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狹葉黃芩再生體系建立及茉莉酸甲酯對其抗旱影響的研究

發(fā)布時間:2020-10-23 19:34
   東北地區(qū)地理環(huán)境特殊,冬季漫長而寒冷,夏季溫暖濕潤卻短暫,能夠在東北露地越冬的植物種類較少,自然分布在東北地區(qū)的狹葉黃芩(Scutellaria regeliana Nakai)為多年生草本,花為紫色,是一種優(yōu)良的野生觀賞植物,可作為地被植物在園林中應(yīng)用。本文以狹葉黃芩為研究對象,建立不定芽再生體系以及愈傷途徑再生體系,并研究外源施加茉莉酸甲酯對干旱脅迫下狹葉黃芩生理生化的影響,為狹葉黃芩野生資源在妥善的保護基礎(chǔ)上開發(fā)應(yīng)用以及在干旱地區(qū)的園林應(yīng)用提供一定的理論支持,主要研究結(jié)果如下:1.狹葉黃芩的莖段最佳消毒方式和最佳取材時期:最佳消毒方式為75%酒精15s+0.1%HgCl2消毒5min,污染率最低為8.25%;4月為狹葉黃芩外植體最佳取材時期,其分化率可達88.89%。2.狹葉黃芩帶芽莖段再生體系的建立:適合狹葉黃芩誘導(dǎo)腋芽的基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基,外植體生長狀態(tài)更佳;腋芽萌發(fā)的最佳培養(yǎng)基為:MS+1 mg/L6-BA+1 mg/LNAA,分化率可達73.66%;芽增殖的最佳培養(yǎng)基MS+1 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,其芽增殖倍數(shù)為5.85;最佳生根培養(yǎng)基為:1/2MS+0.2 mg/LIBA,生根率可達到74.07%;試管苗移栽時發(fā)現(xiàn)蛭石:珍珠巖:園土比例按1:1:3的體積比搭配使用,移栽成活率最高達到79.24%,并且植株生長旺盛。3.狹葉黃芩愈傷再生體系的建立:葉片最佳消毒方式為75%酒精15s+1%NaClO消毒5min,其污染率最低為20%;誘導(dǎo)莖段愈傷的最佳培養(yǎng)基:MS+1 mg/L6BA+1 mg/L2-4D,誘導(dǎo)率為91.33%;以狹葉黃芩葉片作為外植體誘導(dǎo)愈傷組織時,發(fā)現(xiàn)所有的處理組均未誘導(dǎo)出愈傷組織。對于狹葉黃芩愈傷組織在增殖過程中的出現(xiàn)的褐化的現(xiàn)象,本研究發(fā)現(xiàn)添加0.5g/L碳粉的培養(yǎng)基,愈傷組織褐化率最低為24.44%,存活率最高為75.56%;適宜愈傷增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+2 mg/L6-BA+0.5 mg/L2-4D+碳粉0.5g/L,其增殖倍數(shù)最高為3.29;在所有的處理組中,狹葉黃芩愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基為 MS+1 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,分化率為 44.71%。4.茉莉酸甲酯對干旱脅迫下狹葉黃芩光合特性的影響:外源施加茉莉酸甲酯增強了狹葉黃芩的凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率;對三者主要起到促進作用。降低了胞間CO2濃度,其中9d的MJ4處理組對各項光合指標的影響最為顯著。5.茉莉酸甲酯對干旱脅迫下狹葉黃芩的生理指標的影響:在外源施加不同濃度的茉莉酸甲酯后,整體看來,處理組的游離脯氨酸含量在1d和3d時與CK相近,而在以后的處理時間中低于CK,這說明外源施加茉莉酸甲酯能夠有效抑制游離脯氨酸含量的上升,從而緩解干旱脅迫對狹葉黃芩產(chǎn)生的不良影響?扇苄缘鞍缀吭谇6d的處理中與CK相近或低于CK,而在以后的處理中顯著高于CK,說明茉莉酸甲酯需要較長的時間才能引起可溶性蛋白含量的增加。本研究中,外源施加茉莉酸甲酯從整體來看能夠提高SOD、POD、CAT活性,但不同濃度的作用效果存在差異。PPO活性也均高于CK,外源施加茉莉酸甲酯對狹葉黃芩的PAL整體表現(xiàn)出促進作用。對狹葉黃芩的光合參數(shù)和生理指標的研究結(jié)果表明,經(jīng)外源施加的茉莉酸甲酯處理能夠有效減緩干旱脅迫對狹葉黃芩的不良影響,但對光合指標和生理指標影響最為顯著的時間以及濃度并不一致。其中9d的MJ4處理組對狹葉黃芩的各項光合指標的影響最為顯著,而對生理指標影響最為顯著的處理時間為12d的各處理組。
【學(xué)位單位】:東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:S688.4
【部分圖文】:

組織培養(yǎng),愈傷,褐化率,途徑


表3-6不同激素配比對狹葉黃芩愈傷組織分化影響??Table?3-6?Effect?of?various?hormone?rations?on?callus?differentiation?for?紀//ark?Nakai??6^BA?NAA?分化率?平均不定芽??處理號?褐化率(%)??(mg/L)?(mg/L)?(%)?數(shù)(個)??1?05?〇7l?15.24±4.65de?13.29±4.08d?1.13±1.03d??2?0.5?0.2?10.74±2.61ef?12.64?士?2.3?Id?1.07±0.12d??3?0.5?0.5?20.17±5.43cd?19.50?士?9.81abcd?2.67?士?2.52bcd??4?0.5?1?12.50±2.50ef?24.72土?4.59abc?2.40?土?0.53bcd??5?1?0.1?7.98?士?4.41f?11.60?士?1.53d?1.43±0.51cd??6?1?0.2?15.51?士?1.54de?12.26?士?2.44d?1.50?土?0.50cd??7?1?0.5?44.71±1.61a?17.53±1.19bcd?6.33?士?0.58a??8?1?1?20.00土?5.00cd?26.39±5.55ab?3.67±2.08bc??9?2?0.1?16.58士?1.94de?19.58?士?0.72abcd?2.23?土?1.31bcd??10?2?0.2?10.84士?3.63ef?28.56土?8.69a?1.47?士?0.45cd??11?2?0.5?23.70士?5
【參考文獻】

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本文編號:2853453

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