)基因的研究主要集中在擬南芥和水稻中,在蘋果中少有研究。蠟質(zhì)對(duì)蘋果果實(shí)的品質(zhì)和抗性至關(guān)重要,因此,研究蘋果中蠟質(zhì)相關(guān)基因的功能意義重大。本研究中...
【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
擬南芥中超長(zhǎng)鏈脂肪酸在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上延伸(KunstandSamuels,2009)
山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文迫相關(guān)的 MYB 轉(zhuǎn)錄因子 MYB30 和 MYB96 能刺激超長(zhǎng)鏈脂肪酸的合成,過表達(dá)基因會(huì)導(dǎo)致表皮蠟的積累(Oshima et al., 2013),并且 E3 泛素連接酶 MYB30-InteraE3 Ligase 1(MIEL1)能夠通過調(diào)節(jié) MYB96 和 MYB30 的表達(dá),負(fù)調(diào)控表皮蠟合成(et al., 2017)。還有在黑暗條件下發(fā)現(xiàn)的 AP2/ERF 類轉(zhuǎn)錄因子 DEWAX,在表皮細(xì)胞達(dá),并且被黑暗所誘導(dǎo),過量表達(dá) DEWAX 導(dǎo)致葉、莖中的總蠟量比野生型中減少且改變了表皮層的超微結(jié)構(gòu),DEWAX 還能直接與蠟合成相關(guān)基因 FAR6、CER1、LACACLA2 和 ECR 的啟動(dòng)子結(jié)合并抑制其表達(dá)(Go et al., 2014)。
山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文3 結(jié)果與分析dCER1 基因的分子克隆南芥 AtCER1 基因序列在薔薇科基因組數(shù)據(jù)庫 GDR 網(wǎng)站進(jìn)行序列比ER1 基因得分最高(P < 0.05,E value < 1e 003)的一個(gè)蘋果基因(基00461409),將其命名為 MdCER1。以‘皇家嘎拉’蘋果的 cDNAAN 設(shè)計(jì)特異的上下游引物,通過 PCR 克隆得到一條大約 1,800 b將克隆得到的片段連接 PMD18-T 載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌 Trans 5α,性克隆,進(jìn)行測(cè)序分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),該片段開放閱讀框(ORF)長(zhǎng)度 GDR 網(wǎng)站預(yù)測(cè)的序列一致。該基因編碼 623 個(gè)氨基酸,其中包含 5 個(gè)酸性氨基酸、232 個(gè)疏水氨基酸及 168 個(gè)極性氨基酸,等電點(diǎn)為 72,331.57 Daltons。
本文編號(hào):2964678
【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
擬南芥中超長(zhǎng)鏈脂肪酸在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上延伸(KunstandSamuels,2009)
山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文迫相關(guān)的 MYB 轉(zhuǎn)錄因子 MYB30 和 MYB96 能刺激超長(zhǎng)鏈脂肪酸的合成,過表達(dá)基因會(huì)導(dǎo)致表皮蠟的積累(Oshima et al., 2013),并且 E3 泛素連接酶 MYB30-InteraE3 Ligase 1(MIEL1)能夠通過調(diào)節(jié) MYB96 和 MYB30 的表達(dá),負(fù)調(diào)控表皮蠟合成(et al., 2017)。還有在黑暗條件下發(fā)現(xiàn)的 AP2/ERF 類轉(zhuǎn)錄因子 DEWAX,在表皮細(xì)胞達(dá),并且被黑暗所誘導(dǎo),過量表達(dá) DEWAX 導(dǎo)致葉、莖中的總蠟量比野生型中減少且改變了表皮層的超微結(jié)構(gòu),DEWAX 還能直接與蠟合成相關(guān)基因 FAR6、CER1、LACACLA2 和 ECR 的啟動(dòng)子結(jié)合并抑制其表達(dá)(Go et al., 2014)。
山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文3 結(jié)果與分析dCER1 基因的分子克隆南芥 AtCER1 基因序列在薔薇科基因組數(shù)據(jù)庫 GDR 網(wǎng)站進(jìn)行序列比ER1 基因得分最高(P < 0.05,E value < 1e 003)的一個(gè)蘋果基因(基00461409),將其命名為 MdCER1。以‘皇家嘎拉’蘋果的 cDNAAN 設(shè)計(jì)特異的上下游引物,通過 PCR 克隆得到一條大約 1,800 b將克隆得到的片段連接 PMD18-T 載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌 Trans 5α,性克隆,進(jìn)行測(cè)序分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),該片段開放閱讀框(ORF)長(zhǎng)度 GDR 網(wǎng)站預(yù)測(cè)的序列一致。該基因編碼 623 個(gè)氨基酸,其中包含 5 個(gè)酸性氨基酸、232 個(gè)疏水氨基酸及 168 個(gè)極性氨基酸,等電點(diǎn)為 72,331.57 Daltons。
本文編號(hào):2964678
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