【摘要】：從新疆哈密、吐魯番、鄯善、五家渠、昌吉、石河子、博樂(lè)、伊犁和阿克蘇9個(gè)地區(qū)的葡萄種植區(qū)采集典型的穗軸褐枯病病樣,經(jīng)大量分離和純化共獲得141個(gè)菌株,根據(jù)菌落特征,初步認(rèn)為這些菌株屬于鏈格孢屬(Alternaria sp.)中的小孢子組的成員。進(jìn)一步根據(jù)其菌落特征、分生孢子、分生孢子梗和著生方式,初步確定這些分離菌分屬于兩種鏈格孢屬真菌。選取其代表性菌株進(jìn)行致病性測(cè)定,其發(fā)病癥狀與田間自然發(fā)病癥狀相一致,并從接種的發(fā)病株上分離到原菌株。運(yùn)用分子生物技術(shù)對(duì)致病菌進(jìn)行鑒定,采用真菌rDNA-ITS通用引物(ITS1/ITS4)和組蛋白H3基因引物(H3-1a/H3--1b)進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測(cè)序,將獲得序列在Genbank中進(jìn)行比對(duì)并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),進(jìn)一步驗(yàn)證了形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果,確定引起新疆葡萄穗軸褐枯病的病原菌分別為細(xì)極鏈格孢Alternaria tenuissima和鏈格孢Alternaria alternata。這一結(jié)果與過(guò)去普遍認(rèn)為引起新疆葡萄穗軸褐枯病的病原為葡萄鏈格孢Alternaria viticola的報(bào)道有明顯不同。對(duì)兩種病原菌的生物學(xué)特性進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明兩種病原菌對(duì)溫度的適應(yīng)范圍較廣,5℃~35℃菌絲均可生長(zhǎng),其菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的最適溫度均為25℃左右,高于35℃或低于5℃均不利于病原菌生長(zhǎng)和孢子萌發(fā);其菌絲生長(zhǎng)對(duì)濕度的要求并不嚴(yán)格,在25%~100%相對(duì)濕度下均可較好的生長(zhǎng),但其分生孢子的萌發(fā)需要較高的濕度,以90%~100%的相對(duì)濕度萌發(fā)最好,孢子的萌發(fā)率可達(dá)60%以上,而相對(duì)濕度降為75%時(shí),其孢子的萌發(fā)率則降為30%左右,相對(duì)濕度降為50%,則僅有15%左右的孢子可以萌發(fā),所以該病發(fā)生的適宜濕度范圍應(yīng)為75%以上,在開(kāi)花前后一旦遇到陰雨連綿的天氣,病害往往會(huì)大流行。光照條件對(duì)兩種病原菌的侵染發(fā)病無(wú)顯著影響,但紫外線對(duì)兩種病原菌均有抑制作用,紫外照射時(shí)間越長(zhǎng),抑制越明顯。實(shí)驗(yàn)證明兩種病原菌均能直接侵入葡萄穗軸的組織中,但傷口侵染發(fā)病的速度快于直接侵染。溫度對(duì)該病的潛育期影響很大,當(dāng)溫度達(dá)到25℃左右,其潛育期8天;當(dāng)溫度為5℃,兩種病原菌侵染葡萄穗軸的潛育期達(dá)15d,說(shuō)明過(guò)低的溫度對(duì)病原菌的侵染是不利的。經(jīng)對(duì)常用的15種殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)藥劑篩選,并通過(guò)離體接種的方法對(duì)這些藥劑的預(yù)防和保護(hù)作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn),查明這些藥劑對(duì)兩種鏈格孢菌的毒力基本一致。經(jīng)綜合評(píng)定其中以70%正品甲基托布津、80%VA霉鋅、50%戊唑醇對(duì)葡萄穗軸褐枯病的防治效果較好,且防效比較穩(wěn)定,在病害發(fā)生的關(guān)鍵期,即花序分離期和花后1周進(jìn)行兩次防治會(huì)取得良好的防治效果;而以前報(bào)道防效較好的75%百菌清和80%多菌靈對(duì)兩種病原菌抑制效果都較差,不適合作為大田防治的主要用藥。
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S436.631
【圖文】：

圖 2-1 葡萄穗軸褐枯病田間病害癥狀注：A、C: 田間嚴(yán)重發(fā)病的病穗癥狀；B、D：部分小穗被害癥狀Fig.2-1 Symptoms of grape Alternaria rotNote：A、C：Symptoms on a severely diseased rachis in tfield; B、D：Symptoms on some diseased spikelets結(jié)果 7 個(gè)葡萄種植區(qū)所采 210 個(gè)葡萄穗軸褐枯病病樣進(jìn)行分離為 67.14%（見(jiàn)表 2-4）。而 32.86%穗軸上未分離出菌株升汞消毒時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而殺死了致病菌。根據(jù)采集地和葡萄品明顯看出，不同采集地區(qū)的病原菌分離率不同，石河子、率高于哈密、吐魯番和阿克蘇地區(qū)。不同葡萄品種之間分巨峰和紅提的分離率均高于 85%，而里扎馬特、無(wú)核白表 2-4 葡萄穗軸褐枯病病原菌分離結(jié)果Table2-4 The isolated results of grape Alternaria rot品種Cultivar病樣總數(shù)Disease sample分離菌株數(shù)Number分離率Separat

新疆葡萄穗軸褐枯病病原鑒定、發(fā)生規(guī)律及防治的研究伊犁地區(qū) 紅提 20 17 85.00里扎馬特 10 5 50.00哈密地區(qū) 紅提 15 11 73.33無(wú)核白 20 9 45.00瑞豐 10 9 90.00吐魯番地區(qū) 無(wú)核白 25 4 16.00阿克蘇地區(qū) 夏黑 20 4 20.00總計(jì) 210 141 67.14經(jīng)在 PDA 培養(yǎng)基對(duì)純化后的菌株進(jìn)行觀察，所獲各地菌株菌落顏色特征有其大致分為 5 種類型（見(jiàn)圖 2-2）：一是灰白色，二是灰黑色，三是灰綠色色，五是深灰色。在光學(xué)顯微鏡下觀察分生孢子的形狀和著生方式，初步認(rèn)為鏈格孢屬（Alternaria sp.）真菌，對(duì)于這些分離株是否具有致病性，是否褐枯病的致病菌，還需進(jìn)一步做致病性分析和鑒定。

部分轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)孢細(xì)胞，可二次分支或產(chǎn)孢。將這些分離株初步鑒定為 A. alternata (見(jiàn)圖2-3 中 D、E、F)。圖 2-3 葡萄穗軸褐枯病菌 A.tenuissima 和 A.alternata 的培養(yǎng)特性注：A、B、C 分別為細(xì)極鏈格孢菌落形態(tài)、著生方式及分生孢子形態(tài)；D、E、F 分別為鏈格孢菌落形態(tài)、著生方式及分生孢子形態(tài)Fig.2- 3 Culture characteristics of grape Alternaria rot of A.tenuissima and A.alternataNote: Colonies, mode of production and conidia ofAlternaria tenuissima (A, B, C) and A. alternata(D,E,F)2.4 分離菌致病性測(cè)定根據(jù)形態(tài)學(xué)鑒定的結(jié)果，從分離得到的菌株中分別選取兩個(gè)代表性菌株 Y-1 和86-1，配制成孢子懸浮液進(jìn)行噴霧接種。4d 后，葡萄穗軸變褐（見(jiàn)圖 2-4），果實(shí)開(kāi)始脫落，發(fā)病嚴(yán)重的穗軸上著生黑色霉?fàn)钗铩＝?jīng)觀察，接種發(fā)病穗軸與田間葡萄穗軸褐枯病發(fā)病癥狀相符，經(jīng)對(duì)接種發(fā)病株進(jìn)行再分離，分離得到原病原菌。因此，認(rèn)為所分離的菌就是所采葡萄穗軸褐枯病的病原菌。ADCFBE

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2780189