發(fā)布時(shí)間：2020-11-16 14:35

　　 ‘夏黑’原產(chǎn)于日本,是以巨峰為母本,無(wú)核白為父本雜交選育而成的一個(gè)三倍體早熟無(wú)核葡萄品種,其果實(shí)品質(zhì)優(yōu)、無(wú)核、豐產(chǎn)性好,商品性佳、口感好,種植范圍較為廣泛,在全國(guó)大部分葡萄產(chǎn)區(qū)都有種植。2008年在金華市寨春農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司發(fā)現(xiàn)‘夏黑’早熟芽變株系,芽變株系葡萄穗形美、果粒著色早,成熟時(shí)間比‘夏黑’提早7-10天,成熟度高,果實(shí)著色均勻呈藍(lán)黑色,品質(zhì)優(yōu)良,有更高的商品價(jià)值和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,具有更大的推廣價(jià)值。本試驗(yàn)以‘夏黑’芽變株系(‘天工墨玉’)為材料,與‘夏黑’葡萄進(jìn)行生物學(xué)特性比較、分子輔助鑒定以及探究其果實(shí)發(fā)育和品質(zhì)的形成規(guī)律,并應(yīng)用高通量RNA-seq技術(shù)鑒定‘天工墨玉’與‘夏黑’在轉(zhuǎn)錄組水平的差異,為葡萄新品種認(rèn)定及育種提供科學(xué)依據(jù)。研究結(jié)果如下:1.植物學(xué)性狀與生物學(xué)性狀比較(1)植物學(xué)性狀方面,‘天工墨玉’與‘夏黑’葡萄區(qū)別表現(xiàn)在嫩梢葉片顏色、幼嫩葉片絨毛上,‘天工墨玉’的嫩梢葉淡紅褐色(五葉期,‘夏黑’紅褐色),幼葉背部絨毛疏(‘夏黑’中等密)。(2)果實(shí)經(jīng)濟(jì)性狀方面,同一時(shí)期‘天工墨玉’的可溶性固形物含量均高于‘夏黑’,完全成熟可溶性固形物含量為18%-23%,兩個(gè)品種完全成熟時(shí)果實(shí)品質(zhì)差異不顯著。(3)物候期方面,‘天工墨玉’比‘夏黑’葡萄提早7-10天成熟。(4)生長(zhǎng)結(jié)果習(xí)性方面,芽變株系的花芽分化較好,萌芽率和結(jié)果枝率略高于‘夏黑’葡萄,差異不顯著。(5)抗病性方面,‘天工墨玉’抗酸腐病、灰霉病、霜霉病、枝干潰瘍病能力較‘夏黑’強(qiáng)。2.果實(shí)發(fā)育和品質(zhì)的形成規(guī)律對(duì)‘夏黑’早熟芽變和‘夏黑’葡萄不同發(fā)育時(shí)期的果實(shí)測(cè)量了相關(guān)指標(biāo),包括平均單粒質(zhì)量、平均縱徑、平均橫徑、果皮花色苷、酸類物質(zhì)、糖類物質(zhì)、總糖、可滴定酸、果實(shí)中的總酚和黃酮類物質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化。從果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育變化規(guī)律來看,兩者的生長(zhǎng)發(fā)育和果實(shí)品質(zhì)變化趨勢(shì)基本一致,但也存在差異�！旃つ瘛恼崽恰⒐�、葡萄糖、總糖在整個(gè)發(fā)育期含量基本都高于’夏黑’葡萄,升糖速度快;‘天工墨玉’的蘋果酸、酒石酸、可滴定酸含量在果實(shí)轉(zhuǎn)色后迅速下降且其含酸量大部分都低于‘夏黑’,可滴定酸含量比‘夏黑’提早一周開始下降,降酸速度快;果實(shí)中總酚含量呈下降趨勢(shì),‘天工墨玉’的降幅要小于‘夏黑’葡萄,發(fā)育初期含量低于‘夏黑’,成熟期略高于‘夏黑’;‘天工墨玉’葡萄轉(zhuǎn)色期比‘夏黑’葡萄提早7-10天,同一時(shí)期兩者果皮花色苷含量差異極顯著。3.分子輔助鑒定ISSR分子標(biāo)記鑒定方面,利用ISSR引物對(duì)‘天工墨玉’和‘夏黑’DNA進(jìn)行擴(kuò)增,根據(jù)多態(tài)性篩選出26條ISSR引物及7對(duì)引物組合,分析結(jié)果表明兩個(gè)材料擴(kuò)增出的等位基因帶型完全一致,說明‘天工墨玉’與‘夏黑’遺傳背景非常相近。SSR分子標(biāo)記鑒定方面,在19條染色體上篩選出了40對(duì)穩(wěn)定性好且多態(tài)性較好的SSR引物,結(jié)果表明,引物E10擴(kuò)增的條帶不一致,表明二者存在差異條帶,說明二者在基因組DNA水平存在差異。4.RNA-seq鑒定應(yīng)用高通量測(cè)序RNA-seq技術(shù)對(duì)‘天工墨玉’與‘夏黑’果實(shí)5個(gè)發(fā)育期(花后2周、4周、5周、8周、10周)的RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,結(jié)果表明由于發(fā)育期不同,存在一定量的相關(guān)差異基因。
【學(xué)位單位】：浙江師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S663.1
【部分圖文】：

圖 2.1 ‘夏黑’與‘天工墨玉’新梢葉片比較Figure2.1 Comparison of tender tip leaves of Summer Black and mutant strain夏 黑夏 黑天工墨玉天工墨玉

圖 2.2 ‘夏黑’（左）與‘天工墨玉’（右）五葉期嫩梢比較 Comparison of tender shoots of Summer Blacke (left) and the muat five-leaf stage

無(wú)光澤。幼葉淺紅褐色（‘夏黑’深紅褐色），帶淺紅褐色暈（圖2.3、2.4)；上表面有光澤，下表面密生絲毛（較‘夏黑’疏）（圖 2.1）。成齡葉片近圓形，較大，縱徑約為 20.02cm，橫徑約為 25.90cm，成齡葉片上泡狀突起弱，葉表面顏色墨綠色，背面有一層稀疏的絲狀絨毛，葉片正面主脈花色苷顯色強(qiáng)度較弱。葉片為 3 或 5 裂，上、下裂刻深度深，上裂刻裂片重疊，下裂刻裂片開張，裂刻基部窄拱形（圖 2.5）。成齡葉片上鋸齒性狀為兩側(cè)直與兩側(cè)凹皆有，鋸齒長(zhǎng)約為 1.43cm，寬約為 1.66cm。葉柄洼多為 U 形。新梢姿態(tài)較直立
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