無(wú)核葡萄由于其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),深得消費(fèi)者喜愛(ài)。本試驗(yàn)中以無(wú)核葡萄品種為母本,以部分香味及釀酒葡萄品種作父本,總共完成12個(gè)雜交組合,在前人研究的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探討了雜交組合中親本基因型、取樣時(shí)間、外源添加多效唑?qū)ε咄炀鹊挠绊?對(duì)胚挽救技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化。同時(shí),對(duì)胚挽救過(guò)程中出現(xiàn)的畸形苗進(jìn)行進(jìn)一步分類研究,并對(duì)其進(jìn)行轉(zhuǎn)化利用,以期找到適合的轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基,提高對(duì)畸形苗的利用,進(jìn)而為提高胚挽救育種效率提供依據(jù)。所得結(jié)果如下:1、親本基因型影響胚挽救胚發(fā)育率和成苗率�；鹧鏌o(wú)核、昆香無(wú)核、奇妙無(wú)核作母本時(shí)發(fā)芽率和成苗率都相對(duì)較高;而克瑞森無(wú)核和無(wú)核白雞心用作胚挽救母本則不適宜。此外,父本的選擇也對(duì)胚挽救效果產(chǎn)生影響。分別用玫瑰香和北冰紅與火焰無(wú)核雜交,玫瑰香優(yōu)于北冰紅;當(dāng)昆香無(wú)核做母本,泰山-2和北冰紅作父本時(shí),北冰紅優(yōu)于泰山-2,當(dāng)奇妙無(wú)核作母本,陽(yáng)光玫瑰、雙優(yōu)和北冰紅做父本時(shí),陽(yáng)光玫瑰和雙優(yōu)優(yōu)于北冰紅。2、外源添加多效唑?qū)ε咄炀刃Ч挠绊憽Ｔ谂咧榘l(fā)育階段,以MM3+1.5mg/LPAC可以提高成胚率,火焰無(wú)核×北冰紅的成胚率達(dá)到23.33%,昆香無(wú)核×泰山-2成胚率達(dá)到53.33%。在胚萌發(fā)階段向基本培養(yǎng)基WPM添加1μmol/LPAC可以提高發(fā)芽率和成苗率,其中紅無(wú)籽露×北冰紅發(fā)芽率和成苗率分別達(dá)到70%和35%,紅無(wú)籽露×昆香無(wú)核成苗率達(dá)到40%。3、各雜交組合最佳采樣時(shí)期分別為:火焰無(wú)核×玫瑰香為授粉后39天,昆香無(wú)核×北冰紅為授粉后46天,奇妙無(wú)核×陽(yáng)光玫瑰為授粉后40天,紅寶石無(wú)核×北冰紅和奇妙無(wú)核×雙優(yōu)為授粉后41天。4.由于胚挽救過(guò)程中常常產(chǎn)生畸形苗,當(dāng)把畸形苗接種到轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基后,部分可重新生長(zhǎng)成正常苗。而且組合不同,最適宜的轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基也不同。其中,以基本培養(yǎng)基W PM+0.2mg/LIBA對(duì)火焰無(wú)核×玫瑰香組合的畸形苗轉(zhuǎn)化效率高,達(dá)到16.67%,以基本培養(yǎng)基WPM+0.5mg/LIBA對(duì)昆香無(wú)核×北冰紅畸形苗的轉(zhuǎn)化效率高,達(dá)到40.09%。5.本試驗(yàn)累計(jì)接種胚珠14687顆,剝出裸胚1855個(gè),發(fā)芽1089個(gè),獲得450個(gè)株系,總成苗率達(dá)3.06%。繼代煉苗706棵,成活628棵,成活率達(dá)88.95%,2017年向大田移栽葡萄苗288棵,成活240棵,移栽成活率達(dá)83.33%。
【學(xué)位單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S663.1
【部分圖文】：

性炭 1g/L＋瓊脂 7g/L）的罐頭瓶?jī)?nèi)，觀察繼代情況（圖 2-1 I-J）。 煉苗及移栽大田當(dāng)幼胚成苗之后，對(duì)其進(jìn)行繼代擴(kuò)繁，保存株系之后就可以對(duì)胚挽救苗進(jìn)行煉煉苗移栽的時(shí)期很關(guān)鍵，一般情況下，選擇春季進(jìn)行馴化煉苗，春末夏初低溫（20℃），即可移栽定植大田（圖 2-1 K-L）。馴化前，先將所需基質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)缽進(jìn)行高溫滅菌，以殺掉可能攜帶的病菌。移栽先擰開(kāi)瓶蓋，取出葡萄幼苗，洗掉根部殘留的培養(yǎng)基，移栽于營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi)，用記好株系。澆透水分，再用塑料杯遮住幼苗保溫保濕，置于人工氣候室觀察煉苗-2 周，每天早上揭蓋把塑料杯壁上的水分甩干，并把葡萄苗壞死的葉片用剪刀周后，當(dāng)觀察到幼苗將杯蓋頂起的時(shí)候，揭掉塑料杯，讓葡萄苗繼續(xù)生長(zhǎng) 2-3底五月初，當(dāng)氣溫回升后，并且觀察到葡萄苗根部開(kāi)始木質(zhì)化的時(shí)候移栽到大田的時(shí)候，選擇陰天上午，挖好坑以后，快速將幼苗連同基質(zhì)一同取出，置埋土掛牌，標(biāo)記好株系。定植完畢以后，澆透水分，當(dāng)棚內(nèi)溫度繼續(xù)升高的遮陽(yáng)網(wǎng)，有利于幼苗存活，同時(shí)注意防范田間的病蟲(chóng)害。

圖 2-2 多效唑?qū)Τ膳呗实挠绊懀ˋ-B）不同濃度多效唑處理的火焰無(wú)核×北冰紅及昆香×泰山-2 的胚珠（C-D）兩個(gè)組合各自的成胚率Figure 2-2 The effects of different concentrations of PAC on ovules(A, B)Ovules of cross FlameSeedless×Beibinghong and Kunxiang Seedless×Taishan-2 after 65 days darkness culture (C,D) Embryformation rate of the two crosses.3.3.2 多效唑?qū)Πl(fā)芽率的影響從圖 2-3 我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)向胚培養(yǎng)基中添加不同濃度多效唑時(shí)，對(duì)于紅無(wú)籽露×昆個(gè)組合，當(dāng)濃度為 0.2μmol/L 時(shí)，發(fā)芽率最高為 90%，當(dāng)濃度為 1μmol/L 時(shí)，成苗高為 40%，此外，該組合的發(fā)芽率隨著多效唑濃度的增加呈先增后降再增的趨勢(shì)，率卻呈先降后升的趨勢(shì)，因此用多效唑處理該組合的適宜濃度有待進(jìn)一步研究。對(duì)交組合紅無(wú)籽露×北冰紅而言，當(dāng)濃度為 1μmol/L 時(shí)，組合發(fā)芽率最高，為 70%，率也最高，為 35%，當(dāng)不添加任何濃度的多效唑時(shí)，發(fā)芽率最低，為 52.63%，成也最低，為 15.79%，而且，該組合的發(fā)芽率和成苗率隨著多效唑濃度的增加呈遞勢(shì)，由此我們初步推斷用多效唑處理該組合時(shí)時(shí)，向培養(yǎng)基中外源添加 1μmol/LPA較適宜。此外我們發(fā)現(xiàn)多效唑處理過(guò)的胚其發(fā)芽長(zhǎng)成苗的時(shí)候和對(duì)照在外形上并無(wú)。

圖 2-3 不同濃度多效唑?qū)Πl(fā)芽率的影響（A-B）不同濃度處理的紅無(wú)籽露×北冰紅及紅無(wú)籽露×昆香從胚成苗的過(guò)程（C-D）兩個(gè)雜交組合各自的發(fā)芽率及成苗率Figure 2-3. The effects of different concentrations of PAC on embryos (A,B) The process of an embryogrow into a palntlet of two Cross Sultanina Rose ×Beibinghong and Sultanina Rose ×kunxiang Seedless(C,D) The germination and seedling rate of the two crosses2.3.4 胚挽救的煉苗和移栽2017 年三月份我們總共煉苗 349 棵，煉苗成活 288 棵，總煉苗成活率達(dá) 82.52%（表 2-5）。五月初我們總共向大棚內(nèi)移栽 288 棵苗，最終成活 240 棵苗，總移栽成活率達(dá) 83.33%，移栽成活率最大的是克瑞森無(wú)核×北冰紅的組合，達(dá) 100%，其次是紅無(wú)籽露×北冰紅和昆香無(wú)核×北冰紅兩個(gè)組合，移栽成活率分別為 95.83%和 93.33%，移栽成活率最小的組合是火州紅玉×昆香和紅無(wú)籽露×昆香無(wú)核，都只有 66.67%。2018 年總共煉苗 357 棵，煉苗成活 338 棵，總煉苗成活率達(dá) 94.68%，煉苗成活率最大的組合是紅寶石無(wú)核×北冰紅，達(dá)到 99.19%，煉苗成活率最低的組合是昆香×泰山-2，為 90.91%。表 2-5 2017 年煉苗移栽情況Table 2-5 Transplanting of seedlings in 2017雜交組合煉苗數(shù)移栽數(shù)成活數(shù)煉苗成活率（%）移栽成活率（%）

【參考文獻(xiàn)】

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