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三種草坪草的EMS誘變及其突變體的初步篩選與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2020-09-24 20:55
   草坪草是最為常見的園林景觀植物之一,應(yīng)用廣泛,可用于美化、改善和保護(hù)城市環(huán)境。近年來,伴隨著溫室效應(yīng)以及城市熱島效應(yīng)的加劇,城市高溫天氣頻繁出現(xiàn),環(huán)境干旱問題也時(shí)有發(fā)生,而高溫和干旱都是限制草坪草生長的主要因素。這些問題使得草坪草的景觀質(zhì)量明顯下降。因此,培育耐旱耐熱的新品種草坪草具有相當(dāng)重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)意義。本試驗(yàn)以多年生黑麥草(Lolium perenne L.)、高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)和溝葉結(jié)縷草(Zoysia matrella(L.)Merr.)這三種草坪草為試驗(yàn)材料,對(duì)其進(jìn)行了EMS誘變后,再通過傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)分析、DNA分子標(biāo)記技術(shù)和生理指標(biāo)分析對(duì)變異株進(jìn)行了初步篩選和鑒定,為草坪草耐干旱耐高溫的新品種的選育奠定基礎(chǔ)。本研究的主要研究結(jié)果如下:1、三種草坪草的EMS誘變條件篩選。用不同濃度的EMS和不同處理時(shí)長進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),設(shè)定EMS濃度梯度分別為:0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%;處理時(shí)長梯度分別為0、12、24、36、48、60h。對(duì)三種草坪草的種子進(jìn)行不同梯度組合的誘變處理,再通過分別統(tǒng)計(jì)種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、移栽成活率等指標(biāo),最終確定了適宜的EMS處理組合為處理組T_(4-3)(0.8%EMS,36h)。2、草坪草誘變苗的篩選。在誘變苗M_1代三葉期時(shí),進(jìn)行為期2周的田間干旱脅迫處理后,觀察到部分誘變苗的葉片能直立生長且無萎焉情況,其中有10株多年生黑麥草誘變苗、15株高羊茅誘變苗、12株溝葉結(jié)縷草誘變苗,然后對(duì)這些表型良好的誘變苗進(jìn)行編號(hào)且單株收集種子。在M_2代三葉期時(shí),對(duì)編號(hào)植株進(jìn)行了形態(tài)學(xué)分析和SCOT分子標(biāo)記分析。形態(tài)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)其中有葉面變窄、根長增長、葉色變異等變異植株;通過SCOT分子標(biāo)記分析,在5條引物的SCOT擴(kuò)增結(jié)果中出現(xiàn)了較多的特異條帶,這一結(jié)果表明篩選的誘變植株在遺傳組成上也發(fā)生了遺傳變異。3、突變體的耐旱性和耐熱性評(píng)價(jià)。植物的形態(tài)特征與其抗逆性往往存在不可分割的聯(lián)系,例如葉面變窄會(huì)減少植物的蒸騰作用,根長增長有利于植物對(duì)水分和無機(jī)鹽的吸收,這些都有利于植物在高溫干旱氣候下生存。因此,本實(shí)驗(yàn)選取M_2代中發(fā)生了遺傳變異的葉面變窄型和根長增長型的突變體,進(jìn)行耐旱性和耐熱性評(píng)價(jià)。在不同處理下,對(duì)三種草坪草的突變體和對(duì)照苗的相對(duì)電導(dǎo)率(EL)、丙二醛(MDA)含量、葉綠素(Chl)含量、脯氨酸(Pro)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性進(jìn)行了測定分析。經(jīng)過數(shù)據(jù)的整理分析,最終得到五株耐旱突變體(A-5、B-7、B-9、C-1、C-11)、三株耐熱突變體(A-8、B-9、C-11)和一株耐旱耐熱突變體(B-9)。
【學(xué)位單位】:西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S688.4

【參考文獻(xiàn)】

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