【摘要】：玫瑰(Rosa rugosa)是薔薇科薔薇屬落葉灌木,我國(guó)玫瑰的野生資源僅零星分布于山東東部和遼寧南部沿海及吉林琿春圖們江入�？诟浇�,屬于珍稀瀕危植物,已列入國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生植物名錄。野生玫瑰含芬香、抗嚴(yán)寒、抗干旱、抗病等性狀基因,是栽培玫瑰育種資源的重要依托。隨著社會(huì)不斷發(fā)展、人類活動(dòng)逐漸增多,其野生分布區(qū)域日趨減小。為了更好的保護(hù)開發(fā)利用野生玫瑰,本研究利用CDDP分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)野生玫瑰進(jìn)行遺傳多樣性分析和構(gòu)建核心種質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:(1)野生玫瑰中多糖多酚含量較高,DNA提取較為困難,本研究在CTAB法提取植物DNA的基礎(chǔ)上,通過(guò)延長(zhǎng)水浴時(shí)間,氯仿異戊醇(24:1)的2~3次抽提等一系列方法,獲得高純度的野生玫瑰樣本DNA。(2)通過(guò)試驗(yàn)設(shè)計(jì)構(gòu)建并優(yōu)化野生玫瑰CDDP-PCR反應(yīng)體系,最終確立了20 ul總體系:2 x ES TaqMasterMix(含染料)10ul,40ng/ul DNA模板1ul,10pmol/ul引物1ul和8ul ddH_2O,并進(jìn)一步驗(yàn)證此反應(yīng)體系的穩(wěn)定性和重復(fù)性,結(jié)果表明此體系可用于野生玫瑰種質(zhì)資源遺傳關(guān)系的分析研究。(3)依據(jù)設(shè)計(jì)CDDP分析標(biāo)記引物的原則,設(shè)計(jì)了21條CDDP特異引物。其中有16條CDDP引物對(duì)野生玫瑰有鑒別能力,從中選擇出13條CDDP引物可以產(chǎn)生穩(wěn)定性好、清晰度高的條帶,用于120份供試野生玫瑰樣本的遺傳多樣性分析。(4)利用13條CDDP引物對(duì)120份野生玫瑰種質(zhì)資源進(jìn)行擴(kuò)增,共產(chǎn)生128條譜帶,每個(gè)引物平均擴(kuò)增條帶數(shù)為9.84條;其中多態(tài)性譜帶121條,占總條帶的94.53%。每條引物產(chǎn)生6~14條多態(tài)性譜帶,每條引物平均產(chǎn)生9.23條,多態(tài)性比率為77.78%~100.00%;特異條帶8條,比例為6.25%,結(jié)果表明野生玫瑰種質(zhì)資源間的遺傳度多樣性豐富、多態(tài)性程度較高。有效等位基因數(shù)(Ne)均值為1.5131,Nei’s遺傳多樣性指數(shù)(H)均值為0.3057,而Shannon信息指數(shù)(I)均值為0.4646。數(shù)據(jù)結(jié)果表明,野生玫瑰樣本中有豐富的遺傳多樣性。(5)通過(guò)對(duì)野生玫瑰種群水平上遺傳多樣性分析,野生玫瑰種群的各項(xiàng)遺傳多樣性指數(shù)均是東北琿春最大,威海成山的最小。說(shuō)明東北琿春種群遺傳多樣性最高,山東威海成山種群遺傳多樣性最低。(6)采用逐步聚類法對(duì)120個(gè)受試野生玫瑰樣本進(jìn)行核心種質(zhì)構(gòu)建,篩選得出26個(gè)核心種質(zhì),保留了原始種質(zhì)的20%的樣品,多態(tài)性位點(diǎn)數(shù)、有效等位基因數(shù)、Nei’s遺傳多樣性指數(shù)和Shannon信息指數(shù)的保留率分別達(dá)到97.52%、104.16%,108.38%和106.18%。t檢驗(yàn)結(jié)果表明,所構(gòu)建的野生玫瑰核心種質(zhì)遺傳多樣性指數(shù)與原始種質(zhì)差異不顯著,可以最大限度的代表原始種質(zhì)資源。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S685.12
【圖文】：

具有重大作用（圖 1）。但是隨著近幾年沿海區(qū)域工業(yè)開發(fā)、水產(chǎn)養(yǎng)殖、旅游度假以及其他人為因素的增多，野生玫瑰的野生分布區(qū)逐漸縮小。玫瑰野生種在 1992 年時(shí)作為國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物被編入《中國(guó)植物紅皮書》中。1.1.1 野生玫瑰形態(tài)特征野生玫瑰植株高可達(dá)到 2 米；莖粗壯，叢生；小枝密被絨毛，有針刺和腺毛，直立或彎曲，淡黃色的皮刺。具有 5-9 小葉，連葉柄 5-13 厘米；小葉橢圓形或倒卵狀橢圓形，先端銳尖或鈍，基部圓形或?qū)捫ㄐ�，邊緣有尖銳的鋸齒，上面深綠色，無(wú)毛，葉脈下陷，褶皺，下面灰綠色，中脈突起，網(wǎng)脈明顯；葉柄和葉軸密被絨毛和腺毛；托葉大，貼生于葉柄，離生部分卵形，邊緣具腺鋸齒，下面被絨毛�；▎紊谌~腋，或數(shù)朵簇生，苞片卵形，邊緣具腺毛；花期 5 月-6 月，花直徑大約 4-5.5 厘米；萼片卵狀披針形，花瓣倒卵形，單瓣，粉紅色到紫色紅色。果實(shí)扁球形，果期 8 月-9 月，直徑大約 2-2.5 厘米，磚紅色，肉質(zhì)，光滑，萼宿存（俞德浚，1974）。

圖 2 采樣地點(diǎn)，如紅點(diǎn)所示Fig 2. Sample collection localities, as shown with red dots.2 研究方法2.1 植物材料的采集與處理每份供試材料采集于野生玫瑰單株的 4～6 個(gè)健康無(wú)病害的嫩葉，用硅膠保存0℃ (圖 3)。

圖 2 采樣地點(diǎn)，如紅點(diǎn)所示Fig 2. Sample collection localities, as shown with red dots2 研究方法.1 植物材料的采集與處理每份供試材料采集于野生玫瑰單株的 4～6 個(gè)健康無(wú)病害的嫩葉，用硅膠保存于℃ (圖 3)。

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本文編號(hào)：2777061