【摘要】：果肉質(zhì)地和粘離核是影響桃果實(shí)品質(zhì)的重要因素,對(duì)消費(fèi)者滿(mǎn)意度、采后貯藏運(yùn)輸都有重要意義。桃果實(shí)成熟后軟化快,貯藏期短,給桃果實(shí)銷(xiāo)售增加壓力。為了解決這一問(wèn)題,本研究以大久保、08-9-106和08-9-107成熟過(guò)程中的桃果實(shí)為試材,確定08-9-106和08-9-107的粘/離核和肉質(zhì)表型,同時(shí)基于基因克隆和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析Ppa006857m和Ppa006839m之間的調(diào)控關(guān)系。本研究的主要內(nèi)容和結(jié)論如下:1.以大久保、08-9-106和08-9-107為試材,分析了果實(shí)成熟后期中果皮果肉硬度變化、粘離核性狀的形成以及中果皮和近核處果肉的乙烯釋放和相關(guān)基因表達(dá)的變化。在果實(shí)中果皮中,大久保在成熟期果肉硬度下降快,乙烯釋放明顯,同期PpPG、PpACS1和PpYUC11相對(duì)表達(dá)量呈先升后降趨勢(shì);而08-9-106雖然果肉硬度下降較快,但沒(méi)有明顯的乙烯釋放和乙烯合成相關(guān)基因(PpACS1和PpYUC11)的表達(dá);08-9-107在成熟后期硬度下降不明顯,沒(méi)有檢測(cè)到明顯的乙烯釋放和乙烯合成相關(guān)基因的表達(dá)。在近核處果肉中,大久保的果實(shí)表現(xiàn)為離核性狀,同期檢測(cè)到明顯的乙烯釋放和相關(guān)合成基因(主要為PpACS1)的表達(dá);而08-9-106的果實(shí)也表現(xiàn)為離核,但乙烯釋放和基因表達(dá)與中果皮類(lèi)似,均無(wú)明顯檢出;08-9-107表現(xiàn)為粘核,雖然乙烯釋放量和PpACS1表達(dá)較低。大久保屬于依賴(lài)乙烯的離核溶質(zhì)類(lèi)型,08-9-106屬于不依賴(lài)乙烯的離核溶質(zhì)類(lèi)型,08-9-107屬于依賴(lài)乙烯的粘核硬質(zhì)類(lèi)型。桃果肉硬度的變化及粘離核性狀的形成與PpPG基因的表達(dá)相關(guān)。2.以大久保、08-9-106和08-9-107桃果實(shí)為試材,克隆兩個(gè)PpPG基因,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,發(fā)現(xiàn)兩個(gè)PpPG基因在桃果實(shí)的表達(dá)部位沒(méi)有差異,基因Ppa006857m隨著離核溶質(zhì)桃果實(shí)成熟一直都是高表達(dá),基因Ppa006839m隨著粘核硬質(zhì)桃果實(shí)成熟而表達(dá)增加�；騊pa006857m高表達(dá)的情況下,基因Ppa006839m的表達(dá)相對(duì)的受到抑制,只有基因Ppa006857m不表達(dá)或者低表達(dá)的情況下,基因Ppa006839m才能相對(duì)高表達(dá)。這兩個(gè)PpPG基因之間可能存在拮抗的關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S662.1
【圖文】：

注釋?zhuān)簣D 2b 中，從左到右依次為大久保、08-9-106 和 08-9-107Fig. 2b The accession in from left to right was Okubo、08-9-106 and 08-9-107，respectively圖 2 不同桃種質(zhì)果實(shí)成熟過(guò)程中果肉硬度變化（a）及粘離核性狀（b）Fig. 2 Changes in firmness (a) and adhesion traits (b) of Okubo、08-9-106 and 08-9-107 during ripening of peach fruit2.3.1.2 桃果實(shí)成熟后期果核外觀由圖 2b 的直接觀察可知，大久保和 08-9-106 的桃果肉與果核分離，屬于離核類(lèi)型；08-9-10的桃果肉與果核粘連，屬于粘核類(lèi)型。結(jié)合 3 份種質(zhì)果實(shí)成熟期的果肉硬度和果實(shí)橫切面觀察，判定大久保和 08-9-106 屬于離核溶質(zhì)類(lèi)型，08-9-107 屬于粘核硬質(zhì)（或不溶質(zhì)）類(lèi)型。2.3.2 乙烯釋放對(duì)中果皮果肉硬度變化和粘離核性狀形成的影響PpPG 基因的表達(dá)受到乙烯的誘導(dǎo)（Goffreda，1992），為了分析 3 份桃種質(zhì)果肉硬度變化及粘/離性狀差異的原因，測(cè)定了桃果實(shí)成熟后期中果皮和近核果肉的乙烯釋放速率（圖 3）。由圖3a 發(fā)現(xiàn)，桃 08-9-107 中果皮果肉的乙烯釋放在花后 92~108 d 維持在較低水平，乙烯釋放速率在0.54~7.22 nL/（g·h）之間變化。在 2 個(gè)溶質(zhì)桃類(lèi)型中，大久保中果皮果肉在花后 92~103 d 緩慢釋放乙烯，之后乙烯釋放速率增大，到花后 108 d 乙烯釋放量達(dá)到 42.26 nL/（g·h），是花后 9

測(cè)定了桃果實(shí)成熟后期中果皮和近核果肉的乙烯釋放速率（圖 3）。由圖3a 發(fā)現(xiàn)，桃 08-9-107 中果皮果肉的乙烯釋放在花后 92~108 d 維持在較低水平，乙烯釋放速率在0.54~7.22 nL/（g·h）之間變化。在 2 個(gè)溶質(zhì)桃類(lèi)型中，大久保中果皮果肉在花后 92~103 d 緩慢釋放乙烯，之后乙烯釋放速率增大，到花后 108 d 乙烯釋放量達(dá)到 42.26 nL/（g·h），是花后 92d 的 15.31 倍；而另外一個(gè)溶質(zhì)桃 08-9-106 的中果皮果肉乙烯釋放量卻維持在極低的水平，花后92~108 d 在 0.26~2.20 nL/（g·h）波動(dòng)。該結(jié)果暗示，桃 08-9-106 中果皮果肉 PG 基因的表達(dá)變化和硬度的下降與其乙烯釋放無(wú)關(guān)。a b圖 3 不同桃種質(zhì)果實(shí)中果皮（a）和近核果肉（b）乙烯釋放速率的變化

二者 CDS 序列僅存在 5 個(gè) SNP 差異，因此本研究中設(shè)計(jì)了兼并引物，對(duì)這對(duì) PpPG 基因進(jìn)行了表達(dá)分析。由圖4a 可知，在中果皮果肉中，桃大久保和 08-9-106 的 PpPG 基因表達(dá)較高，但峰值出現(xiàn)的時(shí)間存在差異，大久保為花后 98 d 到 103 d；而 08-9-106 為花后 103 d。在果實(shí)成熟后期，桃 08-9-107 的中果皮果肉中 PpPG 基因的表達(dá)始終維持在較低的水平。由圖 4b 可知，在近核果肉處，桃大久保和 08-9-106 的 PpPG 基因表達(dá)規(guī)律與其在中果皮果肉類(lèi)似；而桃 08-9-107 近核果肉處的 PpPG基因表達(dá)量依然較低。分析基因表達(dá)與表型的關(guān)系，證實(shí) PG 基因的表達(dá)是導(dǎo)致 3 份種質(zhì)中果皮硬度變化和粘離核性狀形成的主要原因。圖 4 不同桃種質(zhì)果實(shí)成熟后期中果皮（a）和近核處果肉（b）PpPG 相對(duì)表達(dá)量Fig. 4 Expression level of PpPG in mesocarp (a) and flesh near endocarp (b) during Okubo、08-9-106 and 08-9-107fruits ripening2.3.4 相關(guān)基因表達(dá)分析驗(yàn)證果實(shí)乙烯釋放速率的變化為進(jìn)一步從分子水平揭示 3 份桃種質(zhì)果實(shí)成熟后期乙烯釋放速率差異的內(nèi)在機(jī)制，本研究選

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1 韓晴;桃果肉質(zhì)地和粘離核性狀兩個(gè)關(guān)鍵PpPG基因的表達(dá)和調(diào)控關(guān)系分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2019年

本文編號(hào)：2750977