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12個(gè)堇菜屬種質(zhì)生殖生物學(xué)及遠(yuǎn)緣雜交親和性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-11-13 00:23
   堇菜屬(Viola)植物多數(shù)為多年生,少數(shù)為二年生草本。中國(guó)堇菜屬野生資源豐富,約有110種,很多具有三色堇栽培種少有的葉片奇特、耐熱耐寒性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。遠(yuǎn)緣雜交是培育新品種的重要途徑,探討堇菜屬植物遠(yuǎn)緣雜交的親和性,對(duì)于培育綜合性狀優(yōu)良的堇菜屬新種質(zhì)具有重要意義。本研究以12個(gè)堇菜屬種質(zhì)為材料,對(duì)其核型進(jìn)行了分析,研究了生殖生物學(xué)特性,在此基礎(chǔ)上,優(yōu)選相關(guān)的組合進(jìn)行雜交,采用苯胺藍(lán)染色熒光觀察法、石蠟切片法觀察分析了堇菜屬雜交后授粉受精及胚胎發(fā)育情況,并對(duì)其雜交后代進(jìn)行了鑒定,主要結(jié)論如下:6個(gè)野生堇菜核型分析結(jié)果如下:西山堇菜核型公式為2n=2x=24=10m+14sm,斑葉堇菜核型公式為2n=2x=24=14m+10sm,裂葉堇菜核型公式為2n=2x=24=20m+2st+2sm,雞腿堇菜核型公式為2n=2x=20=8sm+12m,早開(kāi)堇菜核型公式為2n=4x=48=36sm+12m,紫花地丁的核型公式為2n=4x=48=36sm+12m。核型不對(duì)稱(chēng)系數(shù)范圍為:60.99%~65.57%。根據(jù)最長(zhǎng)與最短染色體長(zhǎng)度比值和臂比大于2的染色體比例兩項(xiàng)特征,西山堇菜、斑葉堇菜、裂葉堇菜、雞腿堇菜、早開(kāi)堇菜的核型分類(lèi)均為2A型,紫花地丁屬于3A核型。6個(gè)野生堇菜種質(zhì)的進(jìn)化程度高低為:紫花地丁早開(kāi)堇菜西山堇菜斑葉堇菜雞腿堇菜裂葉堇菜。6個(gè)野生堇菜、3個(gè)角堇、3個(gè)大花三色堇種質(zhì)開(kāi)花時(shí)柱頭均高于花藥,柱頭可授性和散粉時(shí)間有重疊;ǚ/胚珠比、雜交指數(shù)以及授粉試驗(yàn)結(jié)果表明:早開(kāi)堇菜、紫花地丁繁育系統(tǒng)為自交親和的兼交系統(tǒng),有時(shí)需要傳粉者;其余10個(gè)種質(zhì)的繁育系統(tǒng)均為兼性異交,部分自交親和,需要傳粉者。通過(guò)掃描電鏡觀察了12個(gè)堇菜屬種質(zhì)花粉表觀形態(tài),結(jié)果表明:6個(gè)野生堇菜花粉粒整體觀為長(zhǎng)橢球形或橢球型,花粉赤道面觀長(zhǎng)橢圓形,兩端漸窄,極面觀三裂圓形或近圓形,花粉表面較為光滑,有穿孔;角堇和大花三色堇花粉粒表觀形狀為矩形或五角柱形,花粉赤道面觀長(zhǎng)方形或五菱形,極面觀四裂正方形或五角柱形,花粉具4-5孔溝,萌發(fā)溝以等間距環(huán)狀分布,外壁紋飾為皺波狀紋飾。早開(kāi)堇菜花粉萌發(fā)適宜的培養(yǎng)基為:蔗糖280 g/L+硼酸240 mg/L+GA_3 90mg/L+Ca(NO_3)_2 200 mg/L;大花三色堇花粉萌發(fā)適宜的培養(yǎng)基為:240 g/L蔗糖+260mg/L硼酸+GA_3 90 mg/L+Ca(NO_3)_2 200 mg/L。適宜斑葉堇菜、裂葉花粉萌發(fā)的培養(yǎng)基為:285 g/L~(-1)蔗糖+250 mg/L~(-1)硼酸+50 mg/L~(-1) GA_3+200 mg/L~(-1) Ca(NO_3)_2。不同貯藏溫度對(duì)花粉生活力的影響差異較大,﹣80℃貯藏效果最佳。3種保護(hù)酶活性對(duì)裂葉堇菜、斑葉堇菜花粉萌發(fā)率的影響依次為:SODCATPOD。苯胺藍(lán)法觀察花柱及石蠟切片觀察子房結(jié)果表明:授粉后,花粉萌發(fā)少、花粉管在花柱花粉管通道內(nèi)不能順利生長(zhǎng)是JB-1-1-2×西山堇菜、EYO-1-2-1-5×西山堇菜、EYO-1-2-1-5×早開(kāi)堇菜雜交不育的根本原因。石蠟切片觀察子房結(jié)果表明:胚乳退化解體、胚囊中空、胚胎發(fā)育缺乏營(yíng)養(yǎng)供給是EYO-1-2-1-5×早開(kāi)堇菜、JB-1-1-2×斑葉堇菜、DFM-16-2-2×裂葉堇菜、E01×早開(kāi)堇菜、PXP-BT-D-1-1-4×早開(kāi)堇菜、EYO-1-2-1-5×西山堇菜、JB-1-1-2×西山堇菜雜交不育的根本原因。通過(guò)對(duì)10個(gè)雜交后代表型性狀鑒定,發(fā)現(xiàn)雜交后代偏母性遺傳較多,初步判斷早開(kāi)堇菜×E01、早開(kāi)堇菜×PXP-BT-1-1-4、西山堇菜×08H、西山堇菜×PXP-BT-D-1-1-4、西山堇菜×JB-1-1-2、斑葉堇菜×JB-1-1-2為真正的遠(yuǎn)緣雜種,但還需借助分子標(biāo)記等手段來(lái)進(jìn)一步確定。
【學(xué)位單位】:河南科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類(lèi)】:S682.19
【部分圖文】:

核型模式圖,種質(zhì),堇菜,核型分析


第二章 6 個(gè)野生堇菜種質(zhì)核型分析4 5.85+3.38=9.22 1.73 sm M25 5.45+4.06=9.50 1.34 m M26 5.44+3.42=8.87 1.59 sm M27 4.96+2.82=7.78 1.76 sm M18 4.85+2.81=7.66 1.73 sm M19 4.80+3.26=8.06 1.47 m M110 4.58+2.88=7.46 1.59 m M111 4.31+2.05=6.36 2.10 sm M112 4.01+1.78=5.79 2.25 sm S

散布圖,堇菜屬,不對(duì)稱(chēng)性,散布圖


圖 2-2 6 個(gè)堇菜屬種質(zhì)的核型不對(duì)稱(chēng)性程度散布圖Fig. 2-2 karyotype asymmetry degree of scatter diagram of 6 Viola germies山堇菜、B:斑葉堇菜、C:裂葉堇菜、D:雞腿堇菜、E:早開(kāi)堇菜、F:紫花.hancockii; B:V.variegata; C:V.dissecta ; D:V.acumminata; E: V. prionF: V. philippica2,坐標(biāo)點(diǎn)的相對(duì)位置形象地反映出堇菜屬種質(zhì)的不對(duì)稱(chēng)性和進(jìn)材料其核型不對(duì)稱(chēng)性越強(qiáng),進(jìn)化程度越高。相反,越靠近左下性越低,其進(jìn)化程度也相對(duì)也較低。由圖 2-2 可以看出,紫花角坐標(biāo)圖上的分布位置偏右上方,進(jìn)化程度較高,為較進(jìn)化類(lèi)于兩者之間,進(jìn)化程度平穩(wěn);而西山堇菜、早開(kāi)堇菜位于坐標(biāo)低,為較原始類(lèi)型。與討論

堇菜,斑葉,紫花地丁,雞腿


圖 3-1 12 個(gè)試驗(yàn)材料Fig. 3-1 12 test materials菜(Viola hancockii); b:斑葉堇菜(Viola uariegataisch);c:雞腿堇菜(Violaa);d:裂葉堇菜(Viola dissecta);e:紫花地。╒iola prionantha);f:早開(kāi)堇菜(Va);g:E01(Viola cornuta);h:08H(Viola cornuta);i:JB-1-2-2(Viola cornuta);-1-5(Viola wittrockiana);k:PXP-BT-D-1-1-4(Viola wittrockiana);l:DFM-16-2-2(ana)量性狀調(diào)查于盛花期對(duì) 12 份供試材料進(jìn)行主要數(shù)量性狀調(diào)查,每份材料隨機(jī)選取 3 單株,性狀的測(cè)定項(xiàng)目如下:儀器:刻度尺長(zhǎng)尺、游標(biāo)卡尺。型:株高與株幅的比值;高:自植株基部至頂端的自然高度;
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本文編號(hào):2881453

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