【摘要】：為建立高效的增城菜心和連州菜心小孢子培養(yǎng)體系,本研究以3個增城菜心和3個連州菜心品種為試材進行小孢子培養(yǎng),研究不同基因型、細胞器抗氧化劑(VcNa)和植物生長調節(jié)劑(BR和TDZ)對小孢子胚胎發(fā)生及胚狀體再生成苗的影響,對獲得的小孢子再生植株進行倍性鑒定,并對增城菜心DH系植株進行園藝學性狀鑒定、小區(qū)產量分析和自交親和性測定。結果如下:1.在增城菜心小孢子培養(yǎng)中,3個供試材料均獲得胚狀體,其中‘17AY011’胚誘導率最高,為0.42胚·蕾~(-1),‘17AY010’最低,僅有0.16胚·蕾~(-1),兩者之間表現(xiàn)出顯著差異;添加一定濃度的細胞器抗氧化劑VcNa對誘導增城菜心胚胎發(fā)生具有顯著提高作用,當VcNa濃度為1μmol·L~(-1)和0.2μmol·L~(-1)時,‘17AY011’和‘17AY012’的胚誘導率分別達到最高,分別為2.75胚·蕾~(-1)和2.17胚·蕾~(-1);在增城菜心小孢子植株再生過程中,1μmol·L~(-1)~5μmol·L~(-1) VcNa可使直接成苗率顯著提高;通過流式細胞儀鑒定得出,3個增城菜心所獲得的再生植株中均有單倍體、雙單倍體和多倍體植株,其平均雙單倍體率為65.47%,其中‘17AY010’雙單倍體率最高,可達到71.43%,;對獲得的11個‘17AY012’DH系進行了園藝學性狀鑒定和產量分析,發(fā)現(xiàn)CX014、CX015、CX019、CX020、CX021為利用小孢子培養(yǎng)技術創(chuàng)制出的具有無毛、早熟、側薹分蘗能力極強優(yōu)良性狀的5個DH系;經鑒定5個DH系植株可作為自交不親和系應用。2.3個連州菜心材料的胚誘導率依次為0.45胚·蕾~(-1)、0.31胚·蕾~(-1)和0.25胚·蕾~(-1),最高與最低胚誘導率之間相差1.80倍;在培養(yǎng)基中添加0.02 mg·L~(-1)~0.06 mg·L~(-1) BR或0.1mg·L~(-1)~0.3 mg·L~(-1) TDZ可顯著提高‘17AY007’和‘17AY009’小孢子胚胎發(fā)生率;0.02 mg·L~(-1)~0.06 mg·L~(-1) BR對‘17AY007’和‘17AY009’直接成苗率有顯著提高作用。當TDZ濃度為0.2 mg·L~(-1)時,‘17AY007’的直接成苗率達到最高,為57.76%;當TDZ濃度為0.3 mg·L~(-1)時,‘17AY009’的直接成苗率最高,為57.36%;通過流式細胞儀鑒定得出連州菜心3個基因型材料再生植株的平均雙單倍體率為60.32%,其雙單倍體率最高達到64.29%,最低56.67%。
【學位授予單位】：沈陽農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S634.5
【圖文】：

則為單倍體再生植株（圖2，A）；當峰值在 200 附近時，表示該植株為雙單倍體（圖 2，B）；當峰值在 400 附近時，表示該檢測植株為四倍體（圖 2，C）。細胞器抗氧化劑organelle antioxidant試材material濃度Concentration（μmol·L-1）直接成苗率（%）Rate of embryosdirectlyconvert to plants（%）形成愈傷率（%）Rate of embryosconvert to callus（%）死亡率（%）Rate of embryosdeath（%）VcNa0 51.00±8.23b 33.23±4.63a 15.77±6.26b0.247.67±1.47b 37.33±2.66a15.00±1.37b17AY011 167.67±3.11a 16.24±2.28b 16.09±2.25b555.34±5.38ab 23.65±4.57b21.01±3.16b2541.67±6.34b 21.00±2.04b37.33±1.72

圖 3 小孢子再生植株葉片 DNA 相對含量曲線Fig. 3 DNA content distribution in leaves of regenerated plantA.單倍體 B：雙單倍體 C：多倍體A.Haploid B:Doubled haploid C: Polyploid如表 3-6 所示，‘17AY007’的雙單倍體率最高，達到 64.29 %，‘17AY009’的雙單倍體率最低，但也超過了 50 %。說明通過小孢子培養(yǎng)技術來獲得連州菜心的純系育種材料是可行的，在連州菜心育種工作中可以優(yōu)先選擇利用。表 3-6 連州菜心小孢子再生植株倍性鑒定Table 3-6 The ploidy identification results of Lianzhou flowering Chinese cabbage regenerated plants基因型 鑒定植株數(shù) 單倍體數(shù) 雙單倍體數(shù) 多倍體數(shù) 雙單倍體率（%）Genotype No. of evaluated Haploid Double haploid polyploid Doublingefficiency regenerated plants17AY007 28 4 18 6 64.2917AY008 10 3 6 1 60.0017AY009 30 8 18 5 56.67

【參考文獻】

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本文編號：2719864