本研究選用西南林業(yè)大學(xué)試驗(yàn)地中的火焰、哈路比、瑞路比、里約紅、星路比的8-9年生葡萄柚新生莖段為試驗(yàn)材料,開展了成年態(tài)葡萄柚莖段離體誘導(dǎo)試驗(yàn),通過(guò)莖段離體誘導(dǎo)的產(chǎn)生再生不定芽作為接穗,對(duì)嫁接方式進(jìn)行改進(jìn)以提高莖尖微芽嫁接成活率,對(duì)嫁接苗進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè),最終獲得葡萄柚脫毒苗。主要的結(jié)果如下:1、通過(guò)對(duì)不同影響因子進(jìn)行對(duì)比,改進(jìn)了葡萄柚成年態(tài)莖段離體培養(yǎng)的消毒方法。試驗(yàn)表明:葡萄柚外植體消毒取大小2cm左右的莖段最佳,不同品種的葡萄柚消毒后污染率和萌芽率有差異,瑞路比污染率最高為68.8%,星路比萌芽率最高為21.3%;采用75%酒精先消毒20S,然后直接用5%NaClO消毒20min,靜置48h后,用同樣的方法二次消毒能有效降低莖段培養(yǎng)的污染率,污染率為21.3%,萌芽率為52.5%;將二次消毒的莖段接種于WPM+100mg/L半胱氨酸培養(yǎng)基中莖段污染率為15.6%,萌芽率為83.1%,能有效緩解多次消毒后的褐化現(xiàn)象,并提高萌芽率。2、葡萄柚的成年態(tài)莖段離體誘導(dǎo)培養(yǎng)試驗(yàn)中,WPM+0.2mg/L NAA+1.0mg/L6-BA+0.2mg/L GA_3+蔗糖40g/L為腋芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基,誘導(dǎo)率為78.89%,誘導(dǎo)的再生芽長(zhǎng)勢(shì)旺、發(fā)育好,生長(zhǎng)速度快。3、在提高砧木發(fā)芽率的研究中,MS培養(yǎng)基最適合曼賽龍柚種子萌芽,出苗率為81.7%。NAA、6-BA、GA_3三種激素均能縮短曼賽龍柚種子萌芽時(shí)間,砧木種子播種前用100 mg/L GA_3浸種24 h,萌芽率和出苗率最高、生長(zhǎng)效果最好。4、通過(guò)四種嫁接方式對(duì)比改進(jìn)葡萄柚微芽嫁接,發(fā)現(xiàn)穿刺法更適合葡萄柚的微芽嫁接,嫁接成活率最高為75%。劈接法的嫁接成活率最低,只有18.67%;不同品種葡萄柚微芽嫁接成活率依次為:瑞路比星路比哈路比火焰里約紅;對(duì)田間莖尖和離體誘導(dǎo)莖尖兩個(gè)不同來(lái)源接穗進(jìn)行微芽嫁接試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)莖段誘導(dǎo)不定芽的作為接穗的微芽嫁接成活率為76.67%,田間嫩梢接穗的莖尖微芽嫁接成活率為38.33%,兩者之間的影響差異顯著。5、根據(jù)柑橘黃龍病病原的核苷酸序列設(shè)計(jì)PCR引物,利用PCR對(duì)疑似黃龍病的星路比、里約紅、瑞路比、哈路比、火焰進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)帶毒癥狀的植株均擴(kuò)增到特異性條帶,將以上感病植株的莖段分別進(jìn)行莖尖微芽嫁接后,成活的嫁接苗則沒(méi)有特異性條帶,表明莖尖微芽嫁接能有效脫出感病植株上的柑橘黃龍病病原,可以作為獲得無(wú)病毒苗木的有效途徑。
【學(xué)位單位】：西南林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S666.3
【部分圖文】：

圖 1 四種莖尖嫁接方式示意圖A：“T”接法。B：三角形法。C：劈接法。D：穿刺法。Figure 1 The diagram of the four STG methodsA:“T”shaped method. B:triangle method. C:Cleft grafting method. D:puncture method.

圖 2 曼賽龍柚種子萌發(fā)過(guò)程A:種子生根； B:種子轉(zhuǎn)綠； C:開始萌芽； D:種子出苗； E:幼苗健康生長(zhǎng)； F:不定量根系。Fig 2 Mansailong seed germination processA:Rooting of seeding B:Seed transformed into greenC:Seed germination D:Seed emergenceE:Seedlings healthy growth F:Seedlings not quantitative take root.

圖 3 不同生長(zhǎng)期接穗對(duì)葡萄柚微芽嫁接成活的影響Figure 3 different growth period a scion of grapefruit bud graft survival9-10 月晚秋時(shí)期，溫度下降空氣干燥，加上葡萄柚本身秋梢長(zhǎng)勢(shì)較弱，較多，經(jīng)過(guò)消毒長(zhǎng)容易褐化，消毒時(shí)間短外生菌內(nèi)生菌急速繁殖，即使接穗失活因此萌芽率最低。11 月之后基地葡萄柚新梢黃化長(zhǎng)勢(shì)不好或自

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2819818